Khảo sát điều kiện nuôi trồng nấm quế linh (humphreya endertii)

MẪU 14KHCN BỘ CÔNG THƯƠNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG Tên đề tài KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI TRỒNG NẤM QUẾ LINH (Humphreya endertii) Mã số đề tài 194 TP04 Chủ nhiệm đề tài Giảng Duy Tân Đơn vị thực hiện Viện công nghệ sinh học và thực phẩm Hồ sơ bao gồm Bản tự nhận xét kết quả thực hiện đề tài NCKH cấp Trường Báo cáo tổng kết kết quả thực hiện đề tài NCKH cấp Trường Báo cáo chi tiết đề tài nghiên.

BỘ CÔNG THƯƠNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG Tên đề tài: KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI TRỒNG NẤM QUẾ LINH (Humphreya endertii) Mã số đề tài: 194.TP04 Chủ nhiệm đề tài: Giảng Duy Tân Đơn vị thực hiện: Viện công nghệ sinh học thực phẩm Hồ sơ bao gồm: Bản tự nhận xét kết thực đề tài NCKH cấp Trường Báo cáo tổng kết kết thực đề tài NCKH cấp Trường Báo cáo chi tiết đề tài nghiên cứu khoa học cấp Trường Các phụ lục định phê duyệt đề tài chứng minh Tp Hồ Chí Minh 2020 LỜI CÁM ƠN Chúng em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Trường Đại học Công nghiệp TP.HCM Đoàn Thể Ban Lãnh Đạo Trường, Viện tạo điều kiện sở vật chất cho hồn thành đề tài Đặc biệt em xin chân thành cám ơn sâu sắc đến Cô Nguyễn Thị Diệu Hạnh giảng viên hướng dẫn, Thầy Phạm Tấn Việt, Thầy Nguyễn Ngọc Ẩn tận tâm hướng dẫn chúng em qua buổi học phịng thí nghiệm buổi nói chuyện, thảo luận lĩnh vực nghiên cứu khoa học Nếu khơng có lời hướng dẫn, dạy bảo thầy em nghĩ đề tài em khó hồn thiện Một lần nữa, em xin chân thành cám ơn Cô Thầy Đề tài thực tháng Bước đầu vào lĩnh vực khoa học, kiến thức em hạn chế nhiều bỡ ngỡ Do khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận ý kiến đóng góp q báu q thầy để kiến thức em hoàn thiện Sau cùng, em xin cảm ơn ban quản lý vườn quốc gia Phước Bình cung cấp giống nấm Quế Linh (Humphreya endertii) cho em để em thực đề tài khóa luận Cuối cùng, em xin kính chúc q thầy Viện Cơng nghệ Sinh Học – Thực Phẩm ban lãnh đạo nhà trường dồi sức khỏe để tiếp tục thực sứ mệnh cao đẹp thời gian hiểu biết có hạn nên đề tài chúng em khơng tránh khỏi thiếu sót, mong Thầy Cơ giáo bạn góp ý để đề tài chúng tơi hồn thiện ii BỘ CÔNG THƯƠNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐH CƠNG NGHIỆP TP.HCM Đợc Lập – Tự Do – Hạnh Phúc Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm Tp Hồ Chí Minh, ngày 09 tháng 10 năm 2020 BẢN TỰ NHẬN XÉT VỀ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI NCKH CẤP TRƯỜNG I THƠNG TIN CHUNG  Thơng tin tổng qt Tên đề tài: Khảo sát điều kiện nuôi trồng nấm Quế Linh (Humphreya endertii) Mã số: 194.TP04 Chủ nhiệm đề tài: Giảng Duy Tân Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm Thời gian thực (Bắt đầu – Kết thúc): 1/2019 đến 07/2019 Tổng kinh phí thực đề tài: triệu đồng - Trong đó, kinh phí từ NSNN: triệu đồng Nhận xét kết thực Đề tài so với Hợp đồng: 7.1/ Về mức độ hồn thành khối lượng cơng việc: - Các sản phẩm đăng kí đề tài hồn thành đầy đủ - Sản phẩm dạng 2: Quy trình ni trồng nấm Quế Linh (Humphreya endertii) 7.2/ Về tình hình sử dụng kinh phí Đề