Bên cạnh các giống loài động, thực vật phiêu sinh làm thức ăn tươi sống như tảo, giáp xác râu ngành, Artemia thì luân trùng Rotifer đặc biệt được xem là thức ăn tự nhiên quan trọng cho ấ
Trang 1TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ
calyciflorus) BẰNG TẢO CHLORELLA
Cần Thơ, 2011
Sinh viên thực hiện
NGUYỄN NGỌC BÍCH MSSV: 0753040006 LỚP: NTTS K2
Trang 2TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN
MÃ SỐ: 304
THỬ NGHIỆM
NUÔI LUÂN TRÙNG NƯỚC NGỌT (Brachionus
calyciflorus) BẰNG TẢO CHLORELLA
Cán bộ hướng dẫn Sinh viên thực hiện
ThS NGUYỄN HỮU LỘC NGUYỄN NGỌC BÍCH MSSV: 0753040006
Lớp: NTTS K2
Trang 3
LỜI CẢM TẠ
Qua quá trình học tập tại trường Đại học Tây Đô, tôi xin chân thành cám ơn Ban Giám Hiệu Trường cùng quý Thầy Cô đã tạo điều kiện cho tôi được học tập, rèn luyện tại Trường trong suốt những năm qua
Tôi xin bài tỏ lòng biết ơn sâu sắc đối với Thầy Nguyễn Hữu Lộc đã tận tình hướng dẫn cho tôi trong suốt thời gian làm đề tài
Tôi xin chân thành cám ơn quý Thầy Cô - Khoa Sinh Học Ứng Dụng - Trường Đại Học Tây Đô đã truyền đạt cho tôi những kiến thức quý báo trong những năm học vừa qua
Cuối cùng tôi xin gửi lời cám ơn chân thành đến Thầy cố vấn học tập Tạ Văn Phương
và các bạn lớp Nuôi trồng thủy sản K2 đã động viên, giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, cũng như thực hiện đề tài
Chân thành cám ơn!
Nguyễn Ngọc Bích
Trang 4quả thí nghiệm 1 cho thấy giữa mật độ tảo Chlorella và khối lượng cá rô phi trong các
bể cá – tảo có mối tương quan với nhau Trong điều kiện nhiệt độ từ 27,7 – 31,2 oC và
pH từ 7,5 – 7,9 thì trong các bể có khối lượng cá càng cao thì mật độ tảo càng cao nhưng khi khối lượng cá rô phi tăng cao ở một giới hạn nhất định (0,5 – 2 kg) thì mật
độ tảo giảm Thí nghiệm 2 ở nhiệt độ từ 26,9 – 31,2 oC và pH từ 8 – 8,2 thì nghiệm
thức có mật độ tảo Chlorella 80.000 tế bào tảo/luân trùng/ngày thích hợp nhất cho sự
phát triển của luân trùng Sự phát triển của quần thể luân trùng kéo dài được 7 ngày và mật độ luân trùng đạt cực đại là 814 cá thể/ml
Từ khóa: Luân trùng nước ngọt, tảo Chlorella, cá rô phi
Trang 5LỜI CAM KẾT
Tôi xin cam kết luận văn này được hoàn thành dựa trên các kết quả nghiên cứu của tôi
và các kết quả của nghiên cứu này chưa được dùng cho bất cứ luận văn cùng cấp nào khác
Ký tên
Nguyễn Ngọc Bích
Trang 6MỤC LỤC
Lời cảm tạ i
Tóm tắt ii
Lời cam kết iii
Mục lục iv
Danh sách bảng v
Danh sách hình vi
CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ 1
1.1 Giới thiệu 1
1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1
1.3 Nội dung nghiên cứu 2
CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 3
2.1 Sinh học luân trùng 3
2.1.1 Đặc điểm phân loại và hình thái 3
2.1.2 Đặc điểm sinh sản và chu kỳ sống 5
2.2 Kỹ thuật nuôi luân trùng 6
2.2.1 Các yếu tố môi trường nuôi luân trùng 6
2.2.2 Các hình thức nuôi luân trùng 7
2.2.3 Các loại thức ăn nuôi luân trùng và cách cho ăn 9
2.3 Tảo Chlorella 12
2.3.1 Hệ thống phân loại và hình thái 12
2.3.2 Đặc điểm dinh dưỡng 12
2.3.3 Đặc điểm sinh sản và vòng đời 12
2.4 Cá rô phi 12
2.4.1 Hệ thống phân loại 12
2.4.2 Cơ sở sinh thái học của hệ thống cá rô phi – tảo chlorella 13
2.5 Lịch sử phát triển và tình hình nghiên cứu luân trùng 13
Trang 7CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15
