0530KHẢO SÁT KHẢ NĂNG GÂY BỆNH VÀ ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA TRỰC KHUẨN MỦ XANH TRÊN BỆNH NHÂN TẠI BỆNH VIỆN 175 TỪ 2013 - 2014

KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   B GIÁO D C VÀ ÀO T O TR NG I H C M TP.HCM     BÁO CÁO KHÓA LU N T T NGHI P Tên đ tài: KH O SÁT KH N NG GÂY B NH VÀ KHÁNG KHÁNG SINH C A TR C KHU N M XANH TRÊN B NH NHÂN T I B NH VI N 175 T 11/2013 – 5/2014 KHOA CÔNG NGH SINH H C CHUYÊN NGÀNH: VI SINH CBHD: TS-BS V B o Châu SVTH: Tr n Th Di m H MSSV: 1053010312 Khóa: 2010 – 2014 Tp H Chí Minh, tháng 05 n m 2014 SVTH: TR N TH DI M H NG ng KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   L IC M N th c hi n t t đ tài khóa lu n t t nghi p này, em xin chân thành c m n th y V B o Châu ng i tr c ti p ch d y h ng d n, t o u ki n cho em hoàn thành t t khóa lu n t t nghi p th i gian qua Em xin chân thành g i l i c m n toàn th cán b khoa vi sinh B nh vi n 175 t n tình giúp đ , ch b o chúng em nh ng ki n th c th c t m i b ích, t o u ki n thu n l i nh t đ chúng em hoàn thành báo cáo khóa lu n C m n th y cô khoa công ngh sinh h c nhà tr ng gi ng d y trang b cho em ki n th c su t trình h c t p, t n tình quan tâm giúp đ em hồn thành khóa lu n Trong q trình th c hi n em khơng tránh kh i nh ng sai sót, r t mong nh n đ c s giúp đ , đóng góp c a th y cô anh ch đ em hồn thành t t khóa lu n t t nghi p Em xin chân thành c m n SVTH: TR N TH DI M H NG KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   DANH M C CÁC T VI T T T WHO World Health Organization NNIS National Nosocomial Infecttion Surveillance NCCLS The National Committe for Clinical Laboratory Standards( y Ban Qu c Gia v Các Chu n M c Phịng Thí Nghi m Lâm Sàng) BA Blood agar BHI Brain Heart Infusion MHA Mueller Hinton Agar AN Amikacin CAZ Ceftazidime CTX Cefotaxime CIP Ciprofloxacin IPM Imipenem FT Nitrofurantoin CS Colistin MEM Meropenem PT Pristinamycin TM Tobramycin P.aeruginosa Pseudomonas aeruginosa S.aureus Staphylococcus aureus K.pneumoniae Klepsiella pneumoniae E.coli Escherichia coli E.faecalis Enterococcus faecalis S Susceptible (nh y c m) I Intermediate (trung gian) R Resistant (đ kháng) N S ca d SVTH: TR N TH DI M H ng tính v i P.aeruginosa NG  i  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU     M CL C DANH M C CÁC T VI T T T i DANH M C HÌNH v DANH M C B NG BI U vi TV N Ph n I: T NG QUAN TÀI LI U I.1 TR C KHU N M XANH (Pseudomonas aeruginosa) I.1.1 L ch s phát hi n I.1.2 Danh pháp: I.1.3 c m sinh v t h c I.1.3.1 Hình th I.1.3.2 Nuôi c y I.1.3.3 Tính ch t sinh hóa I.1.3.4 Kháng nguyên – enzym – đ c t I.1.4 D ch t h c I.1.5 Sinh b nh h c I.1.6 Bi u hi n lâm sàng I.1.6.1 Nh ng y u t liên quân t i nhi m khu n Pseudomonas aeruginosa I.1.6.2 Các b nh lý nhi m trùng Pseudomonas aeruginosa 11 I.1.6.3 Tình hình