tài: - Đã sử dụng số tiền tạm ứng đợt để mua hoá chất, nguyên vật liệu cho nghiên cứu đề tài iii PHẦN I THÔNG TIN CHUNG I Thông tin tổng quát 1.1 Tên đề tài: Khảo sát điều kiện nuôi trồng nấm Quế Linh (Humphreya endertii) 1.2 Mã số: 194.TP04 1.3 Danh sách chủ trì, thành viên tham gia thực đề tài TT Họ tên Đơn vị công tác (học hàm, học vị) Vai trò thực đề tài Giảng Duy Tân - Tìm tài liệu tham khảo - Thiết kế thí nghiệm Viện Cơng nghệ Sinh học - Thực thí nghiệm - Phân tích xử lý số liệu Thực phẩm - Viết báo cáo tổng hợp, viết báo khoa học Phan Thị Cẩm Tiên Viện Công nghệ Sinh học -Chụp ảnh -Tưới đón nấm sau nấm Thực phẩm tạo thể Vũ Rỗn Bình Viện Công nghệ Sinh học - Mua vận chuyển nguyên vật liệu cần thiết cho thí Thực phẩm nghiệm 1.4 Đơn vị chủ trì: Viện Cơng nghệ Sinh học Thực phẩm Trường ĐH Công nghiệp Tp.HCM 1.5 Thời gian thực hiện: 1.5.1 Theo hợp đồng: từ tháng 01 năm 2019 đến tháng năm 2019 1.5.2 Thực thực tế: từ tháng 01 năm 2019 đến tháng năm 2020 1.6 Những thay đổi so với thuyết minh ban đầu (nếu có): - Khơng thay đổi nội dung so với thuyết minh ban đầu 1.7 Tổng kinh phí phê duyệt đề tài: 05 triệu đồng iv II Kết nghiên cứu Đặt vấn đề Nấm lớn (nấm đảm) quen thuộc với người ngày Nấm người sử dụng nguồn thực phẩm đời sống ngày Nấm ăn chứa nhiều đạm, mỡ, calo, ngồi cịn có chất có ích cho thể người đa đường, khoáng sinh tố Chất đạm từ nấm ăn, thực vật động vật nguồn đạm quan trọng người sau Ngoài nghiên cứu giá trị dinh dưỡng, nấm lớn nghiên cứu dược liệu Hiện nhiều báo nấm thân gỗ có: triterpenoids, polysaccharide, nucleotide, sterol, steroid có tác dụng điều hòa miễn dịch, chống xơ vữa động mạch, chống viêm, kháng khuẩn, kháng virus (bao gồm chống HIV), hạ huyết áp, chống lt Trên giới có khoảng 250.000 lồi nấm, gần 300 chủng nấm có giá trị dược liệu, 20 - 30 chủng nấm thực dùng làm thuốc Nấm sử dụng làm thuốc thuốc đông y Trung Quốc nước dùng nấm làm thuốc nhiều với loại nấm như: Linh chi, phục linh, trư linh, lơi hồn, mã bột, đơng trùng hạ thảo,v.v Ngoài hướng nghiên cứu dinh dưỡng thực phẩm trị liệu để phịng điều trị bệnh đa số loại nấm ăn khác nhiều mang lại tác dụng dược liệu nấm Hiện nước ta nấm dược liệu sử dụng chủ yếu làm thực phẩm bổ sung thực phẩm chức Tuy nhiên, dược liệu từ nấm có tiềm trở học cổ truyền dựa chứng dược tính Các dược liệu tìm thấy loại nấm thử nghiệm lâm sàng tiền lâm sàng theo quy định Vì nhu cầu giá trị dược liệu nấm người ngày tăng cao Và nấm Quế Linh (Humphreya endetii) lồi nấm tìm thấy vườn quốc gia Cát Tiên tỉnh Bình Phước PGS Lê Xuân Thám ghi nhận Chi nấm Humphreya hiếm, giới ghi nhận lồi Chưa có tài liệu ni trồng nghiên cứu dược tính v Nấm Quế Linh thuộc chi nấm Humphreya họ Ganodermataceae họ với nấm Linh Chi đỏ (Ganoderma lucidum),là nấm dược liệu phổ biến biến Việt Nam Vì lý đề tài “Khảo sát điều kiện nuôi trồng nấm” giúp góp phần làm nguồn cung cấp giống ổn định nghiên cứu điều kiện giúp nấm tăng suất nghiên cứu giá trị dược liệu nấm Quế Linh (Humphreya endetii) Mục tiêu Quế Linh a Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu quy trình ni trồng nấm Quế Linh (Humphreya endetii) b Mục tiêu cụ thể Khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endetii) môi trường meo thạch cấp Khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endetii) môi trường meo hạt cấp Khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endetii) môi trường giá môi cấp 3 Phương pháp nghiên cứu 3.1 Phương pháp phân lập Quả thể nấm Quế Linh (Humphreya endertii) khử trùng bề mặt cồn 70o Tai nấm cắt đôi dao cấy (điều kiện vô trùng), dùng dao cấy lấy mẫu thịt nấm vô trùng bên tai nấm cho vào ống nghiệm chứa môi trường PGA (điều kiện vô trùng) Tơ nấm phát triển đầy ống nghiệm sau ngày nuôi cấy 3.2 Phương pháp cấy chuyền Môi trường PGA chuẩn bị đĩa Petri Môi trường cấy lượng giống gốc phân lập (điều kiện vô trùng) Sau tuần tơ nấm phát triển đầy đĩa Petri Và sử dụng làm giống để thực nghiên cứu vi 3.3 Phương pháp khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endertii) môi trường meo giống cấp (meo thạch) Giai đoạn meo giống cấp giai đoạn hệ enzyme phân giải chất nấm chưa phát triển Hệ sợi tơ nấm sử dụng chất dinh dưỡng có sẵn ngồi mơi trường làm lượng để phát triển Các yếu tố cần khảo sát bổ sung trực tiếp vào môi trường nuôi cấy hệ sợi tơ nấm 3.3.1 Phương pháp khảo sát pH thích hợp cho phát triển tơ nấm Nấm lớn (nấm đảm) loài hoại sinh thực vật Nó kí sinh thực vật, mơ thực vật chết mùn bã thực vật phân hủy Các lồi nấm kí sinh mơ thực vật chết thích hợp mơi trường có pH thấp, cịn loài nấm sống mùn bã thực vật phân hủy sống mơi trường pH kiềm trung tính Đĩa mơi trường PGA để thực thí nghiệm phải tích mơi trường mơi trường có pH 5.0 ~ 9.0 Hệ sợi tơ nấm nuôi ủ môi trường PGA với pH 5.0 ~ 9.0 Mỗi đĩa mơi trường thí nghiệm cấy lượng giống 4*4mm Thí nghiệm lặp lại lần Đĩa giống quan sát ngày, chiều dài tơ ghi nhận chụp ảnh 3.3.2 Phương pháp khảo sát dịch chiết thích hợp cho hệ sợi tơ nấm phát triển Dịch chiết cung cấp vitamin số khoáng thiết yếu cho phát triển hệ sợi tơ nấm Dịch chiết từ rau củ khác cung cấp chất dinh dưỡng khác Hệ sợi tơ nấm nuôi cấy môi trường PGA thay dịch chiết khoai tây thành dịch chiết khoai lang khoai mỡ Chuẩn bị môi trường: Bảng 3.1 Môi trường khảo sát dịch chiết Môi trường Môi trường Môi trường 500ml dịch chiết 500ml dịch chiết 500ml dịch chiết khoai tây (200g/l) khoai lang (200g/l) khoai mỡ (200g/l) 10g glucose 10g glucose 10g glucose 10g agar 10g agar 10g agar vii Giống nấm cấy lên môi trường tích Mỗi đĩa mơi trường thí nghiệm cấy lượng giống 4*4mm Thí nghiệm lập lại lần Hệ sợi tơ nấm khảo sát ngày Thí nghiệm lập lại lần Đĩa giống quan sát ngày, chiều dài tơ ghi nhận chụp ảnh 3.3.3 Phương pháp khảo sát nguồn đạm thích hợp cho hệ sợi tơ nấm phát triển Nguồn đạm cần thiết cho phát triển hệ sợi tơ nấm tất giai đoạn phát triển khác Nguồn đạm cung amino acid thiết yếu cho hệ sợi tơ nấm sử dụng để tổng hợp chất như: purin, pyrimidin, protein, chitin vách tế bào Chất đạm giúp đảm bảo tỉ lệ C/N cho nấm phát triển Cách thực Bảng 3.2 Môi trường khảo sát nguồn đạm cho phát triểncủa hệ sợi tơ nấm Quế Linh Môi trường Môi trường Môi trường 500ml dịch chiết 500ml dịch chiết 500ml dịch chiết khoai tây (200g/l) khoai tây (200g/l) khoai tây (200g/l) 10g glucose 