3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 15
3.2 Vật liệu nghiên cứu 15
3.3 Phương pháp nghiên cứu 15
3.3.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của khối lượng cá rô phi đến sự phát triển của tảo Chlorella 15
3.3.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng mật độ tảo lên sự phát triển của quần thể luân trùng 16
3.4 Các chỉ tiêu theo dõi 17
3.5 Phương pháp xử lý số liệu 18
CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19
4.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của khối lượng cá rô phi đến sự phát triển của tảo Chlorella 19
4.1.1 Các yếu tố môi trường nuôi tảo 19
4.1.2 Sự phát triển của tảo 20
4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng mật độ tảo lên sự phát triển của quần thể luân trùng 22
4.2.1 Các yếu tố môi trường nuôi luân trùng 22
4.2.2 Sự phát triển của luân trùng 25
CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 31
TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC A
Trang 8DANH SÁCH BẢNG
Trang Bảng 4.1: Biến động giá trị trung bình của pH, nhiệt độ ở thí nghiệm 1 19
Bảng 4.2: Biến động mật độ tảo qua các ngày nuôi (tế bào/mL) 20
Bảng 4.3: Biến động giá trị trung bình của pH, nhiệt độ ở thí nghiệm 2 23
Bảng 4.4: Hàm lượng NO-2 qua các đợt thu mẫu (ppm) 24
Bảng 4.5: Hàm lượng TAN qua các đợt thu mẫu (ppm) 24
Bảng 4.6: Hàm lượng NH3 qua các đợt thu mẫu (ppm) 25
Bảng 4.7: Biến động mật độ luân trùng ở các nghiệm thức (cá thể/mL) 26
Bảng 4.8: Tỉ lệ mang trứng của luân trùng (%) 28
Bảng 4.9: Tốc độ tăng trưởng đặc thù 30
Trang 9DANH SÁCH HÌNH
Trang
Hình 2.1: Hình thái của luân trùng nước ngọt B.calyciflorus 3
Hình 2.2: Đặc điểm cấu tạo của Brachionus plicatilis (Dhert, 1996) 4
Hình 2.3: Vòng đời của luân trùng (Dhert, 1996) 6
Hình 3.1: Bố trí thí nghiệm 1 16
Hình 3.2: Bố trí thí nghiệm 2 .17
Hình 4.1: Biểu đồ thể hiện biến động mật độ tảo 21
Hình 4.2: Tương quan mật độ tảo và khối lượng cá rô phi 22
Hình 4.3: Biểu đồ thể hiện biến động mật độ luân trùng 27
Hình 4.4: Biểu đồ thể hiện tỉ lệ mang trứng của luân trùng 29
Hình 4.5: Biểu đồ thể hiện tốc độ tăng trưởng đặc thù 30
Trang 10Bên cạnh các giống loài động, thực vật phiêu sinh làm thức ăn tươi sống như tảo, giáp xác râu ngành, Artemia thì luân trùng (Rotifer) đặc biệt được xem là thức ăn tự nhiên quan trọng cho ấu trùng các loài tôm cá có giá trị kinh tế cao như ấu trùng cua (Quách Kha Ly, 2007), cá bống tượng (Trần Thị Hồng An, 1994)…Theo Trương Sĩ Kỳ (2004) thì luân trùng là sinh vật có kích thước nhỏ, bơi lội chậm nên chúng là thức ăn thích hợp của ấu trùng, đặc biệt là trong những ngày tuổi đầu tiên Cho đến nay người
ta đã thống kê được hơn 60 loài ấu trùng cá và khoảng 18 loài giáp xác được nuôi bằng loại thức ăn này
Hiện nay có khoảng 2000 loài luân trùng được biết đến và các loài được nuôi phổ biến
ở môi trường nước lợ là Brachionus plicatilis, B.rotundiformis và môi trường nước
ngọt là B.rubens, B.calyciflorus (Dhert, 1996) Trong đó, Brachionus calyciflorus như
là nguồn thức ăn ban đầu cho hầu hết các loài cá nước ngọt Loài luân trùng này có nhiều dòng với kích cỡ khác nhau, vì vậy chúng thích hợp với các ấu trùng có kích thước khác nhau (Francis O Arimono, 2006)
