Nghiên cứu được thực hiện tại phòng thí nghiệm thuộc Bộ môn Bảo vệ Thực vật, Trường Đại học Cần Thơ nhằm tìm ra chủng xạ khuẩn có khả năng đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzicola gây bệnh sọc trong trên lúa. Có 18 trong tổng số 87 chủng xạ khuẩn thí nghiệm được xác định có khả năng đối kháng với vi khuẩn gây bệnh sọc trong trên lúa trong điều kiện phòng thí nghiệm. Mời các bạn tham khảo!
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI VI KHUẨN Xanthomonas oryzae pv oryzicola GÂY BỆNH SỌC TRONG TRÊN LÚA Tăng Kim1, Trần Văn Dũng2, Lê Minh Tường2 TÓM TẮT Nghiên cứu thực phịng thí nghiệm thuộc Bộ mơn Bảo vệ hực vật, Trường Đại học Cần hơ nhằm tìm chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola gây bệnh sọc lúa Có 18 tổng số 87 chủng xạ khuẩn thí nghiệm xác định có khả đối kháng với vi khuẩn gây bệnh sọc lúa điều kiện phịng thí nghiệm hí nghiệm khả đối kháng 18 chủng xạ khuẩn bố trí theo kiểu khối hồn tồn ngẫu nhiên với lần lặp lại Kết cho thấy chủng CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 thể khả đối kháng cao với vi khuẩn X oryzae pv oryzicola đến thời điểm ngày sau nuôi cấy với bán kính vịng vơ khuẩn 5,0 mm; 4,8 mm; 4,6 mm 4,8 mm Bên cạnh đó, khả phân giải lipid chủng xạ khuẩn bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên với lặp lại Kết cho thấy tất chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả tiết enzyme lipase chủng ĐT24, CT4 ĐT12 thể khả phân giải lipid cao với bán kính vịng phân giải 14,00 mm; 14,90 mm 15,20 mm thời điểm ngày sau nuôi cấy Mặt khác, khả phân giải protein chủng xạ khuẩn bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với lần lặp lại Kết cho thấy tất chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả tiết enzyme protease chủng ĐT24 thể khả phân giải protein cao với bán kính vịng phân giải 17,58 mm thời điểm ngày sau ni cấy Từ khóa: Bệnh sọc lúa, lipid, protein, Xanthomonas oryzae pv oryzicola, xạ khuẩn I ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh sọc lúa vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola (Xoc) bệnh hại quan trọng lúa, bệnh gây thiệt hại suất đáng kể khoảng 17,5 - 30% ghi nhận phổ biến nước Châu Á (Wonni et al., 2014) Biện pháp phòng trị bệnh chủ yếu sử dụng loại thuốc hóa học Tuy nhiên, biện pháp hóa học có tác động xấu ảnh hưởng đến sức khỏe người, gây ô nhĩm môi trường, lưu tồn sản phẩm tạo tính kháng thuốc mầm bệnh Nhằm hướng đến nơng nghiệp bền vững, phịng trừ sinh học hướng mang tính hiệu thân thiện với mơi trường Trong đó, xạ khuẩn nhóm vi sinh vật nghiên cứu có nhiều tiềm lớn phòng trừ sinh học bệnh chẳng hạn xạ khuẩn ức chế mầm bệnh với nhiều chế như: tiết kháng sinh, cộng sinh ký sinh Ngồi ra, xạ khuẩn cịn có khả tiết enzyme ngoại bào (lipase, protease, chitinase, glucanase,…) giúp phân hủy vách tế bào vi sinh vật gây bệnh heo nghiên cứu