10g glucose 10g glucose 10g agar 10g agar 10g agar 0.25g Yeast extract 0.25g Pepton 0.25g Cao trùn Giống nấm cấy lên mơi trường tích Mỗi đĩa mơi trường thí nghiệm cấy lượng giống 4*4mm Thí nghiệm lập lại lần Hệ sợi tơ nấm khảo sát ngày Thí nghiệm lập lại lần Đĩa giống quan sát ngày, chiều dài tơ ghi nhận chụp ảnh 3.3.3.1 Phương pháp xác định tốc độ tăng trưởng hệ sợi tơ nấm môi trường thạch Tốc độ tăng trưởng hệ sợi tơ nấm đánh giá đường kính hệ sợi tơ Thu nhận kết lập bảng tăng trưởng hệ sợi tơ nấm viii Phương pháp xác định khối lượng sinh khối hệ sợi tơ nấm 3.3.3.2 Phương pháp xác định khối lượng hệ sợi tơ nấm giúp làm rõ tốc độ tăng trưởng hệ sợi tơ nấm giúp đánh giá lượng sinh khối tạo thành môi trường Tại thời điểm 14 ngày nuôi cấy nấm, ta tiến hành đánh giá lượng sinh khối tạo thành hệ sợi tơ nấm môi trường khác Dùng giấy lọc sấy khô đến trọng lượng không đổi lọc thu sinh khối hệ sợi tơ nấm Ghi nhận khối lượng hệ sợi tơ nấm sau sấy khô tới trọng lượng không đổi 3.2 Phương pháp khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endertii) môi trường meo giống cấp (meo lúa) Môi trường meo giống cấp giai đoạn hệ enzyme hệ sợi tơ nấm bắt đầu phát triển Nấm tiết enzyme ngồi mơi trường để phân giải hợp chất thành chất đơn giản cho nấm hấp thụ Môi trường lúa sử dụng để khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến phát triển hệ sợi tơ nấm bổ sung thành phần dinh dưỡng sau: Bảng 3.3 Môi trường meo hạt để khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh Giống nấm cấy môi trường lúa để khảo sát Mỗi đĩa mơi trường thí nghiệm đượ STT Kí hiệu Thành phần MT1 Lúa + 5% Cám gạo MT2 Lúa + 5% Cám bắp MT3 Lúa + 2.5% Cám gạo + 2.5% Cám bắp MT4 Lúa + 5% Cám gạo + 0.1% Pepton MT5 Lúa + 5% Cám gạo + 0.1% Ure ix 3.2.1 Phương pháp khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endertii) môi trường meo giá môi Môi trường meo giá môi giai đoạn hệ sợi tơ nấm phát triển tạo thể nấm Meo giá môi môi trường cuối tạo suất cho nấm Bảng 3.4 Môi trường giá môi thử nghiệm phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh STT Kí hiệu Thành phần T1 Mùn cưa cao + 5% cám gạo T2 Mùn cưa cao su + 5% cám bắp T3 Mùn cưa cao su + 5% cám gạo + 0.5% Ure T4 Mùn cưa cao su + 5% cám gạo + 0.5% Ure + 1% bột nhẹ 0.1% MgSO4 Cấy giống: đổ giống vào bịch phôi (điều kiện vô trùng), quan sát, chụp ảnh đo tơ đến nấm phát triển kín bịch phơi Ở giai đoạn nấm sử dụng pH độ ẩm meo giá môi phát triển Nhiệt độ sử dụng nhiệt độ phịng, ánh sáng để nơi có bóng 3.2.2 Phương pháp tưới đón nấm Sau tơ nấm phát triển đầy phôi nấm, phôi nấm chuyển vào nhà trồng chăm sóc tưới đón nấm Nấm giữ độ ẩm ≥ 70%, giữ cho nhiệt độ nấm từ 25˗30 3.3 tạo điều kiện ánh sáng yếu cho nấm phát triển tốt Phương pháp xử lý số liệu Tất thí nghiệm lặp lại lần, số liệu thu nhận tính tốn phần mềm Excel phần mềm Statgraphics version 15.1 Tổng kết kết nghiên cứu Kết nghiên cứu đề tài xây dựng môi trường nhân giống nấm Quế Linh hoàn chỉnh x Đánh giá kết đạt kết luận Kết nghiên cứu đề tài đạt số hiệu mặt khoa học: Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất nấm Quế Linh, giúp tạo nguồn giống ổn định