Kỹ thuật nuôi luân trùng đã được nghiên cứu trong hơn 40 năm qua với nhiều hình thức nuôi khác nhau từ nuôi nước tĩnh đến nước chảy, nước tuần hoàn bằng nhiều loại thức ăn phong phú như tảo, men bánh mì, bột đậu nành, Protein Selco ở dạng khô, (Fukusho, 1989) Tuy nhiên, tảo là thức ăn tốt nhất có giá trị dinh dưỡng cao đối với
luân trùng, trong đó tảo Chlorella được sử dụng nhiều nhất trong các hệ thống nuôi nhờ tốc độ sinh trưởng nhanh (Hagiwata et al., 2001)
Một trong những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến khả năng sinh sản và phát triển của luân trùng là mật độ tảo làm thức ăn và mật độ nuôi của quần thể luân trùng Vì vậy,
đề tài “ Thử nghiệm nuôi luân trùng nước ngọt (Brachionus calyciflorus) bằng tảo
Chlorella” được thực hiện
1.2 Mục tiêu đề tài
Trang 11Xác định mật độ tảo thích hợp cho sự phát triển của quần thể luân trùng trong mô hình nuôi luân trùng nước ngọt, ứng dụng trong sản xuất giống các đối tượng thủy sản
1.3 Nội dung đề tài
1) Theo dõi sự phát triển của mật độ tảo Chlorella với các khối lượng cá rô phi khác
nhau Xác định mối tương quan giữa mật độ tảo và khối lượng cá rô phi
2) Nghiên cứu ảnh hưởng của mật độ tảo lên sự phát triển của quần thể luân trùng
Trang 12CHƯƠNG 2 LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU
2.1 Sinh học Luân Trùng
2.1.1 Đặc điểm phân loại và hình thái
Theo Pechenik (2000), hệ thống phân loại của luân trùng như sau:
Ngành: Rotifera
Lớp: Monogononta
Bộ: Ploima
Họ: Brachionidae
Loài : Brachionus calyciflorus Pallas
Luân trùng còn gọi là trùng bánh xe (Rotifera) thuộc nhóm động vật đa bào có kích
thước nhỏ Chiều dài cơ thể của chúng nhỏ hơn 2 mm, thường có kích thước từ
100-340µm (Dhert, 1996) có dạng hình trứng dài, hơi dẹp theo hướng lưng bụng Bờ bụng trước có 4 gai dạng u lồi giữa có khe hình chữ V Luân trùng có cấu tạo gồm 3 phần:
đầu, thân và chân
Hình 2.1 : Hình thái của luân trùng nước ngọt B.calyciflorus
Ðầu mang vòng tiêm mao có chức năng bơi lội và thu gom thức ăn
Thân luân trùng chứa nhiều dịch cơ thể và các cơ quan sau:
Hệ tiêu hoá: Luân trùng lấy thức ăn nhờ vòng tiêm mao sau đó vào trong miệng
và đến hàm nghiền Hàm nghiền này sẽ nghiền các hạt thức ăn bằng nhiều con
đường khác nhau (cắt, nghiền ) rồi đi vào thực quản, dạ dày, ruột và hậu môn
(Nogrady, 1993)
Hệ bài tiết: Luân trùng bài tiết chủ yếu là chất thải có nguồn gốc đạm (phần lớn
là ammonia) Sự chuyển động của tiêm mao ở các tế bào ngọn lửa (flame cells)
Trang 13tạo nên dòng chảy nhỏ các chất lỏng bài tiết vào trong các túi và chảy vào bàng quang sau đó được bài tiết ra ngoài thường xuyên và đều đặn (Nogrady, 1993)
Hệ sinh dục: Cơ quan sinh dục của con cái bao gồm 3 phần: buồng trứng, chất noãn hoàng và lớp nang Ngay từ khi mới sinh ra, số lượng trứng đã có sẵn trong buồng trứng
Chân: Chân luân trùng có cấu tạo hình nhẩn không có sự phân đốt, có thể co rút và cuối cùng là 1 hoặc 4 ngón chân (Dhert, 1996)
Sự chuyển tiếp giữa chân và thân là hậu môn Đây là điểm nằm ở vị trí bên ngoài mặt lưng là nơi thải ra của ruột, bàng quang và vòi trứng
Hình 2.2: Đặc điểm cấu tạo của Brachionus plicatilis (Dhert, 1996)
Theo James và Abu-Rezeq (1989), trọng lượng khô của luân trùng dòng S là 0,22 µg
và luân trùng dòng L là 0,33 µg
