KHẢO sát đặc TÍNH đối KHÁNG của các CHỦNG xạ KHUẨN đối với VI KHUẨN erwinia sp gây BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI môn

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP Luận văn tốt nghiệp Ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Erwinia sp GÂY BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI MÔN LÂM THANH MẾN Cần Thơ, 12/2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Luận văn tốt nghiệp Ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT Mã ngành: 52620112 KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Erwinia sp GÂY BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI MÔN Cán hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGs.TS Lê Minh Tường Lâm Thanh Mến MSSV: B1505025 Lớp: NN1573A3 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Chứng nhận chấp thuận luận văn tốt nghiệp đính kèm với đề tài: KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Erwinia sp GÂY BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI MÔN Do sinh viên Lâm Thanh Mến thực đề nạp Kính trình hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp xem xét Cần Thơ, ngày……tháng…….năm 2018 Cán hướng dẫn (Ký tên) PGs.TS Lê Minh Tường TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp chấp nhận luận văn với đề tài: KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Erwinia sp GÂY BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI MÔN Do sinh viên Lâm Thanh Mến thực bảo vệ trước hội đồng Ngày… tháng… năm 2018 Luận văn hội đồng đánh giá mức……… điểm Ý kiến hội đồng: ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… …………………………………………… …………………………… DUYỆT KHOA CHỦ NHIỆM KHOA NN Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2018 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu thân tơi Các số liệu trình bày luận văn trung thực chưa công bố luận văn trước Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2018 Người thực luận văn Lâm Thanh Mến i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Họ tên: Lâm Thanh Mến Ngày sinh: 24 – 02 – 1997 Nơi sinh: Vị Thanh, Cần Thơ Họ tên cha: Lâm Thanh Quý Họ tên mẹ: Nguyễn Thanh Thủy Họ tên em gái: Lâm Thị Tuyết Nhung Quê quán: Ấp Hòa Mỹ, xã Hòa Hưng, huyện Giồng Riềng, Tỉnh Kiên Giang Quá trình học tập: 2003 – 2008: Học sinh trường Tiểu học Giai Xuân 2008 – 2012: Học sinh trường THCS Hòa Hưng 2012 – 2015: Học sinh trường THPT Hòa Hưng 2015 – 2019: Sinh viên ngành Bảo vệ thực vật K41, Khoa Nông Nghiệp Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ ii LỜI CẢM TẠ Kính dâng: Cha Mẹ, người sinh ra, ni dưỡng con, ln hết lịng u thương hy sinh tất tương lai nghiệp Em xin chân thành biết ơn, PGs.Ts Lê Minh Tường, cán hướng dẫn đề tài luận văn tốt nghiệp đại học em Thầy tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi đưa lời khuyên chân thành tạo nguồn động lực để giúp em hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn, Quý Thầy Cô môn Bảo vệ Thực vật, khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng tận tâm dạy dỗ truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt trình học tập Chân thành cảm ơn, Anh Nguyễn Hồng Q đã nhiệt tình giúp đỡ tơi nhiều q trình thực thí nghiệm Thành thật cảm ơn, Các bạn Nguyễn Thu Hồng, Trần Minh Lượng, Đỗ Thanh Tùng, Nguyễn Thị Trang Phượng, bạn khác phịng thí nghiệm nhiệt tình giúp đỡ tơi q trình thực nghiên cứu Gửi lời cảm ơn đến, Các bạn lớp Bảo vệ thực vật K41A3 gắn bó tơi trình học tập rèn luyện, lời chúc sức khỏe, hạnh phúc thành đạt Kính chúc, Quý Thầy, Cô, anh, chị bạn nhiều sức khỏe thành công sống iii Lâm Thanh Mến, 2018 “Khảo sát đặc tính đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn” Luận