nhi m Pseudomonas aeruginosa 14 I.2 NHI M TRÙNG B NH VI N[2] 15 I.2.1 nh ngh a: 15 I.2.2 Ngu n lây nhi m 16 I.2.3 ng lây nhi m: 16 I.2.4 Các y u t nh h ng: 16 SVTH: TR N TH DI M H NG  ii  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   I.2.5 Các nhi m trùng b nh vi n th ng g p 17 I.2.6 H u qu c a nhi m trùng b nh vi n 17 I.2.7 Các bi n pháp phòng ng a 17 I.2.8 Tình hình nhi m trùng b nh vi n c a P.aeruginosa 18 I.3 KHÁNG SINH 19 I.3.1 nh ngh a 19 I.3.2 Phân lo i kháng sinh 19 I.3.3 C ch tác đ ng c a kháng sinh 20 kháng kháng sinh:[14] 21 I.3.4 I.3.4.1 Hi n t ng đ kháng kháng sinh: 21 I.3.4.2 Nguyên nhân vi khu n kháng thu c kháng sinh: 22 I.3.4.3 C ch kháng thu c kháng sinh c a vi khu n 22 I.3.4.4 Tình hình đ kháng kháng sinh c a Pseudomonas aeruginosa hi n 23 PH N II: IT NG, V T LI U VÀ PH NG PHÁP NGHIÊN C U 25 II.1 IT NG NGHIÊN C U: 26 II.2 A I M VÀ TH I GIAN NGHIÊN C U: 26 II.3 V T LI U NGHIÊN C U: 26 II.3.1 Mơi tr ng, hóa ch t đ ni c y vi khu n: 26 II.3.2 D ng c , trang thi t b 26 II.4 PH II.4.1 Ph NG PHÁP VÀ K THU T NGHIÊN C U 27 ng pháp nghiên c u: 27 II.4.2 K thu t nghiên c u: 28 II.4.2.1 i v i b nh ph m m d ch, ch t d ch ph qu n, n c ti u, d ch màng ph i, phân… 28 II.4.2.2 B nh ph m máu: 29 II.5 PH NG PHÁP NH DANH P.AERUGINOSA 32 II.5.1 Kh o sát khóm khu n th ch BA 32 SVTH: TR N TH DI M H NG  iii  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   II.5.2 nh danh b ng môi tr ng Uriselect 32 II.5.3 Kh o sát khu n l c b ng ph ng pháp nhu m gram 33 II.5.3 Th nghi m Oxidase 35 II.6 K THU T KHÁNG SINH THEO PH NG PHÁP KIRBY-BAUER 36 II.6.1 Nguyên t c: 36 II.6.2 V t li u ph II.6.2.1 ng pháp 36 a kháng sinh 36 II.6.2.2 Môi tr ng 37 II.6.2.3 Cách ti n hành 37 PH N III: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 41 III.1 K T QU PHÂN L P NH DANH 42 III.1.1 T l nhi m P.aeruginosa t m u b nh ph m : 42 III.1.2 T l phân l p đ c P.aeruginosa t m u b nh ph m 43 III.1.3 K t qu nhi m P.aeruginosa theo gi i tính: 46 III.1.4 K t qu nhi m P.aeruginosa theo đ tu i 47 III.2 M C KHÁNG KHÁNG SINH C A P.AERUGINOSA 49 PH N IV: K T LU N VÀ NGH 53 IV.1 K T LU N: 54 IV.2 NGH : 54 TÀI LI U THAM KH O I PH L C III     SVTH: TR N TH DI M H NG  iv  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   DANH M C HÌNH Hình 1: Pseudomonas aeruginosa Hình 2: P.aeruginosa tiêu huy t Hình 3: P.aeruginosa môi tr môi tr ng BA 32 ng Uriselect 33 Hình 4: Hình nh nhu m Gram P.aeruginosa 35 Hình 5: P.aeruginosa d   ng tính v i oxidase 36   SVTH: TR N TH DI M H NG  v  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   DANH M C B NG BI U B ng 1: B ng ký hi u kháng sinh làm kháng sinh đ cho P.aeruginose 40 B ng 2: C c u loài vi khu n gây b nh phân l p đ c 42 Bi u đ 1: T l loài vi khu n gây b nh phân l p đ c 43 B ng 3: K t qu nhi m P.aeruginosa theo t