Luân trùng dòng S và L sinh trưởng với tốc độ khác nhau, có khả năng chịu đựng nhiệt độ khác nhau và có nhiệt độ sinh trưởng tối ưu khác nhau (Fushuko, 1989) Dòng S sinh trưởng tối ưu ở nhiệt độ từ 28-35oC Dòng L đạt sinh trưởng tối ưu ở nhiệt độ từ 18-25oC
Ngoài ra sự biến đổi về hình thái giữa các loài có thể xảy ra phụ thuộc vào độ mặn hoặc chế độ cho ăn Hiện tượng này có thể dẫn đến sự khác nhau tối đa là 15%
Trang 14(Fukusho và Iwamoto, 1981) Những luân trùng cho ăn bằng men bánh mì thường lớn hơn những luân trùng được cho ăn bằng tảo tươi (Dhert, 1996)
2.1.2 Đặc điểm sinh sản và chu kì sống
Tuổi đời luân trùng từ 3,4 - 4,4 ngày Ở nhiệt độ 25oC sau 0,5 – 1,5 ngày ấu trùng bắt
đầu trở thành cơ thể trưởng thành và sau đó con cái đẻ liên tục khoảng 4 giờ lại đẻ
trứng 1 lần Các con cái có thể sinh sản 10 thế hệ con con trước khi chết Hoạt động sinh sản của luân trùng phụ thuộc vào nhiệt độ của môi trường (Dhert, 1996)
Con đực có kích thước nhỏ hơn con cái và không có cơ quan tiêu hóa Cơ quan giao cấu của con đực chứa đầy tinh dịch Con cái cũng có 2 dạng là con cái đơn tính và con cái hữu tính (Dhert, 1996)
Vòng đời của luân trùng có sự luân phiên giữa 2 hình thức sinh sản (hình 2.3)
Sinh sản đơn tính: con cái vô tính sẽ sinh ra trứng lưỡng bội (2n) và sẽ phát triển thành con cái vô tính Con cái này sinh sản với tốc độ nhanh, nhịp sinh sản khoảng 4 giờ dưới điều kiện thuận lợi Tốc độ sinh sản phụ thuộc vào điều kiện nuôi và tuổi của luân trùng Đây là hình thức sinh sản nhanh nhất để tăng quần thể luân trùng và là hình thức quan trọng trong hệ thống nuôi luân trùng
Sinh sản hữu tính: Trong vòng đời của luân trùng, khi có sự biến động đột ngột của
điều kiện môi trường như nhiệt độ, nồng độ muối, … luân trùng sẽ chuyển sang hình
thức sinh sản hữu tính Trong quá trình này xuất hiện cả con cái vô tính và con cái hữu tính, chúng đều có hình thái giống nhau, khó phân biệt tuy nhiên con cái hữu tính sẽ sinh ra trứng đơn bội (1n) Con cái hữu tính có 3 kiểu sinh sản:
Con non sinh ra từ những trứng đơn bội không thụ tinh sẽ phát triển thành con đực Con đực có kích thước bằng 1/3 kích thước con cái Chúng không có ống tiêu hoá
và bàng quang nhưng có tinh hoàn đơn với nhiều tinh trùng thành thục
Trứng nghỉ: là trứng đơn bội đã thụ tinh Trứng nghỉ có vách tế bào dày giúp nó chịu đựng qua điều kiện khắc nghiệt và khi gặp điều kiện thuận lợi sẽ nở thành con cái vô tính
Con cái vô tính
Trang 15Hình 2.3: Vòng đời của luân trùng (Dhert, 1996)
2.2 Kỹ thuật nuôi luân trùng
2.2.1 Các yếu tố môi trường nuôi luân trùng
sẽ tiêu thụ rất nhanh nguồn carbonhydrate và chất béo dự trữ (Dhert, 1996) Trong môi trường nuôi nên duy trì nhiệt độ ở khoảng 20 - 30 oC là tốt nhất (Hoff và Snell, 2004)
pH
Trong tự nhiên luân trùng có thể sống ở pH từ 5 -10 (Fulks et al., 1991) Theo
Mitchell (1992), luân trùng nước ngọt có pH thích hợp là 6 – 8 Nghiên cứu của
Mitchell và Joubert (1986) cho thấy tại giá trị pH bằng 9,5 thì B.calyciflorus có thời
Trang 16gian sống và sinh sản cao nhất và tại giá trị pH này không có trứng nghỉ Ngoài ra,
theo Schluter (1981) quan sát sự phát triển của quần thể B.rubens thì mật độ đạt cao
nhất tại pH bằng 6 – 8, còn pH nhỏ hơn 4,5 hoặc lớn hơn 9,5 thì luân trùng không tồn tại
Ánh sáng
Cường độ ánh sáng 2000 lux, chu kỳ chiếu sáng 18 giờ sáng: 6 giờ tối mỗi ngày (Hoff, 1989) Fukusho (1989) cho rằng, ảnh hưởng trực tiếp của ánh sáng lên luân trùng thì