văn tốt nghiệp Đại học chuyên ngành Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ Cán hướng dẫn: PGs.Ts Lê Minh Tường TÓM LƯỢC Đề tài “Khảo sát đặc tính đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn” thực từ tháng 05/2018 đến tháng 10/2018 điều kiện phịng thí nghiệm Bộ mơn Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ nhằm nhằm (1) tuyển chọn chủng xạ khuẩn có khả đối kháng cao với vi khuẩn Erwinia sp., (2) khảo sát khả tiết enzyme: lipase, protease, chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn gây bệnh thối nhũn khoai mơn, bao gồm thí nghiệm Thí nghiệm 1: Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai mơn Có 20 tổng số 126 chủng xạ khuẩn (103 chủng xạ khuẩn phân lập 23 chủng xạ khuẩn nhận từ môn Bảo vệ thực vật) thể khả đối kháng với vi khuẩn Erwinia sp Trong đó, bốn chủng CM-AG22, LV-ĐT24, LV-ĐT15 DH-TV4 ghi nhận có hiệu đối kháng với vi khuẩn Erwinia sp cao trì ổn định qua thời điểm Ở thời điểm ngày sau bố trí chủng xạ khuẩn CM-AG22, LV-ĐT24, LV-ĐT15 DHTV4 có bán kính vịng vơ khuẩn 8,32 mm, 6,40 mm, 5,82 mm 4,37 mm Thí nghiệm 3: Khảo sát khả sinh tổng hợp protease chủng xạ khuẩn triển vọng Kết thí nghiệm ghi nhận chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả phân giải protease (casein) môi trường thạch tiết enzyme protease môi trường ISP4 lỏng Trong đó, chủng CM-AG22 cho thấy khả tiết enzyme protease cao loại môi trường khảo sát với bán kính vịng phân giải 15,08 mm hàm lượng protease tiết 0,149 UI/ml thời điểm NSBT Đồng thời, chủng LV-ĐT24 có hàm lượng protease tiết cao 0,030 UI/ml thời điểm ngày sau bố trí Thí nghiệm 4: Khả phân giải lipid bốn chủng xạ khuẩn thực môi trường Tween 80 agar Kết cho thấy, chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả phân giải lipid Trong hai chủng LV-ĐT15, CM-AG22 có bán kính phân giải lipase cao 14,05 mm 13,75 mm thời điểm ngày sau bố trí Từ khóa: Bệnh thối nhũn, khoai môn, lipase, protease, Erwinia sp., xạ khuẩn iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LÝ LỊCH CÁ NHÂN ii LỜI CẢM TẠ iii TÓM LƯỢC iv MỤC LỤC v DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH HÌNH viii CHƯƠNG MỠ ĐẦU CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược khoai môn 2.2 Bệnh thối nhũn vi khuẩn Erwinia sp khoai môn 2.2.1 Triệu chứng bệnh 2.1.2 Tác nhân gây bệnh 2.3 Sơ lượt xạ khuẩn 2.3.1 Giới thiệu chung xạ khuẩn 2.3.2 Vai trò xạ khuẩn phòng trừ bệnh 2.2.3 Những nghiên cứu sử dụng xạ khuẩn phòng trị bệnh 10 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 14 3.1 Phương tiện 14 3.1.1 Thời gian địa điểm 14 3.1.4 Nguồn vi sinh vật nghiên cứu: 16 3.2 Phương pháp 16 3.2.1 Phân lập chủng xạ khuẩn vùng rễ khoai môn: 16 3.2.2 Đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai mơn điều kiện phịng thí nghiệm 17 3.2.3 Khảo sát khả sinh tổng hợp protease chủng xạ khuẩn có triển vọng 19 v 3.2.4 Khảo sát khả tiết enzyme lipase chủng xạ khuẩn có triển vọng 22 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Phân lập chủng xạ khuẩn vùng rễ khoai môn 23 4.2 Khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai mơn điều kiện phịng thí nghiệm 24 4.3 Khả sinh tổng hợp protease chủng xạ khuẩn 28 4.3.1 Khả tiết enzym protease môi trường thạch 28 4.3.2 Hàm lượng protease chủng xạ khuẩn môi trường lỏng 30 4.4 Khả tiết enzyme lipase chủng xạ khuẩn có triển vọng 33 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 36 5.1 Kết luận 36 5.2 Đề nghị 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 PHỤ CHƯƠNG 47 vi Đỗ Văn Thinh, 2017 Phân lập, đánh giá khả gây hại chủng nấm Phytophthora colocasiae gây bệnh cháy khoai mơn bước đầu nghiên cứu biện pháp phịng trị Luận văn kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Doolotkeldieva, T and B Saykal, 2017 Fire blight disease caused by Erwinia amylovora on rosaceae plants in kyrgyzstan and biological agents to control this disease Advances in Microbiology 6: 831 - 851 Doumbou, C L., M K Salove, D L Crawford, C Beaulieu, 2001 Actinomycetes, promising tools to control plant diseases and to promote plant growth Phytoprotection 82: 85 – 102 Errakhi, R., Lebrihi, A and Barakate, 2009 In vitro and in vivo antagonism of actinomycetes isolated from Moroccan rhizospherical soils against Sclerotium rolfsii: a causal agent of root rot on sugar beet (Beta vulgaris L.) Journal of Applied Microbiology 107: 672 - 681 Ertuğrul, S., G Dửnmez and S Takaỗ, 2007 Isolation of lipase producing Bacillus sp from olive mill wastewater and improving its enzyme activity Journal of Hazardous Materials 149(3): 720 - 724 Getha, K and S Vikineswarv, 2002 Antagonistic effects of Streptomyces violaceusniger strain G10 on Fusarium oxysporum f.sp cubense race 4: indirect evidence for the role of antibiosis in the antagonistic process J Ind Microbiol Biotechnol 28(6): 303 - 10 Gopalakrishnan, S., S Pande, M Sharma, P Humayun, B K Kiran, D Sandeep, M S Vidya, K Deepthi and O Rupela, 2011 Evaluation of actinomycete isolates obtained from herbal vermicompost for biological control of Fusarium wilt of chickpea Crop Prot 30: 1070 – 1078 Gopalakrishnan, S., V Srinivas, M S Vidya, A Rathore, 2013 Plant growthpromoting activities of Streptomyces sp in sorghum and rice Springer Plus 2(574): – Gupta, S.K and Thind, 2006 Diseases of cruciferous vegetables Scientific Publishers 170 - 185 He´lias V., Andrivon D and B Jouan., 2000 Development of symptoms caused by Erwinia carotovora ssp atroseptica under field conditions and their effects on the yield of individual potato plants Plant Pathology 49: 23 – 32 38 Hoàng Trọng Nam, 2013 Khảo sát khả đối kháng xạ khuẩn nấm colletotrichum spp gây bệnh thán thư hại gấc điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Luận văn kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Trường Đại học Cần Thơ Hobbs, G., C.M Frazer, D.C Gardner, J.A Cullum, and S.G Oliver, 1989 Dispersed growth of Streptomyces in liquid culture Applied microbiology and biotechnology 31(3): 272 - 277 Holt, J G., N R Krieg, P H A Sneath, J T Stanley and S T Williams, 1994 Bergey's Manual of Determinative Williams & Wilkins, Co., Baltimore Bacteriology 9th Hozzein, W N., W.J Li, M I A Ali, O Hammouda, A S Mousa, L H Xu and C L Jiang, 2004 Nocardiopsis alkaliphila sp nov., a novel alkaliphilicactinomycete isolated from desert soil in Egypt Int J Syst Evol Hsu, S C., and J L Lockwood 1975 Powdered chitin agar as a selective medium for enumeration of actinomycetes in water and soil Applied Microbiology 29: 422 - 426 https://nongnghiep.vn/tiec-dut-ruot-khoai-mon-sap-thu-hoach-bong-dung-bithoi-cu-la-liet-post195470.html Ngày truy cập 06/06/2017, 07:15 (GMT+7) Huỳnh Hào Quang, 2018 Khảo sát số chế đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas campestris pv citri gây bệnh loét cam, quýt chủng xạ khuẩn triển vọng Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Huỳnh Nguyễn Triều Vỹ, 2016 Khảo sát số đặc tính chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với vi khuẩn gây bệnh cháy bìa lúa vùng đất nhiễm mặn Luận văn kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Huỳnh Trường Giang 2017 Khảo sát khả phòng trị bệnh héo xanh khoai lang vi khuẩn Ralstonia solanacearum chủng xạ khuẩn Luận văn kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Hyman, L J., 1995 Isoenzyme profile and immunological relationships of pectate