ng m u b nh ph m 44 Bi u đ 2: K t qu nhi m P.aeruginosa theo t ng m u b nh ph m 45 B ng 4: T l nhi m P.aeruginosa theo gi i tính: 46 Bi u đ 3: K t qu nhi m P.aeruginosa theo gi i tính 47 B ng 5: K t qu nhi m P.aeruginosa theo đ tu i 47 Bi u đ 4: T l nhi m P.aeruginosa theo đ tu i 48 B ng 6: T l đ kháng kháng sinh c a P.aeruginosa b nh nhân 50 Bi u đ 5: T l kháng kháng sinh c a P.aeruginosa 51         SVTH: TR N TH DI M H NG  vi  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   TV N Nhi m khu n b nh vi n m t nh ng thách th c m i quan tâm hàng đ u c a ngành y t t i Vi t Nam c ng nh toàn th gi i Trong đó, m t nh ng tác nhân ph bi n quan tr ng gây nhi m khu n b nh vi n hi n tr c khu n m xanh -Pseudomonas aeruginosa Nhi m khu n tr c khu n m xanh gây th ng n ng có t l t vong cao dovi khu n kháng l i h u h t lo i kháng sinh thông th ng Nh ng n m g n nhi m trùng tr c khu n m xanh ngày nhi u song song v i t l xu t hi n, m c đ đ kháng kháng sinh c a vi khu n c ng gia t ng đ i v i nhi u lo i kháng sinh Vi c phát hi n k p th i theo dõi, đánh giá th ng xuyên m c đ gây b nh kh n ng đ kháng kháng sinh c a tr c khu n m xanh r t c n thi t cho ch n đoán u tr Xu t phát t tình hình th c t đó, chúng tơi th c hi n đ tài nh m: M c tiêu: - Kh o sát tình hình nhi m khu n tr c khu n m xanh b nh nhân - Kh o sát tình hình đ kháng kháng sinh c a tr c khu n m xanh SVTH: TR N TH DI M H   NG     1  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   Ph n I: T NG QUAN TÀI LI U SVTH: TR N TH DI M H   NG     2  KH HÓA LU N T T NGH HI P GV VHD: TS.BS S V B O CHÂU   14 12.5 12 10 2.9 2.6 0 M d ch N Máu c ti u Phân B nh phh m khác Bi u đ 2: K t qu nhi m P.aerugin osa theo t ng m u b nnh ph m Trong b nh ph m xét ng ghi m, t l b nh ph m nhi m P P.aeruginosaa chi m t l cao nh t b nh ph m máu (12,5%), ( ti p theo m d ch (22,9%) n c ti u 6%) (2,6 h c t , nhi m khu u n huy t ddo P.aeruginnosa có th xu t phátt t vi c Trên th đ t ng th , ng d n ti u ho c nhi n m t cácc v t b ng, v t m … SV VTH: TR N TH DI M H   NG G   45  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   III.1.3 K t qu nhi m P.aeruginosa theo gi i tính: B ng 4: T l nhi m P.aeruginosa theo gi i tính: Gi i tính N T l (%) Nam 16/438 3.7 P > 0.05 N 5/286 1.7 Theo k t qu th ng kê, p > 0.05 nên t l nhi m P.aeruginosa theo gi i tính khơng có s khác bi t v m t th ng kê Tuy nhiên, theo nghiên c u c a m t s tác gi , t l phân l p đ lo i b nh ph m th ng, v t th nam cao h n so v i n nguyên nhân có th t l ch n ng lao đ ng, sinh ho t, tai n n qu c a chúng tôi, t l nhi m P.aeruginosa SVTH: TR N TH DI M H   c P.aeruginosa NG   nam cao h n so v i n Theo k t nam cao h n chi m 3,7%   46  KH HÓA LU N T T NGH HI P GV VHD: TS.BS S V B O CHÂU   3.7 3.5 1.7 2.5 1.5 0.5 Nam m N Bi u đ 3: K t qu nhi m P.aeeruginosa ttheo