Yan-Min cộng tác viên (2000), cho thấy hoạt tính đối kháng 26 chủng Streptomyces sp chống lại vi khuẩn Erwinia carotovora cải bắp Trung Quốc chất kháng sinh Gần đây, nhiều nghiên cứu công bố cho xạ khuẩn có khả quản lý bệnh vi khuẩn gây hại trồng vi khuẩn Ralstonia solanacearum gây bệnh héo xanh khoai lang (Huỳnh Trường Giang, 2017), vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh cháy bìa lúa (Nguỹn hị Mỹ Ngân, 2014), vi khuẩn Xanthomonas campestris pv citri gây bệnh loét cam, quýt (Huỳnh Hào Quang, 2018), vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối củ khoai môn (Lê Minh Phương ctv., 2019) Do đó, việc nghiên cứu xạ khuẩn phòng trị bệnh sọc lúa biện pháp sinh học đầy tiềm năng, hướng đến nơng nghiệp an tồn bền vững II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Nguồn xạ khuẩn: hu mẫu đất ruộng trồng lúa có diện tích lớn 1,000m2 chọn đất gốc lúa khỏe thu độ sâu từ 10 - 25 cm Các mẫu đất ruộng khác cho vào túi nilon riêng mang phịng thí nghiệm tiến hành phân lập theo phương pháp Hsu Lockwook (1975) Nguồn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola chủng vi khuẩn nhận từ Bộ môn Bảo vệ hực vật, Khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần hơ Chủng vi khuẩn ghi nhận có đặc điểm hình thái, màu sắc khuẩn lạc, đặc điểm sinh hóa triệu chứng điển hình vi khuẩn gây bệnh sọc lúa từ huyện Vị hủy, tỉnh Hậu Giang có khả xâm nhĩm gây hại nặng lúa số chủng vi khuẩn thu thập Học viên cao học ngành Bảo vệ thực vật, Trường Đại học Cần hơ Khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần hơ 44 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola điều kiện phịng thí nghiệm a) hu thập phân lập xạ khuẩn hu mẫu đất ruộng trồng lúa có diện tích lớn 1.000 m2 số tỉnh ĐBSCL như: Cần hơ, Trà Vinh, Hậu Giang Đồng háp Chọn đất gốc lúa khỏe thu độ sâu từ 10 - 25 cm Các mẫu đất phân lập theo phương pháp Hsu Lockwook (1975) sau: Hòa gram đất vào 40 mL nước cất trùng cho vào ống Falcon 50 mL Lắc 30 phút Pha loãng nồng độ: 10-1 ,10-2, 10-3, 10-4 Rút 50 µL huyền phù nồng độ 10-3 10-4 cho vào đĩa petri chứa môi trường ISP4 chà đĩa Đĩa ủ - ngày, sau tách rịng xạ khuẩn mơi trường MS Các chủng xạ khuẩn phân lập tồn trữ ở 80C để sử dụng cho thí nghiệm b) Chuẩn bị thí nghiệm Những chủng xạ khuẩn ni cấy môi trường MS ngày, xác định mật số chuyển huyền phù xạ khuẩn 108 cfu/mL Vi khuẩn X oryzae pv oryzicola (Xoc) nuôi cấy đĩa petri chứa môi trường King’s B 48 giờ, cho mL nước cất trùng vào đĩa, xác định mật số chuyển huyền phù vi khuẩn có mật số 108 cfu/mL c) hực thí nghiệm Hịa 50 mL huyền phù vi khuẩn Xoc (mật số 108 cfu/mL) 10 mL môi trường King’B lỏng (Khoảng 50ºC) vào đĩa Petri, lắc đều, để nguội Sau tạo giếng đĩa petri dụng cụ đục trịn có đường kính mm, dùng micropipet hút 10 µL huyền phù xạ khuẩn (mật số 108 cfu/mL) cho vào giếng vừa đục, giếng chủng xạ khuẩn