lyase and polygalacturonase of soft rot Erwinia species MSc Thesis, University of Dundee 39 Kämpfer P., M Goodfellow, H-J Busse, M E Trujillo, K Suzuki, W Ludwig and W B Whitman, 2012 Genus Streptomyces: The actinobacteria in: eds bergey's manual of systematic bacteriology 2nd Part B New York Springer 1455 - 1767 Kathiresan, K., R Balagurunathan and M.M Selvam, 2005 Fungicidal activity of marine actinomycetes against phytopathogenic fungi Indian J Biotechnol 4: 271 - 276 Kotoujansky, A., 1987 Molecular genetics of pathogenesis by softrot Erwinia Annu Rev Phytopathol 25:405 – 430 Kumar A., Y R Sarma and M Anandaraj, 2004 Evaluation of genetic diversity of Ralstonia solanacearum causing bacterial wilt of singer using REP-PCR and PCR- RFLP Curr science 87(11): 1555 - 1561 Küster, E., 1959 Outline of a comparative study of criteria used in characterization of the actinomycetes International Bulletin of Bacteriological Nomenclature and Taxonomy 9(2): 97 - 104 Lê Minh Tường Ngô Thị Kim Ngân, 2014 Phân lập đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Rhizoctonia solani Kunh gây bệnh đốm vằn lúa Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ Nơng nghiệp: 113 - 119 Lê Minh Tường Trần Quốc Phú, 2015 Đánh giá khả phòng trị xạ khuẩn bệnh thán thư hại xồi Tạp chí Hội nghị Khoa học Bảo vệ Thực vật toàn quốc 166 – 175 Lê Minh Tường, Lý Văn Giang Phạm Tuấn Vủ, 2015 Định danh xạ khuẩn có triển vọng phịng trị bệnh cháy bìa hại lúa Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ 41: 46 – 52 Lê Minh Tường 2015 Đánh giá khả phòng trị xạ khuẩn bệnh đạo ôn hại lúa Tạp chí Nông nghiệp Phát Triển Nông Thôn.14: 47 - 56 Lê Thành Luân, 2018 Khảo sát đặc điểm hình thái, khả gây hại chủng nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thư khoai mơn bước đầu nghiên cứu biện pháp phịng trị xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Lê Thị Bích, 2010 Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn nấm Fusarium oxysporum f.sp niveum điều kiện phòng thí nghiệm 40 Luận văn tốt nghiệp chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông Nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Lê Thị Hương, 2011 Công nghệ sản xuất khoai môn chiên đông lạnh cho giống khoai mơn tím đặc sản Bắc Kạn Luận văn tốt nghiệp ngành bảo quản chế biến nông sản Khoa Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Lê Viết Bảo, 2014 Nghiên cứu khả sinh trưởng, phát triển số giống khoai mơn biện pháp kĩ thuật cho giống có triển vọng tỉnh Yên Bái Luận văn tiến sĩ chuyên ngành khoa học trồng Khoa Nông học Trường Đại Học Thái Nguyên Lehr NA, S D Schrey, R Hampp and M T Tarkka, 2008 Root inoculation with a forest soil streptomycete leads to locally and systemically increased resistance against phytopathogens in Norway spruce New Phytol 177: 965 – 976 Lương Thị Hương Giang, 2011 Luận văn Nghiên cứu hoạt tính sinh học số chủng xạ khuẩn phân lập núi Pháo - Đại Từ - Thái Nguyên Luận văn thạc sĩ chuyên ngành sinh học Trường Đại học Thái Nguyên Magda, M A., T Sanaa, A M Saleh and A K Saleh, 2010 Chitinolytic enzyme production and genetic improvement of a new isolate belonging to Streptomyces anulatus Annals of Microbiology 61(3): 453 - 461 Manson, H S., T.S Mor, M Sternfeld, H Soreq and C J Arntzen, 2001 Expression of recombinant human acetylcholinesterase in transgenic tomato plants Biotechnol Bioeng 75: 259 – 266 Mitra, P., and P Chakrabartty, 2005 An extracellular protease with depilation activity from Streptomyces nogalator Journal of Scientific and Industrial Research 64(12): 978pp Nduka, O., 2007 Mordern Insustrial Microbiology And Biotechnology Science Enfield USA 429 - 543 Nguyễn Chí Thanh, 