Trong quá trình sống của mình, vi sinh vật gây ra những quá trình hóa sinh làm ảnh hưởng lớn đến vòng tuần hoàn vật chất trong tự nhiên và những quá trình này được ứng dụng trong hà
Trang 2 Trong quá trình sống của mình, vi sinh vật
gây ra những quá trình hóa sinh làm ảnh
hưởng lớn đến vòng tuần hoàn vật chất trong
tự nhiên và những quá trình này được ứng
dụng trong hàng loạt ngành sản xuất cũng
như làm cơ sở khoa học để chọn các phương pháp bảo quản và chế biến thực phẩm
Những quá trình hóa sinh này chia thành hai loại: lên men và thối rữa
Trang 3 Chuyển hoá các hợp chất không chứa nitơ
Ứng dụng trong chế biến thực phẩm
Tế bào nấm men giàu protein & các vitamin
Lên men hiếu khí (lên men acetic, lên men oxalic, lên men citric )
Lên men kị khí (lên men rượu, lên men lactic, lên men acid butyric )
Trang 4 Lên men rượu
◦ QT phân huỷ đường thành rượu và khí CO2 (do VSV)
◦ Nấm men giữ vai trò chủ yếu: Saccharomyces, sinh enzym nội bào
◦ Trong tự nhiên nấm men thường gặp trong đất, nước, đặc biệt trong rau quả & các loại trái cây chín
Trang 5◦ Nguyên liệu: monosaccharit và disaccharit, lactose chỉ lên men
được bởi Saccharomyces lactic Tinh bột, cellulose thì phải thuỷ
phân
◦ Nồng độ đường: 20 – 25%, ở nồng độ 30 – 35% thì quá trình lên
men hầu như bị ngừng
◦ Nhiệt độ: 15 – 250C, thấp: 4 – 50C, cao: 35 – 400C, đến 500C thì quá trình ngừng hoàn toàn
◦ pH thích hợp: 3,5 – 4,5
◦ Nồng độ rượu: 2 – 5% có tác dụng kìm hãm nấm men, 5 – 6% nấm men đình chỉ sinh sản Nấm men lên men rượu vang – 16%,
Saccharomyces ovifornis có thể lên men tới 19 – 22% rượu
◦ Giai đoạn đầu lên men tạo 3,6% glycerin
Tăng pH (=NaHSO3): đạt 20 – 25% glycerin, CO2 & aldehyt acetic
Lên men (MT kiềm): 1 phân tử glucose tạo 1 phân tử glycerin và 1 phân tử
aldehyt acetic (1/2 chất này tạo a.acetic, và nữa khác tạo rượu ethylic)
Môi trường có a.amin, các a.amin bị khử amin tạo rượu bậc cao (propanol,
izobutanol, izoamylic)
Trang 6◦ Hai dạng lên men rượu: lên men với nấm men nổi và nấm men chìm
Lên men với nấm men nổi
Nhiệt độ lên men 20 – 28 0 C
Các nấm men nổi lên trong quá trình lên men
Tạo thành nhiều bọt khí
Khó làm trong sau khi lên men xong
Lên men với nấm men chìm
Nhiệt độ lên men thấp
Nấm men ngưng kết lại với nhau trong quá trình lên men
Dịch lên men trong sáng sau quá trình lên men
Ít tạo bọt khí
◦ Ứng dụng:
Sản xuất rượu ethanol
Nguyên liệu: tinh bột hoặc rỉ đường
Tinh bột thì cần thuỷ phân
Rỉ đường thì cần bổ sung nguồn photpho và nitơ
Giống men thường dùng là Saccharomyces cerevisiae (8-12%)
Chưng cất được rượu trắng hoặc cồn cao độ
Trang 7 Sản xuất bia
Nguyên liệu: đại mạch, ngũ cốc, malt
Nấm men: Saccharomyces carlsbergensis, lên men chìm
Lên men chính: 6 – 10 0 C
Lên men phụ: 1 – 4 0 C
Sau khi dịch lên men chín, đem lọc và bảo hoà CO2
Sản xuất rượu vang
Nguyên liệu: nho, nhiều loại trái cây khác
Giống men: Saccharomyces vini, Saccharomyces oviformis lên men chìm, chịu
Giống men: Saccharomyces cerevisiae, Candida, Torula,…
Sinh khối nấm men được ép thành bánh, sấy khô đến độ ẩm 7 – 10%, số lượng
tế bào 7 – 10 tỷ/g
Trang 8 Lên men lactic
◦ Là QT chuyển hoá đường thành a lactic (do VSV)
vsv
◦ Lên men lactic đồng hình
Theo sơ đồ Embden – Mayerhorf – Parnas (aldolase
và triozophotphatizomerase)
◦ Lên men lactic dị hình
C6H12O6 CH3-CO-COOH +2H 2CH3-CHOH-COOH + 94Kcal
2C6H12O6 CH3-CHOH-COOH + HOOC-(CH2)2-COOH + CH3-COOH
+ C2H5OH + CO2 + H2
VK Lactic điển hình lacticodehydrogenase
Trang 9◦ Nguyên liệu: monosaccharit & disaccharit
hình cầu /hình que T o tối thích 25 – 35 0 C, các loài ưa nhiệt (40 – 45 0 C) 60 – 80 0 C, bị tiêu diệt sau 10’ – 30’
◦ Các loài VK: Knăng tạo acid & sức chịu acid khác nhau
Trực khuẩn lactic đồng hình tạo acid cao (2 – 3,5%), phát triển:
pH 3,8 – 4 Lên men tốt nhất: pH 5,5 - 6
Liên cầu khuẩn khoảng 1%, ko phát triển: pH 3,8 – 4
và a amin Trực khuẩn có hoạt tính này cao hơn
◦ VK lactic chịu được đk khô hạn, bền với CO2 & ethylic, nhiều loài chịu 10 – 15% cồn, 1 số trực khuẩn bền với NaCl (7 –
10%)
trong các sp thực phẩm (rau, quả, sữa, thịt,…)
Trang 10◦ Vi khuẩn lên men lactic đồng hình:
Streptococcus lactis Ưa ấm (30 – 35 0 C), tích tụ được 0,8-1%
acid Một số chủng tạo thành nizin Được sử dụng nhiều trong chế biến các sản phẩm sữa: sữa chua, crem-bơ chua, phomat
Streptococcus cremoris Tạo ít acid trong môi trường, nhiệt độ thích hợp là 25 0 C
Streptococcus thermophilus Nhiệt độ tối thích 40 – 45 0 C, tích tụ được khoảng 1% acid
Lactobacillus bulgaricus Trực khuẩn kết thành chuổi, không lên men được saccharose, nhiệt độ thích hợp 40-45 0 C, tích tụ tới 2,5 – 3,5% acid
Lactobacillus casei Trực khuẩn, tích tụ 1,5% acid, nhiệt độ thích hợp 30 – 35 0 C, có hoạt tính protease Được sử dụng trong chế biến phomat
Lactobacillus acidophilus Nhiệt độ thích hợp 37 – 40 0 C, tích tụ được 2,2% acid Có khả năng sinh bacterioxin ức chế vi khuẩn gây bệnh đường ruột
Lactobacillus plantarum Nhiệt độ thích hợp 30 0 C, tích tụ được 1,3% acid Sử dụng chủ yếu trong muối chua rau quả
Trang 11◦ Các vi khuẩn lên men dị hình
Lactobacillus brevis Tạo được 1,2% acid lactic, ngoài
ra chúng tạo được tới 2,4% a acetic và rượu ethylic, tạo CO2, tạo hương cho sản phẩm Tìm thấy chủ yếu trong rau cải muối chua
Lactobacillus lycopersici Là biến chủng của L brevis
gây hư hỏng cà chua quả, cũng như cà chua đóng
hộp, nước cà chua thanh trùng chưa triệt để
Các liên cầu khuẩn tạo hương (Str diacetilactic, Str citrovorus, …) Ngoài acid, CO2, chúng còn tạo thành các chất thơm (ester, diacetil) Nhiệt độ thích hợp của các vi khuẩn này 25 – 300C
Trang 12 Rau quả sơ chế
Vai trò của muối trong làm dưa
◦ Hút nước từ rau quả tạo môi trường lên men
◦ Ức chế các vsv gây thối có sẵn trên rau quả
◦ Tạo cấu trúc và hương vị cho sản phẩm
Trang 13 Có 2 dạng:
Trang 14◦ Ý nghĩa của lên men lactic