khác Đĩa Petri thí nghiệm đặt điều kiện nhiệt độ phòng d) Ch̉ tiêu theo d̃i Tiến hành đo bán kính vịng vơ khuẩn thời điểm 1, 3, sau ngày sau nuôi cấy 2.2.2 Khảo sát khả tiết enzyme protease chủng xạ khuẩn môi trường thạch a) Bố trí thí nghiệm hí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên với lặp lại, nghiệm thức chủng xạ khuẩn thí nghiệm hí nghiệm thực theo phương pháp Mitra Chakrabartty (2005): Xạ khuẩn sau nuôi cấy đĩa petri ngày môi trường MS, xác định mật số chuyển huyền phù xạ khuẩn 108 cfu/mL Khoanh giấy thấm (đường kính mm) có tẩm xạ khuẩn (mật số 108 cfu/mL) cấy thành điểm môi trường chứa chất casein Xác định hoạt tính protease xạ khuẩn tiết môi trường thạch cách trán dung dịch TCA (Tricloro acid) 10% lên đĩa petri 30 giây b) Ch̉ tiêu theo d̃i Tiến hành đo bán kính vịng phân giải protein sau 3, 5, ngày sau nuôi cấy vùng không ăn màu với thuốc nhuộm TCA 2.2.3 Khảo sát khả tiết enzyme lipase chủng xạ khuẩn môi trường thạch a) Bố trí thí nghiệm hí nghiệm bố trí hồn toàn ngẫu nhiên với lặp lại, nghiệm thức chủng xạ khuẩn thí nghiệm.hí nghiệm thực theo phương pháp (Ertuğrul et al., 2007): Xạ khuẩn sau nuôi cấy đĩa petri ngày môi trường MS, xác định mật số chuyển huyền phù xạ khuẩn 108 cfu/mL Khoanh giấy thấm (đường kính mm) có tẩm xạ khuẩn (mật số 108 cfu/mL) cấy thành điểm mơi trường có chứa Tween 80 agar b) Ch̉ tiêu theo d̃i Tiến hành đo bán kính vịng phân giải lipid thời điểm 3, 5, ngày sau nuôi cấy vùng suốt 2.2.4 Xử lý số liệu Số liệu tổng hợp, xử lý sơ phần mềm Excel hống kê phân tích ANOVA so sánh khác biệt trung bình nghiệm thức theo cách bố trí thí nghiệm phần mềm MSTATC 2.3 hời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ tháng năm 2019 đến tháng 02 năm 2020 phòng thí nghiệm bệnh nhà lưới thuộc Bộ mơn Bảo vệ thực vật, Trường Đại học Cần hơ, thành phố Cần hơ III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập xạ khuẩn Kết phân lâp 87 chủng xạ khuẩn từ đất trồng lúa, dựa vào đặc điểm hình thái khuẩn lạc đặc tính sinh hóa hình dạng khuẩn lạc, màu sắc khuẩn ty chất, màu sắc khuẩn ty khí sinh, sắc tố khuếch tán môi trường nuôi cấy xác định chủng xạ khuẩn phân lập thuộc chi Streptomyces (Nguỹn Lân Dũng ctv., 2002) 45 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 3.2 Khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola điều kiện phịng thí nghiệm Kết đánh giá nhanh khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn X oryzae pv oryzicola (Xoc) gây bệnh sọc lúa cho thấy có 18 chủng xạ khuẩn thực có khả đối kháng tổng số 87 chủng xạ khuẩn phân lập Tiếp tục sử dụng 18 chủng xạ khuẩn để đánh giá khả đối kháng với vi khuẩn Xoc điều kiện phòng thí nghiệm với lần lặp lại Kết ghi nhận thơng qua bán kính vịng vơ khuẩn (BKVVK) thời điểm 1, 3, ngày sau cấy (NSKC) trình bày bảng Ở thời điểm NSKC, đa số chủng xạ khuẩn có khả ức chế phát triển vi