chưa rõ Theo Fulks et al (1991), ánh sáng kích thích sự phát triển của luân trùng nhờ
vào sự gia tăng phát triển của vi khuẩn quang hợp và tảo trong bể nuôi
Oxy
Các luân trùng có thể sống sót trong nước chứa oxy hòa tan thấp tới 2mg /L Đặc biệt,
B.calyciflorus có thể chịu đựng đến mức oxy tối thiểu là 1,2 mg/l Mức oxy hòa tan
trong nước nuôi phụ thuộc vào nhiệt độ, độ mặn, mật độ luân trùng và loại thức ăn (Dhert, 1996)
NH 3
NH3 gây độc đối với động vật thủy sinh nhưng với nồng độ 1 mg/l được xem là an toàn Hàm lượng N-NH3 trong hàm lượng tổng cộng N-NH4+ (TAN) có phụ thuộc vào
pH và nhiệt độ nước (Dhert, 1996)
Các mức ammonia dạng tự do từ 3 – 5 mg/L sẽ làm ức chế sự sinh sản của luân trùng
và chúng có thể chết khi hàm lượng ammonia tăng lên (Hoff và Snell, 2004)
NO 2 -
Theo Groeneweg et al (1981), hàm lượng N-NO2- đạt từ 10-20 ppm không gây độc
đối với luân trùng Brachionus rubens Lubzens (1987) thì cho rằng ở nồng độ 90 - 140
ppm N-NO2- gây độc đối với luân trùng
2.2.2 Các hình thức nuôi luân trùng
Nuôi theo mẻ
Các bể được đổ nước tảo ngập đến nửa bể với mật độ 13- 14x108 tế bào/mL và mật độ luân trùng là 100 cá thể/mL Độ mặn 23 ppt và nhiệt độ duy trì ở 30 oC Ngày đầu tiên, mỗi ngày 2 lần cho men bánh mì vào bể với số lượng 0,25g/triệu luân trùng Ngày hôm sau các bể được đổ đầy hoàn toàn bằng tảo với cùng một mật độ tảo và một ngày hai lần cho một lượng men bánh mì là 0,375g/triệu luân trùng vào bể Ngày kế tiếp tiến hành thu hoạch và cấy tiếp vào bể mới (chu kỳ nuôi từ 2-3 ngày) (Dhert, 1996)
Đây là phương pháp nuôi quảng canh, cần nhiều bể nuôi để có thể có đủ luân trùng
Trang 17thu hoạch Khi thu hoạch luân trùng, nước nuôi được loại bỏ, dụng cụ nuôi được tiệt trùng và sau đó luân trùng được thả lặp lại để tiếp tục một đợt nuôi mới So với các phương pháp khác thì đây là phương pháp ít rủi ro, bởi vì kỹ thuật nuôi đơn giản nhưng không có hiệu quả cao, hao phí nhân công, thời gian, dụng cụ và phương tiện lao động (Trotta, 1980; Fushimi, 1989)
Yoshimura et al (1997) đã cải tiến nâng cao mật độ luân trùng đến 1.000-10.000 cá
thể/mL qua việc cung cấp khí oxy, điều chỉnh pH và cung cấp thức ăn đầy đủ bằng
Chlorella cô đặc (trích từ Trần Công Bình và csv., 2005)
Nuôi theo phương pháp bán liên tục
Theo Lubzens (1987) hệ thống nuôi bán liên tục gồm các bể có thể tích nhỏ từ vài chục lít đến 200m3 nhưng nuôi với mật độ cao Vì vậy, nuôi bằng phương pháp này môi trường rất mau dơ do thức ăn dư thừa và các chất vẩn nên trong hệ thống này cần lắp đặt các bộ phận lọc nhằm cải thiện chất lượng nước nuôi (Dương Thị Hoàng Oanh, 2005) Bể nuôi luân trùng khi đạt mật độ cao thì được thu hoạch một phần sau đó thêm tảo và thức ăn vào để nuôi tiếp Khi mật độ luân trùng cao thì thu hoạch tiếp và
cứ thế tiếp tục
Đối với phương pháp này luân trùng được giữ trong bể trong thời gian 5 ngày Hai
ngày đầu tiên mỗi ngày tăng gấp đôi thể tích nước nuôi để làm loãng mật độ luân trùng xuống một nửa Trong những ngày tiếp theo, tiến hành thu hoạch 1/2 số lượng luân trùng trong bể, sau đó lại đổ nước mới vào bể để làm giảm mật độ luân trùng xuống còn một nửa Ngày thứ năm tiến hành thu hoạch và tiến hành lặp lại trình tự như trên (hệ thống nuôi bán liên tục trong 5 ngày) (Dhert, 1996)
Nuôi theo phương pháp liên tục