cho nghiên cứu tính dược liệu nấm Tóm tắt kết Nấm Quế Linh (Humphreya endetii) lồi nấm tìm thấy vườn quốc gia Cát Tiên tỉnh Bình Phước PGS Lê Xuân Thám ghi nhận Chi nấm Humphreya hiếm, giới ghi nhận lồi Chưa có tài liệu nuôi trồng nghiên cứu dược tính Nấm Quế Linh thuộc chi nấm Humphreya họ Ganodermataceae họ với nấm Linh Chi đỏ (Ganoderma lucidum) nấm dược liệu phổ biến biến Việt Nam, nên nấm Quế Linh nhà khoa học đánh giá cao dược tính Chính vậy, chúng em tiến hành nghiên cứu mơi trường nhân giống nấm Quế Linh giúp tạo nguồn giống ổn định cho nghiên cứu sau Bên cạnh đó, đề tài cịn giúp bảo tồn chi nấm quý Việt Nam Nấm Quế Linh sau ngày, nhận thấy pH 6.0 ~ 7.0 thích hợp cho sinh trưởng phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh Nấm thích hợp với nguồn vitamin khoáng chất từ dịch chiết khoai lang Sau chọn yếu tố thích hợp cho sinh trưởng phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh giai đoạn 1, yếu tố thích hợp cho sinh trưởng phát triển hệ sợi tơ nấm tổng hợp lại tạo thành môi trường nhân giống cấp Giống từ môi trường nhân giống cấp nuôi cấy mơi trường có thành phần dinh dưỡng khác MT1, MT2, MT3, MT4, MT5 sau ngày sinh trưởng phát triển môi trường MT4 tơ nấm phủ kín bề mặt chai với tốc độ lan tơ trung bình (6.2 ± 0.4 mm /ngày) mật độ tơ dày, tơ nấm trắng tỉ lệ nhiễm thấp Hệ sợi tơ nấm môi trường MT4 cấy mơi trường meo giá mơi có thành phần dinh dưỡng khác T1, T2, T3, T4 Sau 28 ngày quan sát đánh giá phát triển hệ sợi tơ nấm môi trường T3 lan tơ nhanh (124 ± 17 mm) tơ nấm phát triển đều, tơ nấm trắng bị nhiễm tạp xi Các phơi nấm sau phủ kín tơ đưa vào nhà trồng để tưới đón nấm Nấm nuôi trồng độ ẩm (70 ˗ 80%), nhiệt độ (27 ˗ 32°C) Sau 10 ˗ 12 ngày tưới đón nấm, nấm bắt đầy thể sau 52 ˗ 58 ngày nấm tạo thành thể hoàn chỉnh phát tán bào tử Việc xây dựng quy trình ni trồng nấm Quế Linh tiền đề cho cơng nghiên cứu dược liệu tính ứng dụng nấm tương lai III Sản phẩm đề tài, công bố kết đào tạo 3.1 Kết nghiên cứu ( sản phẩm dạng 1,2,3) Yêu cầu khoa học hoặc/và tiêu TT kinh tế - kỹ thuật Tên sản phẩm Đăng ký Đạt Quả thể nấm Quế 500g nấm tươi Linh sau q trình 100g nấm khơ khảo sát ni trồng Giống Linh nấm Quế 100g nấm khô ống giống nấm ống giống nấm Quế Quế Linh (giống cấp 1) Linh (giống cấp 1) … 3.2 Kết đào tạo TT Họ tên Thời gian thực đề tài Tên đề tài Tên chuyên đề NCS Tên luận văn Cao học Nghiên cứu sinh Học viên cao học Sinh viên Đại học Giảng Duy Tân tháng xii Đã bảo vệ IV Tình hình sử dụng kinh phí T T A B Kinh phí Kinh phí Ghi duyệt thực (đồng) (đồng) Nợi dung chi Chi phí trực tiếp Th khốn chuyên môn Nguyên, nhiên vật liệu, Thiết bị, dụng cụ Cơng tác phí Dịch vụ th ngồi Hội nghị, hội thảo,thù lao nghiệm thu kỳ In ấn, Văn phịng phẩm Chi phí khác Chi phí gián tiếp Quản lý phí Chi phí điện, nước Tổng số 3.800.000 700.000 500.000 5.000.000 5.000.000 V Kiến nghị (về phát triển kết nghiên cứu đề tài) Tiếp tục khảo sát phát triển hệ sợi tơ nấm Quế Linh số môi trường giá môi khác khảo sát thêm yếu tố: nhiệt độ, độ ẩm, độ thơng thống, …để tìm điều kiện thích hợp để nấm thể Nguồn cung cấp khoáng ảnh hưởng đến giai đoạn tảo thể hệ sợi tơ nấm, cần làm thêm thí nghiệm khảo sát nguồn khoáng ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển hệ sợi tơ nấm giai đoạn meo giá môi Thực khảo sát giá trị dược liệu nấm đồng thời khảo sát giá trị dược liệu giai đọan phát triển tơ ( meo cấp 1) Thực thí nghiệm khảo sát giá trị dược liệu thể nấm Quế Linh khả kháng ung thư, chống oxy hóa, VI Phụ lục sản phẩm - Khối lượng khô thể nấm Quế Linh sau trình khảo sát nuôi trồng (100g thể khô) - Giống nấm Quế Linh (môi trường meo giống cấp 1) xiii Quy trình nuôi trồng nấm Quế Linh (Humphreya endertii) Tp HCM, ngày tháng10 năm 2020 Chủ nhiệm đề tài Phòng QLKH&HTQT xiv Trưởng (đơn vị) (Họ tên, chữ ký) PHẦN II BÁO CÁO CHI TIẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT PGA: Potato D-glucose agar Đkvt: điều kiện vô trùng CG: cám gạo CB cám bắp Pt: pepton KM: khoai mỡ KL: khoai lang YE: yeast extract Bt: bột trùn xv MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài: Nấm lớn (nấm đảm) người sử dụng làm nguồn thực phẩm đời sống ngày Nấm cung cấp nhiều dinh dưỡng cho người làm phong phú, đa dạng thực đơn ăn uống người Ngoài nấm nghiên cứu dược liệu Hiện nhiều báo nấm thân gỗ có: triterpenoids, polysacarit, nucleotide, sterol, steroid có tác dụng dược phẩm điều hòa miễn dịch, chống xơ vữa động mạch, chống viêm, giảm đau, hóa trị, chống ung thư, kháng khuẩn, kháng vi-rút (bao gồm chống HIV), hạ huyết áp, chống viêm gan, chống viêm gan, chống viêm gan, chống viêm gan, chống angiogen, chống herpetic, chống oxy hóa, chống lão hóa, hạ đường huyết.[1] Hiện nấm dược liệu sử dụng chủ yếu làm thực phẩm bổ sung thực phẩm chức Tuy nhiên, dược liệu từ nấm có tiềm trở thành thuốc y học cổ truyền dựa chứng dược tính Các dược liệu tìm thấy loại nấm thử nghiệm lâm sàng tiền lâm sàng theo quy định ủy quyền hợp pháp cần thiết.[2] Nấm Quế Linh (Humphreya endetii) tìm thấy vườn quốc gia Cát Tiên tỉnh Bình Phước PGS Lê Xuân Thám ghi nhận Chi nấm Humphreya hiếm, giới ghi nhận lồi Chưa có tài liệu ni trồng nghiên cứu dược tính Nấm Quế Linh thuộc chi nấm Humphreya họ Ganodermataceae họ với loại nấm linh chi (nấm dược liệu).[3] Vì lý đề tài “Khảo sát điều kiện nuôi trồng làm tăng suất nấm Quế Linh” giúp góp phần làm nguồn cung cấp giống nghiên cứu dược tính nấm Quế Linh (Humphreya endetii) sau MỞ ĐẦU Mục đích đề tài:  Xác định thành phần môi trường nhân giống cấp (meo thạch) cấp (meo hạt) đạt hiệu cao, chất lượng tốt, rút ngắn thời gian nuôi trồng phát triển thể hệ sợi tơ nấm Quế Linh (Humphreya endertii)  Tìm tỉ lệ phối trộn dinh dưỡng môi trường giá thể (mạt cưa cao su) kết nuôi trồng tối ưu, sản phẩm nấm thu có chất lượng cao suất cao Nội dung đề tài: Nội dung 1: Phân lập nấm Quế Linh (Humphreya endertii) tạo giống nấm gốc Nội dung 2: Chọn lọc yếu tố thích hợp cho phát triển tơ nấm Quế Linh (Humphreya endertii) mơi trường cấp Nợi dung 3: Tìm mơi trường meo hạt (hạt lúa) tốt để thúc đẩy phát triển hệ enzyme nấm Quế Linh (Humphreya endertii) để hệ sợi tơ nấm phát triển nhanh Nợi dung 4: Tìm mơi trường meo giá mơi tốt để tơ nấm phát triển nhanh (rút ngắn thời gian thể) tạo thể có khối lượng lớn Ý nghĩa đề tài: Ý nghĩa khoa học: Nuôi trồng nấm Quế Linh góp phần làm tảng cho nghiên cứu ứng dụng vào nghiên cứu khác Ý nghĩa thực tiễn: Nuôi trồng nấm Quế Linh thành công nhằm cung cấp loại nấm cho thị trường dược liệu Phát triển nguồn giống nấm dược liệu cho thị trường CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU Tổng quan nấm 1.1 1.1.1 Nấm gì? Nấm (tên khoa học: Fungi) giới riêng biệt hệ thống phân loại sinh giới.