2014 Khảo sát khả đối kháng xạ khuẩn nấm Rhizoctonia solani Kuhn gây bệnh đốm vòng hại lúa điều kiện phịng thí nghiệm Luận văn kỹ sư chun ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Công Văn, 2016 Khảo sát khả gây hại chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum gây bệnh héo xanh khoai lang bước 41 đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị Luận văn tốt nghiệp kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Hoàng Sang, 2017 Khảo sát khả gây hại chủng vi khuẩn Xanthomonas axonopodis pv citri gây bệnh loét có múi bước đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị Luận văn tốt nghiệp kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Lân Dũng Nguyễn Nữ Kim Thảo, 2006 Các nhóm vi khuẩn chủ yếu Vietscience Nguyễn Thái Linh, 2017 Khảo sát khả gây hại chủng nấm Sclerotium spp gây bệnh thối gốc thân khoai môn bước đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Mai Thảo Nguyễn Thị Thu Nga, 2013 Hiệu xạ khuẩn phòng trừ bệnh chết nấm Rhizoctonia solani gây bệnh chết cải bắp Hội thảo quốc gia bệnh hại thực vật Việt Nam lần thứ 12 trường Đại học Vinh 229 - 236 trang Nguyễn Thị Mỹ Ngân, 2014 Luận văn Khảo sát khả phòng trị xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Ngọc Huệ Đinh Thế Lộc, 2005 Cây có củ kĩ thuật thâm canh Nhà xuất Lao động xã hội Quyển 3: Khoai môn – sọ (Coco yams) 197 trang Nguyễn Thị Như Ý, 2017 Khảo sát đặc tính chủng xạ khuẩn có khả quản lý bệnh héo xanh khoai lang vi khuẩn ralstonia solanacearum Luận văn tốt nghiệp kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Thanh Hà, 2014 Nghiên cứu sử dụng vi khuẩn nội sinh có khả phân hủy N-acyl-l-homoserine lactones (AHLs) phòng trừ bệnh thối nhũn khoai tây vi khuẩn Erwinia carotovora subsp Luận văn thạc sĩ ngành công nghệ sinh học Học viện nông nghiệp Việt Nam Nguyễn Xuân Cảnh, Phan Thị Trang Trần Thị Thu Hiền, 2016 Phân lập định danh chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với vi khuẩn 42 Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh bạc lúa Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 14(10): 1564 - 1572 Ooka, J J., 1990 Taro Diseases In Taking Taro into the 1990s University of Hawaii Pp 51 - 59 Palaniyandi, S A., S H Yang, L Zhang and J W Suh, 2013 Effects of actinobacteria on plant disease suppression and growth promotion Appl Microbiol Biotechnol 97: 9621 - 9636 Pasti, M B., A L Pometto, M P Nuti and D L Crawford, 1990 Ligninsolubilizing ability of actinomycetes isolated from termite (Termitidae) gut Applied and Environmental Microbiology 56(7) 2213 – 2218 Phạm Minh Lý, 2016 Khảo sát số chế đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh cháy bìa chủng xạ khuẩn triển vọng Luận văn tốt nghiệp kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Phạm Văn Kim, 2000 Các nguyên lý bệnh hại trồng Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Phạm Văn Kim, 2006 Giáo trình vi sinh vật đất Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ 50 trang Plucknett, D L., J K Wang and S Higa, 1983 In Taro: A Review of Colocasia esculenta and its Potentials Taxonomy of the genus Colocasia Hawaii University Press Honolulu 61 – 66 Podile, A R., and G K Kishore, 2006 Plant growth‐promoting rhizobacteria In plant ‐ associated bacteria Gnanamanickam Dordrecht, the Netherlands: Springer 195 – 230 Poovarasan, S., S Mohandas, P Paneerselvam, B Saritha and K.M Ajay, 2013 Mycorrhizae colonizing actinomycetes promote plant growth and control bacterial blight disease of pomegranate (Punica granatum L cv Bhagwa) Crop Protection 53: 175 – 181 Prescott, C E., and S J Grayston, 2013 Tree species influence on microbial communities in