Nuôi sinh khối luân trùng theo phương pháp liên tục thì qui mô nhỏ hơn phương pháp nuôi mẻ nhưng hiệu quả thâm canh hơn Đây là phương pháp có hiệu quả để sản xuất
ra luân trùng chất lượng cao Mô hình này luôn khép kín chỉ áp dụng trong phòng nên hạn chế ở qui mô nhỏ và đòi hỏi điều kiện thiết bị máy móc nên chi phí cao
Mô hình nuôi liên tục tiến bộ nhất là mô hình kết hợp với chemostat (James và
Abu-Rezeq, 1989) Chemostat hoạt động trên nguyên tắc giới hạn hàm lượng thức ăn và tỉ
lệ cho ăn Hàm lượng thức ăn cho vào và lượng luân trùng thu hoạch sẽ được tính toán trước và duy trì ổn định Một lượng cố định luân trùng sẽ được đem ra và bù vào bằng một lượng cố định thức ăn cần thiết Như vậy, chemostat duy trì tốc độ sinh trưởng của luân trùng ổn định (bằng cách cung cấp đều đặn thức ăn) chứ không duy trì mật
độ cá thể (Droop, 1975; trích từ Trần Công Bình và csv., 2005)
Nuôi luân trùng với mật độ cao
Trang 18Tuy nuôi luân trùng với mật độ cao sẽ làm tăng nguy cơ ô nhiễm môi trường nuôi làm giảm tốc độ sinh trưởng do bắt đầu sự sinh sản hữu tính nhưng phương pháp này đã thu được kết quả hứa hẹn trong điều kiện nuôi có kiểm soát
Kỹ thuật nuôi cũng giống như kỹ thuật áp dụng để nuôi hàng loạt bằng thức ăn Culture Selco nhưng sau mỗi chu kỳ 4 ngày mật độ luân trùng không phải điều chỉnh lại Thức ăn được điều chỉnh 0,25- 0,3g/ triệu luân trùng cho các mật độ giữa 500 và
1500 luân trùng/mL và ở mức 0,2g cho các mật độ trên 1500 luân trùng/mL Nuôi luân trùng mật độ cao ảnh hưởng trực tiếp đến tỷ lệ trứng Tỷ lệ trứng giảm từ mức độ trung bình 30% ở mật độ 150 luân trùng/mL xuống còn 10% ở mật độ 2000 luân trùng/mL và dưới 5% ở mật độ 5000 luân trùng/mL Vì vậy hệ thống này chỉ được sử
dụng trong các điều kiện được kiểm soát tốt (Lavens et al., 1996)
Nuôi luân trùng trong hệ thống tuần hoàn kết hợp với tảo và cá rô phi
Nghiên cứu thiết lập hệ thống nuôi luân trùng tuần hoàn kết hợp với tảo và cá rô phi bước đầu đã thực hiện tại Khoa Thuỷ sản, Trường Đại học Cần Thơ Hệ thống nuôi
được thiết lập trên cơ sở kết hợp hệ thống nuôi luân trùng (Brachionus plicatilis) tuần
hoàn và kỹ thuật sản xuất nước xanh từ cá rô phi Thử nghiệm bước đầu của Hàn Thanh Phong (2002), cho thấy luân trùng có thể phát triển tốt trong hệ thống tuần
hoàn kết hợp với bể nước xanh (tảo Chlorella và cá rô phi) mà không cần cho luân trùng ăn (chỉ sống nhờ tảo Chlorella từ bể nước xanh), với tỉ lệ thể tích bể nước
xanh/bể nuôi luân trùng là 15:1, mật độ luân trùng cao nhất đạt đến 1.478 ± 96 ct/ml
vào ngày nuôi thứ 7 (Trần Công Bình và csv., 2005)
Theo Trần Công Bình và csv (2005) trong điều kiện thời tiết như ở nước ta, tảo
Chlorella phát triển tốt nhất trong bể cá-tảo có mật độ cá thả là 2 kg/m3 ở cỡ cá 30-50 g/con với tỉ lệ cho ăn là 3% trọng lượng thân
2.2.3 Các loại thức ăn nuôi luân trùng và cách cho ăn
Luân trùng thuộc nhóm ăn lọc không chọn lọc nên việc có thể sử dụng nhiều loại thức
ăn để nuôi chúng Tuy nhiên, giá trị dinh dưỡng của thức ăn sẽ quyết định giá trị dinh
dưỡng cũng như năng suất nuôi luân trùng Do đó, việc chọn lựa nguồn thức ăn thích hợp để nuôi luân trùng sẽ quyết định đến năng suất và giá trị của luân trùng Thức ăn
sử dụng cho nuôi luân trùng chủ yếu là tảo, men bánh mì (yeast) và thức ăn nhân tạo
(Trần Công Bình và csv., 2005)