[4]  Animalia - Động vật  Plantae - Thực vật  Fungi - Nấm  Protista - Sinh vật Nguyên sinh  Bacteria - Vi khuẩn Giới nấm bao gồm sinh vật nhân chuẩn dị dưỡng có thành tế bào kitin (chitin) Phần lớn nấm phát triển dạng sợi đa bào gọi sợi nấm (hyphae) tạo nên hệ sợi (mycelium), số nấm khác lại phát triển dạng đơn bào Q trình sinh sản (hữu tính vơ tính) nấm thường qua bào tử, tạo cấu trúc đặc biệt hay thể Các ngành thuộc giới nấm [5]: CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1.2 Đặc điểm nấm đảm Nấm đảm (Basidiomycota) gọi nấm lớn hay nấm thể Nấm lớn biết đến với dạng nấm ăn (nấm ăn ăn ngon) nấm độc[6] Nấm lớn sử dụng rộng rãi thực phẩm ngành công nghiệp dược liệu Nấm đảm sử dụng rộng rãi so với ngành nấm khác đặc tính, tính chất thành phần chất thể chúng 1.1.2.1 Thành phần dinh dưỡng một số loại nấm[7]: Bảng 1.1: Giá trị dinh dưỡng 100g nấm tươi Nấm ăn ngồi đặc tính thơm ngon, cịn có cân đối thành phần chất dinh dưỡng Các chất béo từ nấm có hàm lượng thấp, thích hợp cho người có vấn đề tim mạch Nấm có hàm lượng calories thấp, thích hợp làm thực phẩm cho người ăn kiên Nấm chứa đầy đủ vitamin, khoáng đủ thành phần chất hữu với lượng carbon không cao CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1.2.2 Tỉ lệ acid amin protein thành phần dinh dưỡng nấm.[8] Bảng 1.2: Các acid amin thiết yếu nấm ăn Nấm ăn chứa đầy đủ acid amin thiết yếu cho người Nấm chứa khoảng 98% acid amin thiết yếu cho người Đặc biệt nấm ăn chứa loại acid amin mà thể người không tự tổng hợp được: isoleusine, leusine, lysine, methyonine, phenylalanine, threonine, tryptophan, valine, histidine 1.1.3 Giá trị dược liệu nấm đảm Ngoài giá trị dinh dưỡng nấm ăn biết đến với vai trò nguồn dược liệu quý người  Tác dụng chống khối u:[9] Trong nấm chứa số hợp chất chống ung thư như: lentinan, hispolon, theanin, grifolin cordycepin Nấm Phellinus có chứa Phellinuslinteus có đặc tính chống ung thư, điều hịa miễn dịch chống di Nấm P linteus báo cáo có chứa hoạt chất có tính kháng vi khuẩn ngăn ngừa ung thư cách tạo CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU NADPH: quinone oxyoreductase glutathione S-transferase Hợp chất hispolon, chiết xuất từ loại nấm Phellinus có khả gây chết tế bào ung thư vú khối u quang khác  Tác dụng tăng cường khả miễn dịch thể.[10] Polysaccharide thu nhận từ nấm hay loài khác Lentinus sp., Schizophyllum sp., Grifola frondosa Sclerotinia sclerotiorum có khả điều hịa phần lớn tế bào T đại thực bào Mặc dù có tương đồng cấu trúc chức glucans này, chúng có khác hiệu chống lại khối u, đặc biệt tăng cường sản xuất cytokine hỗ trợ miễn dịch  Tác dụng phòng trị bệnh tim, mạch[11] Một số nghiên cứu cho thấy ảnh hưởng việc ăn nấm số chất chuyển hóa cholesterol tồn phần, LDL, HDL, triacylglycerol, homocysteine, huyết áp, chức cân nội môi tổn thương oxy hóa viêm, có khả làm giảm nguy mắc bệnh tim mạch 1.2 Giới thiệu nấm Quế Linh (Humphreya endertii) 1.2.1 Vị trí phân loại nấm Quế Linh.