Trong công nghiệp sữa: sữa chua, yaourt Muối chua rau quả, ủ chua thức ăn chăn nuôi, chế biến bánh mì đen Những năm gần đây vi khuẩn lactic còn được sử dụng trong chế biến giò chả, xúc xích, làm chín cá
muối (tạo vị, hương thơm, độ rắn chắc,…)
chế biến lông thú Lông thú được ủ chua sẽ bóng
mượt hơn
Acid lactic được sử dụng trong ngành công nghiệp
bánh kẹo Muối canxi lactat dùng làm dược tá
Lên men lactic tự phát lại phá hỏng các quy trình công nghệ và lam hư các sản phẩm thực phẩm: trong sản xuất bia, dịch quả, rượu, chúng sẽ lên men dịch
đường làm chua, gây đục khó lắng trong, tạo mùi vị chua nồng khó chịu
Trang 15 Dạng lên men này phát triển rộng rãi trong thiên
nhiên, hủy cellulose trong điều kiện kị khí tạo a
butyric và a acetic, và các loại khí như: CO2, H2, CH4
của enzim cellulase, cellulose bị phân hủy thành các hợp chất đơn giản hơn là cellubio, sau đó enzim
cellubiase chuyển thành glucose
Vi khuẩn sử dụng cellulose là: Bacillus cellulosae
hydrogenicus và Bacillus cellulosae methanicus Loài 1 lên men cellulose thành a acetic và a butiric với hàm lượng tương đương nhau và một ít khí (chiếm 1/3
khối lượng cellulose phân hủy), chủ yếu là hydro Loài
2 tạo a acetic chủ yếu và một lượng khí lớn hơn (1/2 khối lượng cellulose phân hủy) không có hydro mà là metan
Trang 16 Phân huỷ pectin
◦ Là những loại vsv có hoạt tính pectinase, các loài này
trường gặp trong nhóm nấm, vi khuẩn
◦ Phân huỷ pectin có tác dụng rất lớn đối với tách sợi đay, gai
◦ Vsv phân huỷ cellulose – pectin có thể làm giảm chất
lượng đáng kể các nguồn nguyên liệu thực phẩm là
thực vật (rau, quả)
Phân huỷ pectin dẫn đến làm tơi thịt quả và rau cho
tới khi các mô bị rã
Phân huỷ cellulose dẫn đến phá hỏng thành tế bào của thịt quả làm cho vsv lọt vào bên trong các tổ chức
Trang 17 Lên men butyric (clostridium)
◦ Là quá trình chuyển hoá đường thành acid butyric, CO2, H2 dưới tác dụng của vsv
◦ Những sản phẩm phụ: aceton, rượu butyric và ethylic, acid ecetic
◦ Chúng phổ biến trong thiên nhiên Thường có trong sữa,
bơ, nước thải, trong đất, phân chuồng, trên hạt ngũ cốc, đậu, khoai tây Hay gặp là: Clos butylicum, Clos
Ester hoá với methylic cho mùi táo
Ester hoá với ethylic cho mùi mận
Ester hoá với amylic cho mùi dứa, …
Trang 18 Là quá trình oxy hoá không hoàn toàn các hợp chất hữu cơ, sản phẩm tạo thành là các acid hữu
cơ
◦ Là quá trình oxy hoá rượu ethylic tới acid acetic do vi khuẩn
◦ Vi khuẩn thuộc giống Acetobacter, Gluconobacter
Là những trực khuẩn G-, không sinh bào tử, hiếu khí
khả năng chịu acid cao, vẫn phát triển ở pH = 3,2
Nhiệt độ thích hợp cho chúng phát triển khoảng 20 – 35 0 C
Các vi khuẩn lactic thường có hình sợi dài, kết thành màng trên
bề mặt cơ chất, do khả năng tạo nhầy của vỏ tế bào
Vi khuẩn acetic dễ thay đổi hình dạng
◦ Vi khuẩn này rất phổ biến trong tự nhiên, thường gặp
chúng ở các loại quả chín, rau dưa, bia, rượu,…
CH3-CH2OH + O2 CH3COOH + H2O