Tảo
Các loại tảo có thể làm thức ăn cho luân trùng là Chlorella, Dunadiella, Tetrselmis,
Nanochloropsis, (Trần Ngọc Hải và Trần Thị Thanh Hiền, 2000)
Theo Nagata và Whyte (1992) khi nghiên cứu về ảnh hưởng của các loại thức ăn khác
Trang 19Chlorella sacchrophila có tốc độ sinh sản và đạt mật độ cao nhất, kế đến là Isochrysis, Tetraselmis suecica, men bánh mì Saccharomyces cereviciae và cuối cùng là Thalassiosira pseudonana Điều này cũng phù hợp với nhận định của Liao et al
(1983) thức ăn tốt nhất cho sự phát triển của luân trùng là Chlorella nước mặn Ngoài
ra luân trùng nuôi với Chlorella nước mặn có giá trị dinh dưỡng cao do chứa nhiều
HUFA đặc biệt là EPA (Fukusho, 1983) Theo Nyonje và Radull (1991) trong vùng
nhiệt đới, Chlorella nước ngọt đã được sử dụng thành công trong việc nuôi luân trùng
bằng cách thuần hoá trước khi cho ăn
Một trong những thuận lợi trong việc sử dụng Chlorella làm thức ăn cho luân trùng là
do tảo này phát triển và phân cắt nhanh (chỉ sinh sản vô tính) Chlorella chứa hàm
lượng protein 50%, lipid 20%, Carbohydrate 20%, Vitamin B1, B12, chất khoáng…
Hơn nữa Chlorella còn sản sinh ra chất kháng sinh Chlorellin kháng lại một số vi
khuẩn do đó hạn chế một số mầm bệnh (Sharma, 1998); trích từ Trần Công Bình và
csv., 2005)
Theo Trần Công Bình và csv (2005) thì một số tảo có chứa hàm lượng các acid béo
thiết yếu rất cao như acid eicosapentaenoic (EPA 20:5n-3) và docosahexaenoic acid (DHA 22:6n-3), cho nên chúng được xem là thức ăn tươi sống rất tốt bổ sung hàm lượng acid béo cho luân trùng Khi luân trùng ăn tảo, nó sẽ thu nhận các acid béo thiết yếu này trong vài giờ và sau đó tiến tới cân bằng giữa tỉ lệ DHA/EPA
Men bánh mì
Men bánh mì là những tế bào nấm men có kích thước 5-7 µm có hàm lượng protein cao (45-52%) và rẻ tiền được sử dụng làm thức ăn cho luân trùng Tuy nhiên, nếu chỉ cho luân trùng ăn hoàn toàn bằng men bánh mì thì năng suất không ổn định và quần thể luân trùng mau tàn (Hirayama, 1987; Komis, 1992) Nguyên nhân chủ yếu là do khó quản lý chất lượng nước nuôi, men bánh mì khó tiêu cần trợ giúp thêm vi khuẩn tiêu hóa Hơn nữa, bản thân men bánh mì có giá trị dinh dưỡng kém (chỉ giàu protein, thiếu các thành phần khác) Mặt khác, luân trùng chỉ ăn men bánh mì có tốc độ sinh trưởng và sinh sản thấp, điều này dẫn đến phải kéo dài chu kỳ nuôi mới đạt được mật
độ mong muốn (Hoff và Snell, 2004)
Luân trùng chỉ được cho ăn bằng men bánh mì có chất lượng kém không thể dùng
nuôi phần lớn ấu trùng cá biển (Watanabe et al., 1983) Vì vậy, luân trùng cho ăn bằng
men bánh mì cần được giàu hóa bằng tảo sống hoặc giàu hóa bằng nhũ tương với acid béo omega-3 trước khi cho ấu trùng cá ăn
Bột đậu nành
Bột đậu nành được sử dụng làm thức ăn cho động vật thủy sản hiện nay chủ yếu là bột
đậu nành ly trích dầu có hàm lượng protein khoảng 47- 50%, lipid không quá 3%,
Trang 20giàu muối khoáng và vitamin nhất là các vitamin tan trong chất béo tốt (Trần Thị
Thanh Hiền và Nguyễn Anh Tuấn, 2009) Tuy bột đậu nành giàu Lecithin và acid béo
LNA (Linolenic acid 18:3n-3) một loại tiền chất để tổng hợp nên EPA và DHA nhưng thiếu Methionine, Cystine Bột đậu nành có hai loại:
Bột đậu nành đã tách chất béo (còn chất béo không quá 3%), được nghiền mịn từ khô đậu nành ly trích