[3] Nấm Humphreya endertii Lê Xuân Thám tìm thấy rừng Nam Cát Tiên, Việt Nam vào năm 2009 đặt tên “nấm Quế Linh” Loài nấm Humphreya endertii thuộc họ Ganodermataceae nghiên cứu dược tính thành phần, khả nuôi trồng Humphreya endertii [12] Giới Fungi Ngành Basidiomycota Lớp Agaricomycetes Bộ Polyporales Họ Ganodermataceae CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.2.2 Chi Humphreya Loài Endertii Hình thái nấm Quế Linh.[12] Cấu tạo thể bào tử nấm giống với loài nấm thân gỗ khác đặc biệt nấm linh chi Quả thể nấm Quế Linh gồm có phận : mũ nấm, nấm, phiến nấm bào tử Nấm Quế Linh (Humphraye endertii) có thể mọc đơn lẻ Quả thể có hình dạng giống với chủng thuộc loài Ganoderma lucidum đặc biệt giống với G formosanum, có hình thận tỏa trịn – hình quạt xịe rộng – hình thìa trịn, đường kính thể dài 5.5 – 11.5 cm, phần lõi trung tâm nơi có xịe rộng loe, gồ lên Mặt tán nấm láng bóng có màu nâu nâu đen (màu cà phê), có vịng tròn đồng tâm đường hằn gồ ghề tỏa mép Lớp vỏ tán mỏng, bóng giịn, dễ dập vỡ ấn mạnh Mép dày kiểu xếp nếp dày 3.6 – 7.7 mm Cuống – trung tâm (5 – mm), mỏng dần phía mép, xốp đàn hồi khô Tầng ống thẳng lớp thụ tầng, màu nâu xám – nâu nhợt dày (5.5 – 9.5 mm) Bề mặt lớp thụ tầng có màu; lỗ ống tròn mịn, mật độ - ống/mm2 Bào tử có dạng ganodermoid điển hình, có kích thước 12.5 – 16.5 * 9.5 – 11.5 μm Lỗ tạo bào tử lớn Có bào tử nằm hình cầu có lỗ Vỏ cuống láng bóng màu cà phê màu đỏ tím - nâu đỏ, dày rắn lớp vỏ tán CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU Hình 1.1: Hình dạng thể nấm Quế Linh (Humphreya endertii) a: hình tổng thể nấm Quế Linh b: hình mũ nấm c: hình mặt cắt tai nấm d: hình nấm e: hình phiến nấm f: hình bào tử nấm 1.2.3 Chu trình sống nấm Quế Linh (Humphreya endertii) Vòng đời nấm Quế Linh giống với loại nấm thuộc Ganodermatace: CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU Hình 1.2: Chu trình sống nấm Quế Linh (Humphreya endertii) Nấm Quế Linh có phương thức sinh sản hữu tính Bào tử rơi khỏi phiến nấm, gặp điều kiện thích hợp bào tử nảy mầm Hệ sợi tơ nấm phát triển gọi hệ sợi đơn bào sơ cấp Hai hệ sợi đơn bào khác đặc điểm di truyền tiếp hợp lại tạo thành hệ sợi song hạch Hệ sợi song hạch phát triển tạo thành thể nấm Tại vị trí thụ tầng thể nấm, hệ sợi tơ nấm dự trữ dinh dưỡng tạo bào tử ... Đăng ký Đạt Quả thể nấm Quế 500g nấm tươi Linh sau q trình 100g nấm khơ khảo sát ni trồng Giống Linh nấm Quế 100g nấm khô ống giống nấm ống giống nấm Quế Quế Linh (giống cấp 1) Linh (giống cấp 1)... thái nấm Quế Linh. [12] Cấu tạo thể bào tử nấm giống với loài nấm thân gỗ khác đặc biệt nấm linh chi Quả thể nấm Quế Linh gồm có phận : mũ nấm, nấm, phiến nấm bào tử Nấm Quế Linh (Humphraye endertii). .. thể nấm Quế Linh (Humphreya endertii) a: hình tổng thể nấm Quế Linh b: hình mũ nấm c: hình mặt cắt tai nấm d: hình nấm e: hình phiến nấm f: hình bào tử nấm 1.2.3 Chu trình sống nấm Quế Linh (Humphreya