khuẩn X oryzae pv oryzicola mức độ khác Trong đó, chủng CT4, ĐT24, ĐT12 TV4 thể khả ức chế vi khuẩn Xoc cao với BKVVK 5,0 mm; 4,6 mm; 4,6 mm 4,4 mm có khác biệt ý nghĩa so với chủng lại Đến thời điểm NSKC khả ức chế phát triển vi khuẩn gây bệnh chủng xạ khuẩn có xu hướng tăng lên với BKVVK dao động khoảng 0,2 - 5,2 mm Trong đó, chủng CT4 có BKVVK cao 5,2 mm, chủng ĐT24 TV4 với BKVVK 4,8 mm, chủng ĐT12 với BKVVK 4,6 mm có khác biệt ý nghĩa với chủng cịn lại Đến thời điểm NSKC khả đối kháng với vi khuẩn Xoc chủng xạ khuẩn có xu hướng giảm Tuy nhiên, chủng CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 trì khả đối kháng cao với BKVVK 5,6 mm; 5,3 mm; 5,1 mm 4,9 mm khác biệt có ý nghĩa với chủng lại Đến thời điểm NSTN, chủng CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 trì khả đối kháng cao với BKVVK 5,0 mm; 4,8 mm; 4,6 mm 4,8 mm khác biệt có ý nghĩa với chủng cịn lại Nhìn chung, 18 chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với vi khuẩn Xoc gây bệnh sọc lúa mức độ khác qua thời điểm khảo sát Nổi bật chủng xạ khuẩn CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 thể khả đối kháng với vi khuẩn Xoc tốt với BKVVK cao thời gian trì khả đối kháng bền vững đến thời điểm ngày sau thí nghiệm Bảng Bán kính vịng vơ khuẩn (mm) chủng xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola thời điểm 1, 3, ngày sau ni cấy (NSKC) Bán kính vịng vơ khuẩn (mm) qua thời điểm Chủng xạ STT khuẩn NSKC NSKC NSKC NSKC CT4 5,0 a 5,2 a 5,6 a 5,0 a ĐT24 4,6 ab 4,8 b 5,3 ab 4.8 ab TV4 4,4 b 4,8 b 5,1 b 4,6 b ĐT12 4.6 ab 4,6 bc 4,9 b 4,8 ab CT3 3,6 c 2,8 cd 2,2 c 1,5 c CT7 2,6 d 1,1 f 1,1 de 1,1 d CT12 2,6 d 1,2 e 1,1 de 1,1 d ĐT5 3,6 c 2,9 c 2,2 c 1,5 c ĐT31 2,1 de 2,8 cd 3,1 bc 1,5 d 10 ĐT27 2,6 d 2,9 c 2,2 c 1,5 d 11 ĐT30 2,8 cd 2,9 c 3,1 bc 1,1 d 12 ĐT32 2,1 de 1,6 de 1,2 d 0,9 e 13 HG13 0,8 e 1,5 d 1,0 e 0,7 ef 14 HG11 0,6 ef 1,1 f 1,0 e 0,9 e 15 HG20 0,6 ef 1,4 de 1,1 de 0,5 fg 16 TV5 0,2 fg 0,5 g 0,7 ef 0,3 gh 17 TV6 0,1 g 0,5 g 1,0 e 0,5 fg 18 TV15 0,0 hi 0,2 gh 0,7 ef 0,1 h Mức ý nghĩa * * * * CV (%) 19,71 16,38 22,40 26,62 Ghi chú: Các giá trị trung bình cột theo sau nhiều chữ giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê phép thử Duncan * khác biệt mức ý nghĩa 5% Hình Khả đối kháng xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola thời điểm ngày sau nuôi cấy 46 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 Khả đối kháng xạ khuẩn vi khuẩn gây bệnh trồng nhiều nghiên cứu trước chứng minh chẳng hạn Nguỹn hị Mỹ Ngân (2014) phân lập tuyển chọn 23 tổng số 268 chủng xạ khuẩn phân lập từ đất trồng lúa có khả đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh cháy bìa lúa Trong đó, chủng DT24, ST42, TV4, VL6 CT45 với bán kính vơ khuẩn cao 4,00 mm; 4,00 mm; 4,06 mm; 4,18 mm 5,10 mm thời điểm ngày sau thí nghiệm Đồng thời chủng xạ khuẩn có khả tiết