gi i tínnh III.1.4 K t qu u nhi m P.aeruginos P sa theo đ ttu i B ng 5: K t qu nhi n m P.aeeruginosa thheo đ tu i tu i N T l (%) 6 60 2/47 4.3 SV VTH: TR N TH DI M H   NG G   p > 0.05 47  KH HÓA LU N T T NGH HI P GV VHD: TS.BS S V B O CHÂU   Theo k t qu , p > 0.05 nên t l nhi m P.aeruginoosa theo t nng nhóm tuu i ơng có s khác k bi t v m t th ng kê khô 4.3 4.5 3.4 3.5 1.9 2.5 1.5 0.5 60 Bi u đ 4: T l nhi n m P.aeeruginosa thheo đ tu i V m t lý l thuy t, kh k n ng nh hi m b nh t l ngh chh v i s c đ kháng c a c th t l thu n v i th i giaan ti p xúc v i mơi tr - ng bên nggồi l đ ng, tii p xúc nhii u v i bênn ngoài, d g p tu i t 20-60 đ tu i lao h ch n th ng laao đ ng, sin nh ho t ho t đ ng khác V Vì v y t l nhi m khu n l r t cao - tu i >60, s c đ kháng suy s gi m y u đi, th nng m c cácc b nh lý m mãn tính ph i h p, kh n ng n ch ng l i vi khu n gi m, th kh n ng m c b nh cao Theo nghiên n c u c a chúng g tôi, t l nhi m b nnh đ tu i ccao nh t chi m 4,3% SV VTH: TR N TH DI M H   NG G   48  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   - tu i 0.05 nên t l nhi m theo gi i tính khơng có s khác bi t v m t th ng kê  P.aeruginosa gây nhi m b nh cao nhóm tu i >60 (4,3%), p >0.05 nên t l nhi m theo nhóm tu i khơng có s khác bi t v m t th ng kê  P.aeruginosa kháng h u h t kháng sinh nh Meropenem (90.48%), Ceftazidime (85.72%), Cefotaxime (85.71%) nh y v i Imipenem (4.76%), Ciprofloxacin (23.81%) IV.2 NGH : D a k t qu nghiên c u, chúng tơi xin có ki n ngh sau: - Nên theo dõi tình hình gây b nh đ kháng kháng sinh c a P.aeruginosa th ng xuyên đ có th có m t chi n l t s d ng kháng sinh h p lý hi u qu - C n t ng c ng giám sát v sinh khoa phòng, đ c bi t khu v c xung quanh phòng vi sinh, khu v c b nh nhân, nhà v sinh, th c hi n nghiêm ng t bi n pháp an toàn (đ c bi t r a tay v i dung d ch sát khu n) s làm gi m đ khu n th - ng trú nh P.aeruginosa t i mơi tr Có nh ng bi n pháp tuyên truy n t i ng c vi ng b nh vi n i dân v vi c nhi m khu n vi c s d ng kháng sinh m t cách h p lý, cách li u SVTH: TR N TH DI M H   NG     54  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   - Do th i gian làm khóa lu n ng n nên k t qu c a ch a ph n ánh h t đ c tình hình gây b nh đ kháng kháng sinh c a P.aeruginosa C n theo dõi thêm đ có k t qu xác h n SVTH: TR N TH DI M H   NG     55  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   TÀI LI U THAM KH O Ti ng Vi t: Tr n Th Ng c Anh (2007), S đ kháng kháng sinh c a vi khu n gây b nh th g p t i b nh vi n Nhi ng ng 2, Y h c TP HCM Nguy n Thanh B o (2006), Vi khu n h c, Khoa Y, B môn vi sinh, ih cYD c HCM Thân c D ng (2007), Tác nhân vi khu n th ng g p nhi m trùng b nh vi n, H i th o Nhi khoa Vi t Nam- an M ch T Th c Linh, (2007), Kh o sát đ nh l ng s nh y c m kháng sinh c a Pseudomonas aeruginosa nhi m trùng hô