Trang 19 Lên men citric
◦ Là quá trình chuyển hoá đường thành acid citric
◦ Nấm mốc Aspergillus niger được sử dụng trong qúa trình lên men này
◦ Có hai phương pháp lên men sản xuất acid citric
Trang 20 Phân huỷ chất béo và acid béo
lipase Là các trực khuẩn sinh hoặc không sinh bào tử,
nấm mốc, một số nấm men
◦ Quá trình thuỷ phân tạo thành acid béo và glycerin
Glycerin được nhiều vsv sử dụng và tạo thành CO2, H2O
Các acid béo không bão hoà bị oxy hoá trước tạo thành các peroxyt bởi enzym lipoxygenase
Các peroxyt dễ dàng bị oxy hoá tiếp theo để tạo thành những sản phẩm trung gian: aldehyt, ceton,… làm cho chất béo có những mùi vị khó chịu
Trang 21 Thối rữa là quá trình phân hủy các chất
protein dưới tác dụng của vi sinh vật Quá trình này rất quan trọng trong vòng tuần hoàn vật chất Quá trình này được tiến
hành thường xuyên trong tự nhiên, đất, nước, trong cả điều kiện yếm khí và hiếu khí Sản phẩm thối rữa có thể làm ô nhiễm môi trường sống và các vi sinh vật gây thối
là nguyên nhân làm hỏng thực phẩm giàu protein
Trang 22cuối cùng của giai đoạn này
Đối với các nucleoprotid sẽ bị phân huỷ thành axit nucleotic
và protid đơn giản Sau đó protid bị phân huỷ như sơ đồ trên, còn axit nucleotic bị phân huỷ thành axit photphoric, pentose và hỗn hợp các bazơ nitơ
Trang 24 Nhiều trường hợp tạo thành dẫn xuất của
H2S là các mercaptan có mùi tanh và hôi thối với một lượng rất nhỏ
Khi phân huỷ các amin thơm (có vòng bezen)
sẽ tạo thành các sản phẩm đặc trưng của quá trình thối rữa Khi phân huỷ phenyl alamin ta được axit benzoic, tirozin → crezol,
trytophan → indol và scatol Indol và scatol có mùi hôi thối rất khó chịu (mùi phân) và có khả năng gây độc
Trang 25 Giai đoạn 3
Các chất hữu cơ được hình thành do quá trình
phân giải sơ bộ aminoaxit sẽ tiếp tục chuyển hoá,
sự chuyển hoá này tuỳ thuộc vào loài vi sinh vật
và tuỳ thuộc vào điều kiện môi trường mà rất
khác nhau
Trong điều kiện hiếu khí các chất này được oxi hoá
và có thể được vô cơ hoá hoàn toàn Sản phẩm cuối cùng là: NH3, CO2, H2O, H2S, H3PO4
Trong điều kiệm yếm khí các sản phẩm không
được oxi hoá hoàn toàn, trong môi trường sẽ
tích tụ các axit hữu cơ, rượu, amin, trong đó có nhiều chất độc và gây mùi hôi thối
Trang 27 Nhóm vi sinh vật hiếu khí
Nhóm vi sinh vật hiếu khí tuỳ nghi
Nhóm vi sinh vật yếm khí
Trang 28 Vi sinh vật thối rữa đóng vai trò cực kỳ quan
trọng trong vòng tuần hoàn vật chất trong tự
nhiên Chúng phân hủy các chất protein có trong xác động thực vật và khoáng hóa các hợp chất này để tạo thành amoniac, làm giàu cho đất,
cung cấp nguồn nitơ dinh dưỡng cho cây trồng
Song, dưới tác dụng của vi sinh vật gây thối các loại thực phẩm thịt, cá và các sản phẩm từ thịt,
cá, trứng, sữa cũng như các sản phẩm giàu
protein khác bị hư hỏng Một trong những chỉ
tiêu của sự hư hỏng là có mặt các sản phẩm của quá trình phân hủy protein (hàm lượng cao các amin, NH3, H2S và các acid béo)