litter and soil: current knowledge and research needs For Ecol Manag 309: 19 – 27 Qin Z., V Peng, X Zhou, R Liang, Q Zhou, H Chen, D A Hopwood, T Keiser and Z Deng, 1994 Development of a gene cloning system for Streptomyces hygroscopicus varying chengensis, a producer of three 43 useful antifungal compounds by elimination of three barriers to DNA transfer J Bacteriol 176: 2090 - 2095 Raabe, D., I L Conners and A P Martinez, 1981 Checklist of plant diseases in hawaii Hawaii institute of agriculture and human resources College of Tropical Agriculture and Human Resources University of Hawaii Rahmanifar, B, N Hasanzadeh, J Razmi and Ghasemi A., 2012 Genetic diversity of Iranian potato soft rot bacteria based on polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis African J Biotec 11(6): 1314 - 1320 Sahun, N and A Ugur, 2003 Investigation of the Antimicrobial activity of some Streptomyces isolates Turk J Biol 27: 79 – 84 Schaad N.W., Jones J.B and Chun W, 2001 Laboratory guide for identification of plant pathogenic bacteria APS St Paul 373 pp Schaad, N W., 1988 Laboratory guide for identification of plant pathogenic bacteria Second edition APS Express 164pp Shimizu, M., N Fujita, Y Nakagawa, T Nishimura, T Furumai, Y lgarashi, H Onaka, R Yoshida and H Kunoh, 2001 Disease resistance of tissuecultured seedlings of rhododendron after treatment with Streptomyces sp R-5 J Gen a Plant Pathol 67: 325 - 332 Shimizu, M., Nakagawa, Y., Sato, Y., Furumai, T., Igarashi, Y., Onaka, H., Yoshida, R And H Kunoh, 2000 Studies on endophytic actinomycetes (I) Streptomyces sp isolated from Rhododendron and its antifungal activity Journal of General Plant Pathology 66: 360 – 366 Silvia, D S and T T Mika, 2008 Friends and foes: Steptomyces as modulators of plan desease and symbiosis Antonie van Leeuwenhoek 94: 11 - 19 Sowndhararajan, K and S C Kang, 2012 In vitro antagonistic potential of Streptomyces sp AM-S1 against plant and human pathogens Sournal of Agricultural Chemistry and Enviroment 1: 41pp Steger, M F., P Frazier, S Oishi and M Kaler, 2006 The meaning in life questionnaire: assessing the presence of and search for meaning in life Journal of Counseling Psychology 53: 80 – 93 Taechowisan, T., N Chuaychot, S Chanaphat, A Wanbanjob and P Tantiwachwutikul, 2009 Antagonistic effects of Streptomyces sp SRM1 on Colletotrichum musae Biotechnology 8(1): 86 - 92 44 Tăng Thị Chính Lý Kim Bảng, 2005 Đặc điểm phân loại chủng xạ khuẩn kháng với vi khuẩn gây bệnh héo xanh cà chua dưa hấu Viện cơng nghệ sinh học Tạp chí sinh học 39 - 43 Tống Ngọc Triêm, 2010 Tổng quan enzym ngoại bào Bacillus subtilis Luận văn tốt nghiệp chuyên ngành công nghệ sinh học Khoa môi trường công nghệ sinh học Trường Đại học kỹ thuật cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh Trần Thị Ba Võ Thị Bích Thủy, 2015 Giáo trình rau Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ, 160 trang Trần Thị Nhã Uyên, 2010 Nghiên cứu thu nhận enzyme protease từ chủng nấm sợi rừng ngập mặn Cần Giờ Luận văn thạc sĩ sinh học ngành Vi sinh vật Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh Trần Thị Thanh, 2011 Công nghệ vi sinh Nhà xuất Giáo dục Trần Thị Tím, 2013 Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn bệnh thối nhũn cải bắp vi khuẩn Erwinia carotovora điều kiện in vitro nhà lưới Luận văn kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật Khoa Nông Nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Valois, D., K Fayad, T Barasubiye, M Garon, V Dery, R Brzezinski and C Beaulieu, 1996 Glucanolytic actinomycetes antagonistic to phytopphthora fragariae var rubi, the causal agent of raspberry root rot Applied