h p b nh vi n t i b nh vi n Ch R y t tháng 03/2007-08/2007, lu n v n c nhân – Tr ng H M Tp HCM ùi ình Ngh a, Ph m Anh Tu n, Ph m Th Hu nh Giao, Nguy n H ng Tr Nguy n Thiên Bình, Nguy n Th Ph ng Lan, Nguy n Anh Trí, Nguy n Ph ng, c Huy, (2010), Kh o sát tình hình đ kháng kháng sinh c a vi khu n t i khoa H i s c tích c c Ch ng đ c b nh vi n h i s c c p c u Tr ng V ng Tr n V n Ng c (2008), S đ kháng kháng sinh c a vi khu n gây b nh viêm ph i b nh vi n ph ng pháp u tr thích h p giai đo n hi n H Y D c TP HCM Nguy n V n Minh, Th c t p vi sinh c s tr Nguy n V n Minh, D ng H M Tp HCM ng Nh t Linh (2008), Th c t p vi sinh gây b nh H M Tp HCM SVTH: TR N TH DI M H   NG     I  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   Hu nh Ph ng Trang (2008), Nhi m trùng huy t Pseudomonas spp tính kháng kháng sinh c a Pseudomonas spp lu n v n c nhân – Tr b nh vi n Nhi ng t 1/2007- 4/2008, ng H M Tp HCM 10 Nguy n S Minh Tuy t, V Th Châu H i, Tr ng Anh D ng, Lê Th Tuy t Nga (2009), Kh o sát vi khu n gây nhi m khu n b nh vi n t i b nh viên Nhân dân Gia nh 11 Ph m Hùng Vân nhóm nghiên c u MIDAS “Nghiên c u đa trung tâm v tình hình đ kháng Imepenem Meropenem c a tr c khu n Gram (-) d m c k t qu 16 b nh vi n Vi t Nam” Phịng thí nghi m NK-BIOTEK Nguy n Tri Ph ng, iH cYD n v Vi sinh B nh viên c Tp HCM Ti ng Anh: 12 WHO(2001), “WHO Global Strategy for Containment of Antimicrobial Resistance” 13 CDC (2001) National Nosocomial Infection Surveillance (NNIS) system report, data summary from January 1992 June 2002, Am I infect control Internet: 14 http://glomedvn.vn/vn/san-pham.aspx?cate=23&thuoctiem&drugs=152&meropenem-500-glomed-bot-pha-tiem.html 15.http://idoc.vn/tai-lieu/giao-trinh-truc-khuan-mu-xanh.html 16.http://idoc.vn/tai-lieu/nhiem-khuan-do-pseudomonas.html 17.http://tudu.vn/vn/thong-tin-y-hoc/y-hoc-cho-moi-nguoi/y-hoc-thuong-thuc/nhiemtrung-benh-vien/ SVTH: TR N TH DI M H   NG     II  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   PH L C I Môi tr ng: BA (Blood agar) Enzymatic Digest of Casein 15 g Enzymatic Digest of Animal Tissue g Yeast Extract g Tinh b t b p g Sodium Chloride g Agar 14 g pH: 7.0 ± 0.2 at 25oC Cơng th c có th đ c u ch nh / ho c b sung theo yêu c u đ đáp ng k thu t th c hi n MHA (Mueller Hinton Agar) Beef Extract g Axit Hydrolysate of Casein 17,5 g Tinh b t 1,5 g Agar 17 g pH 7,3 ± 0,1 25 ° C Cơng th c có th đ c u ch nh / ho c b sung theo yêu c u đ đáp ng k thu t th c hi n SVTH: TR N TH DI M H   NG     III  KHÓA LU N T T NGHI P GVHD: TS.BS V B O CHÂU   BHI (Brain Heart Infusion) Brain Heart Infusion 17,5 g Enzyme Digest of Gelatin 10 g Dextrose g Natri clorua g Disodium Phosphate 2,5 g Th c pH: 7,4 ± 0,2 25 ° C Công th c có th đ c u ch nh / ho c b sung theo yêu c u đ đáp ng k thu t th c hi n SVTH: TR N TH DI M H   NG     IV