Bột đậu nành chưa tách béo được nghiền từ hạt đậu nành đã qua xử lý nhiệt, có chất béo cao (17 – 18%) nhưng đạm lại thấp (37- 38%) (Dương Tấn Lộc, 2007)
Thức ăn nhân tạo
Hiện có nhiều loại thức ăn nhân tạo đặc chế cho luân trùng được bán trên thị trường Các thức ăn này có thành phần chủ yếu là men bánh bì được bổ sung dinh dưỡng như các amino acid và các acid béo thiết yếu, các vitamin và khoáng, nhằm cân bằng dinh dưỡng và nâng cao sinh trưởng của luân trùng Các thành phần bổ sung trong thức ăn nhân tạo này đều nhằm mục đích là nâng cao hoạt tính của men (Hoff và Snell, 2004)
Một số loài tiêm mao trùng (ciliate), protozoa,… như: Euplotes và Vorticella Đây là
hai loài thường xuyên gặp trong nuôi sinh khối luân trùng, chúng cạnh tranh thức ăn
và oxy với luân trùng Đặc biệt chúng làm giảm chất lượng nước trong môi trường sống của luân trùng, tạo nhiều hợp chất hữu cơ, làm giảm pH (Nguyễn Văn Hạnh, 2007) Tuy nhiên theo Dhert (1996) chúng có thể làm sạch nước bể nuôi khỏi vi khuẩn và vật chất hữu cơ
Cách cho luân trùng ăn
Do luân trùng có đặc tính ăn lọc và liên tục nên khi cho ăn phải cung cấp thức ăn với lượng vừa phải với khoảng cách giữa các lần cho ăn ngắn nhằm hạn chế tình trạng trong bể luân trùng thừa thức ăn (làm giảm chất lượng nước) nhưng luân trùng vẫn bị
đói (do không cung cấp thức ăn mới kịp thời) Như vậy, luân trùng phải được cho ăn
thường xuyên với lượng nhỏ nhằm duy trì chất lượng nước và tránh trường hợp cho ăn thừa hoặc bỏ đói luân trùng Ngoài ra, nếu luân trùng bị đói trước khi thu hoạch thì giá trị dinh dưỡng của chúng sẽ rất thấp Đây cũng là một nguyên nhân làm tăng tỉ lệ hao
Trang 21Giống: Chlorella (Bold và Wynne, 1978)
Chlorella là loài tảo đơn bào, không có tiêm mao, không có khả năng di động chủ
động Tế bào dạng hình cầu, hình elip, có kích cỡ từ 2 – 12 µm, có chứa hạt diệp lục
tố và hạt tạo tinh bột Màng tế bào có lớp Celluloze bao bọc (Sharma, 1998)
2.3.2 Đặc điểm dinh dưỡng
Theo Sharma (1998), Chlorella sống tự dưỡng là chủ yếu hay cộng sinh với địa y Đặc biệt, Chorella là loài tảo phát triển và phân cắt nhanh dưới điều kiện môi trường biến
động nên hoàn toàn thích hợp để nuôi trong hệ thống tuần hoàn ngoài trời Tảo
Chlorella có thể sử dụng là muối ammonium, nitrat và urea cho tăng trưởng trong đó
ammonium cho kết quả tốt nhất Khi môi trường có đồng thời 3 chất Chlorella sẽ sử
dụng ammonium trước còn nitrate và ure sẽ được tảo chuyển hoá thành ammonium
trước khi kết hợp vào thành phần hữu cơ Như vậy, khi kết hợp tảo Chlorella vào hệ
thống nuôi, tảo sẽ hấp thu bớt TAN trong hệ thống giúp cải thiện chất lượng nước
(Trần Công Bình và csv., 2005)
2.2.3 Đặc điểm sinh sản và vòng đời
Chlorella chỉ có hình thức sinh sản vô tình với sự xuất hiện của bất động bào tử
thường hình thành 2, 4, 8, 16, 32, 64 bào tử Sau khi kết thúc sự phân chia, bào tử đi ra ngoài bằng cách phá vỡ màng tế bào mẹ (Sharma, 1998)
Theo Tamiya (1963; Sharma, 1998) thì vòng đời của Chlorella chia làm 4 pha: Giai
đoạn sinh trưởng, giai đoạn chín sớm, giai đoạn chín mùi và giai đoạn phân cắt
2.4 Cá Rô Phi
2.4.1 Hệ thống phân loại
Bộ: Perciformes
Họ: Cichlidae
Giống: Danahilia, Oreochromis, Sarotherodon và Tilapia (Trewavas, 1982; trích
bởi Lê Như Xuân và csv., 1994)
2.4.2 Cơ sở sinh thái học của hệ thống cá rô phi – tảo Chlorella