amd Environmental Microbiology 62 (5): 6pp Vernekar, J V., M S Ghatge and V V Deshpande, 1999 Alkaline protease inhibitor: a novel class of antifungal proteins against phytopathogenic fungi Biochem Biophys Res Commun 262: 702 – 707 Vũ Thị Nự, 2010 Thực trạng sản xuất khoai sọ nghiên cứu ảnh hưởng số biện pháp kỹ thuật đến sinh trưởng, suất khoai sọ Cụ Cang Thuận Châu – Sơn La Luận văn tốt nghiện thạc sĩ ngành Trồng trọt Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nôi Vũ Triệu Mân, 2007 Giáo trình bệnh chuyên khoa Nhà xuất nông nghiệp 233 trang Waksman, S A, 1959 The Actinomycetes Nature, occurrence and activities Williams and Wilkins Co., Baltimore Waskam, S A., 1961 The Actinomyces, classification, identification and description of genera and species The William and Wilkins Co Baltimore USA 45 Welbaum, G E., A V Sturz, Z M Dong, and J Nowak, 2004 Managing soil microorganisms to improve productivity of agro‐ecosystems Crit Rev Plant Sci 23: 175 – 193 Winslow, C E., J Broadhurst, RE Buchanan, C Krumwiede, LA Rogers, GH., 1920 The families and genera of the bacteria Final report of the committee of the society of american bacteriologists on characterization and classification of bacterial types J Bacteriol 5: 191 - 229 Yan-Min, V., T Da Quun, T Shi Min and Z Ding, 2000 The antagonism of 26 strains Streptomyces sp against several vegetables pathogens Hebaei Agric Univ., 23: 65 - 68 46 PHỤ CHƯƠNG Phụ bảng 01: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng vơ khuẩn (mm) xạ khuẩn vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai mơn thời điểm ngày sau bố trí Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 12,09% Độ tự 19 60 79 Tổng bình phương 487,344 3,313 490,657 Trung bình bình phương 25,650 0,055 F tính Giá trị P 464,598 0,0000 Phụ bảng 02: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng vơ khuẩn (mm) xạ khuẩn vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau bố trí Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 11,54% Độ tự 19 60 79 Tổng bình phương 479,614 3,045 482,659 Trung bình bình phương 25,243 0,051 F tính Giá trị P 497,396 0,0000 Phụ bảng 03: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng vơ khuẩn (mm) xạ khuẩn vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau bố trí Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 8,83% Độ tự 19 60 79 Tổng bình phương 513,430 1,485 514,915 Trung bình bình phương 27,023 0,025 F tính Giá trị P 1091,825 0,0000 Phụ bảng 04: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng vơ khuẩn (mm) xạ khuẩn vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau bố trí Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 8,84% Độ tự 19 60 79 Tổng bình phương 591,796 1,080 592,876 Trung bình bình phương 31,147 0,018 F tính Giá trị P 1730,396 0,0000 Phụ bảng 05: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng vơ khuẩn (mm) xạ khuẩn vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau bố trí Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 10,61% Độ tự 19 60 79 Tổng bình phương 522,991 1,192 524,184 Trung bình bình phương 27,526 0,020 F tính Giá trị P 1384,949 0,0000 Phụ bảng 06: Kết phân tích ANOVA bán kính vòng phân giải protein (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 10,67% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 9,403 4,216 13,619 Trung bình bình phương 3,134 0,263 F tính Giá trị P 11,895 0,0002 Phụ bảng 07: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải protein (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 5,57% Độ tự 16 79 Tổng bình phương 21,976 3,114 25,090 Trung bình bình phương 7,325 0,195 F tính Giá trị P 37,643 0,0000 