enzyme ngoại bào protease, cellulase, lipase… heo Phạm Minh Lý (2016), ghi nhận chủng xạ khuẩn LV-ĐT1, LM-HG6, TÔ-VL5, TS-AG4, BT-CT1, BT-CT5 có khả đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh cháy bìa lúa thơng qua chế tiết enzyme ngoại bào protease, lipase cellulase Như vậy, chủng CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 có khả đối kháng với vi khuẩn gây bệnh gây bệnh sọc lúa cao tổng số 18 chủng xạ khuẩn thí nghiệm chủng xạ khuẩn tiếp tục sử dụng thí nghiệm 3.3 Khả tiết enzyme lipase enzyme protease chủng xạ khuẩn khả tiết enzyme pilase phân giải lipid hời điểm NSKC, tất chủng xạ khuẩn thể khả phân giải lipid với bán kính vòng phân giải dao động từ 2,80 - 7,10 mm, chủng ĐT24 có bán kính phân giải cao 7,10 mm; chủng CT4 có bán kính phân giải 4,80 mm có khác biệt thống kê với chủng xạ khuẩn thí nghiệm cịn lại Ở thời điểm NSKC bán kính vịng phân giải chủng xạ khuẩn gia tăng dao động từ 7,63 - 9,88 mm chủng ĐT24, CT4 ĐT12 có bán kính vịng phân giải 9,88 mm, 9,88 mm 9,48 mm không khác biệt ý nghĩa với khác biệt có ý nghĩa so với chủng TV4 lại Ở thời điểm NSKC, chủng ĐT24, CT4, ĐT12 tiếp tục có khả phân giải lipid cao không khác biệt thống kê với với bán kính vịng phân giải 13,10, 11, 90 12,38 mm khác biệt thống kê với chủng TV4 mức ý nghĩa 5% hời điểm NSKC, vòng phân giải lipid tiếp tục tăng chủng ĐT24, CT4, ĐT12 trì khả phân giải lipid cao với bán kính vịng phân giải 14,00 mm; 14,90 mm 15,20 mm cao khác biệt thống kê với chủng TV4 mức ý nghĩa 5% Khả tiết enzyme lipase enzyme protease chủng xạ khuẩn môi trường thạch đánh giá qua thời điểm 3, 5, ngày sau nuôi cấy (NSKC) trình bày Bảng 3.3.1 Khả tiết enzyme lipase Khả tiết enzyme lipase chủng xạ khuẩn thí nghiệm trình bày bảng Kết cho thấy chủng xạ khuẩn thí nghiệm thể Hình Khả phân giải lipid chủng xạ khuẩn thời điểm NSKC Bảng Khả phân giải lipid protein chủng xạ khuẩn thí nghiệm qua thời điểm 3, 5, ngày sau ni cấy (NSKC) Nghiệm thức Bán kính vịng phân giải lipid (mm) Bán kính vịng phân giải protein (mm) NSKC NSKC NSKC NSKC NSKC NSKC NSKC NSKC ĐT24 7,10 a 9,88 a 13,10 a 14,0 a 6,40 a 12,38 a 14,35 a 17,58 a CT4 4,80 b 9,88 a 11,90 a 14,9 a 2,56 c 7,90 c 11,05 b 14,95 b ĐT12 3,10 c 9,48 a 12,38 a 15,20 a 5,35 b 9,85 b 11,55 b 14,55 b TV4 2,80 d 7,63 b 10,43 b 11,28 b 3,10 c 9,70 b 10,67 b 11,88 c * * * * * * * * 25,82 7,41 8,86 6,85 14,37 6,76 8,64 4,58 Mức ý nghĩa CV (%) Ghi chú: Các giá trị trung bình cột theo sau nhiều chữ giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê phép thử Duncan; * khác biệt mức ý nghĩa 5% 47 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 3.3.2 Khả tiết enzyme protease Khả tiết enzyme protease chủng xạ khuẩn thí nghiệm trình bày bảng hời điểm NSKC, tất chủng xạ khuẩn thí nghiệm thể khả phân giải protein với bán kính vịng phân giải dao động từ 2,56 - 6,40 mm, chủng ĐT24 có