SỰ SAO CHÉP ADN. Ths. Nguyễn Thanh Tố Nhi

SỰ SAO CHÉP ADN Ths Nguyễn Thanh Tố Nhi SAO CHÉP ADN Khái niệm Sự chép ADN Sửa sai chép không chép KHÁI NIỆM SAO CHÉP ADN TẠI SAO CẦN CĨ Q TRÌNH SAO CHÉP ADN??? KHÁI NIỆM SAO CHÉP ADN Là khởi đầu cần thiết cho sinh sản ADN hay ARN (ở virus) nơi cất giữ thông tin di truyền Tế bào phân chia, ADN phải chép để đảm bảo thông tin di truyền chuyển cho tế bào Yếu tố vật lý, hóa học, … tác động lên ADN ADN gen phá hủy sữa chữa làm chết TB biến đổi di truyền sang hệ sau KHÁI NIỆM SAO CHÉP ADN ADN SAO CHÉP ADN Mạch đôi, xoắn kép: chuỗi polynucleotid xoắn quanh trục theo hướng ngược Đường deoxyribose (5C) Gốc phosphat Các base nitơ Adenin, Guanin, Cytosin Thymin SỰ SAO CHÉP CỦA ADN Mơ hình chép ADN Các yếu tố cần thiết cho chép ADN Các ADN polymerase Quá trình chép ADN E.coli Sao chép ADN tế bào nhân thật Sự chép virus & phage MƠ HÌNH SAO CHÉP ADN SAO CHÉP ADN 3 Giả thuyết Bảo tồn Bán bảo tồn Phân tán Bảo tồn: phân tử ADN con: gồm chuỗi hoàn toàn Bán bảo tồn: phân tử ADN con: gồm chuỗi mẹ kết hợp với chuỗi tổng hợp MƠ HÌNH SAO CHÉP ADN SAO CHÉP ADN TN Meselson & Stahl: CM Cơ chế chép bán bảo tồn DNA in CsCl gradient PHẢN ỨNG SAO CHÉP d(NMP)n + dNTP SAO CHÉP ADN d(NMP)n+1 + PPi Phản ứng chép diễn 3’-OH & 5’-PO4 PHẢN ỨNG SAO CHÉP d(NMP)n + dNTP SAO CHÉP ADN d(NMP)n+1 + PPi Mạch ADN kéo dài nhờ thành lập liên kết phosphodiester mạch cũ nucleotid CÁC YẾU TỐ CẦN THIẾT SAO CHÉP ADN Khuôn mẫu Mg2+ 4 loại deoxyribonucleotid triphosphat (dNTP): A, T, G, C Enzyme ADN polymerase Primase RNAse H ADN ligase SSB protein – single strand binding protein Helicase Topoisomerase I, II ADN POLYMERASE SAO CHÉP ADN Là ADN polymerase phụ thuộc ADN Hoạt tính Xúc tác thành lập liên kết phosphodiester: polymer hóa theo hướng 5’ – 3’ kéo dài chuỗi ADN Exonuclease 5’ 3’ Exonuclease 3’ 5’ E coli: ADN polymerase I, II, III, IV & V Nhân thật: ADN polymerase α, β, γ, δ ε ADN POLYMERASE SAO CHÉP ADN ADN POLYMERASE SAO CHÉP ADN Lõi xúc tác: α (ADN polymerase), ϵ (exonuclease 3’ – 5’), θ (kích thích exonuclease 3’ – 5’) ‫ح‬: liên kết lõi xúc tác Phức kẹp: cấu tạo β Phức γ gồm protein “phức tải kẹp”: đặt kẹp lên sợi ADN ADN POLYMERASE Hoạt tính SAO CHÉP ADN DNA polymerase I II III Polymer hóa 5’ 3’ Có Có Có Exonuclease 5’ (hủy mồi) 3’ Có Khơng Khơng Exonuclease 3’ 5’ Có Có Có ADN POLYMERASE SAO CHÉP ADN Vai trò ADN polymerase ADN polymerase III: enzym chép chính/sợi sớm, sợi muộn Q TRÌNH SAO CHÉP KHỞI ĐẦU: Tạo chạc ba/chĩa ba chép KÉO DÀI: Sao chép liên tục / sợi sớm Sao chép không liên tục / sợi muộn KẾT THÚC SAO CHÉP ADN Khởi đầu chép QT SAO CHÉP E.coli, bắt đầu Protein B nhận biết điểm khởi chép (OriC): giàu A-T (254 cặp base) Khởi đầu chép Gyrase (topoisomerase II) tháo xoắn ADN Helicase (ATP: cofactor):cắt lk hydro, tách mạch SSB protein gắn vào, giữ sợi đơn không chập lại chạc ba chép từ bong bóng chép QT SAO CHÉP