Phụ bảng 08: Kết phân tích ANOVA bán kính vòng phân giải protein (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 11,15% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 8,335 25,565 33,991 Trung bình bình phương 2,778 1,604 F tính Giá trị P 1,733 0,2006 Phụ bảng 09: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải protein (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 3,19% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 28,694 2,964 31,659 Trung bình bình phương 9,565 0,185 F tính Giá trị P 51,625 0,0000 Phụ bảng 10: Kết phân tích ANOVA hàm lượng protease (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau nuôi lắc Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 8,37% Độ tự 12 15 Tổng bình phương 2,711 0,031 2,742 Trung bình bình phương 0,904 0,003 F tính Giá trị P 347,880 0,0000 Phụ bảng 11: Kết phân tích ANOVA hàm lượng protease (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau nuôi lắc Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 12,27% Độ tự 12 15 Tổng bình phương 4,846 0,119 4,965 Trung bình bình phương 1,615 0,010 F tính Giá trị P 163,420 0,0000 Phụ bảng 12: Kết phân tích ANOVA hàm lượng protease (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau nuôi lắc Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 8,64% Độ tự 12 15 Tổng bình phương 5,320 0,067 5,387 Trung bình bình phương 1,773 0,006 F tính Giá trị P 318,714 0,0000 Phụ bảng 13: Kết phân tích ANOVA hàm lượng protease (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau nuôi lắc Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 8,21% Độ tự 12 15 Tổng bình phương 5,639 0,019 5,658 Trung bình bình phương 1,880 0,002 F tính Giá trị P 1179,571 0,0000 Phụ bảng 14: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải lipid (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 9,31% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 10,860 2,333 13,192 Trung bình bình phương 3,620 0,146 F tính Giá trị P 24,828 0,0000 Phụ bảng 15: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải lipid (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 10,18% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 45,346 6,743 52,088 Trung bình bình phương 15,115 0,421 F tính Giá trị P 35,868 0,0000 Phụ bảng 16: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải lipid (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 4,83% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 7,124 4,056 11,180 Trung bình bình phương 2,375 0,254 F tính Giá trị P 9,367 0,0008 Phụ bảng 17: Kết phân tích ANOVA bán kính vịng phân giải lipid (mm) bốn chủng xạ khuẩn có triển vọng đối kháng với vi khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng CV = 4,91% Độ tự 16 19 Tổng bình phương 18,287 6,468 25,294 Trung bình bình phương 6,276 0,404 F tính Giá trị P 15,524 0,0001 Phụ bảng 18: Giá trị OD660nm đo nồng độ tyrosin khác Ống nghiệm số Nồng độ tyrosin (micromol) 0,2 0,4 0,6 0,8 Chỉ số Delta OD 0,041 0,105 0,155 0,211 0,245 Phụ hình 1: Biểu đồ phương trình đường chuẩn biểu diễn biến thiên mật độ quang Delta OD660nm theo lượng tyrosin ... Khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai môn điều kiện phịng thí nghiệm Kết đánh giá nhanh khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối. .. thấy xạ khuẩn có tiềm lớn vi? ??c quản lí nhiều mầm bệnh vi khuẩn gây hại nhiều loại trồng Trên sở đó, đề tài ? ?Khảo sát đặc tính đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai. .. luận văn tốt nghiệp đính kèm với đề tài: KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Erwinia sp GÂY BỆNH THỐI NHŨN TRÊN KHOAI MÔN Do sinh vi? ?n Lâm Thanh Mến thực đề nạp