bán kính vịng phân giải lớn 6,40 mm khác biệt ý nghĩa thống kê mức 5% so với chủng xạ khuẩn thí nghiệm cịn lại hời điểm NSKC, mức độ phân giải protein chủng xạ khuẩn gia tăng với bán kính vịng phân giải dao động khoảng 7,90 mm đến 12,38 mm chủng ĐT24 có bán kính vịng phân giải 12,38 mm cao khác biệt ý nghĩa thống kê với chủng cịn lại hời điểm NSKC, bán kính vịng phân giải dao động khoảng 10,67 - 14,35 mm chủng ĐT24 có bán kính vịng phân giải cao 14,35 mm khác biệt ý nghĩa thống kê với chủng lại hời điểm NSKC, bán kính vịng phân giải chủng xạ khuẩn tiếp tục tăng dao động từ 11,88 - 17,58 mm chủng ĐT24 trì khả phân giải protein cao với bán kính vịng phân giải 17,58 mm khác biệt ý nghĩa thống kê với chủng lại đối kháng với tác nhân gây bệnh sọc lúa thông qua chế tiết enzyme lipase enzyme protease khả tiết enzyme xạ khuẩn hướng triển vọng phòng trị bệnh trồng vi khuẩn gây heo nghiên cứu Huỳnh Trường Giang (2017) cho chủng TT9, TT11, TT15, TTr44, TĐ16 TT17 có khả tiết enzym lipase enzyme protease để đối kháng bệnh héo xanh khoai lang vi khuẩn Ralstonia solanacearum gây Tương tự, Lê Minh Phương cộng tác viên (2019) cho chủng LV-ĐT15, CM-AG22, DH-TV4, LV-ĐT24 có đối kháng đối kháng cao với vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn khoai mơn có khả tiết enzyme lipase enzyme protease IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Bốn (04) chủng xạ khuẩn CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 có khả đối kháng cao với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzicola gây bệnh sọc lúa đồng thời thể khả tiết enzyme lipase protease cao điều kiện phịng thí nghiệm 4.2 Đề nghị Khảo sát khả phòng trị bệnh sọc lúa chủng xạ khuẩn điều kiện nhà lưới TÀI LIỆU THAM KHẢO Hình Khả phân giải protein chủng xạ khuẩn thời điểm NSKC Nhìn chung, chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả tiết enzyme lipase phân giải lipid enzyme protease phân giải protein với nhiều mức độ khác chủng ĐT24 có khả tiết enzyme lipase enzyme protease cao kéo dài đến thời điểm ngày sau nuôi cấy heo Nguỹn Lân Dũng cộng tác viên (2002), lipid thành phần quan trọng màng sinh chất hay màng tế bào chất (Cytoplasmic membrane, CM) protein thành phần cấu tạo vách tế bào vi khuẩn Như vậy, việc ức chế tiêu diệt mầm bệnh thông qua chế tiết enzyme lipase phân giải lipid enzyme protease phân giải protein vách tế bào mầm bệnh xạ khuẩn có khả đáng xem xét kết thí nghiệm chứng minh chủng xạ khuẩn có khả 48 Huỳnh Hào Quang, 2018 Khảo sát số chế đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas campestris pv citri gây bệnh loét cam, quýt chủng xạ khuẩn triển vọng Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần hơ Huỳnh Trường Giang, 2017 Khảo sát khả phòng trị bệnh héo xanh khoai lang vi khuẩn Ralstonia solanacearum chủng xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp cao học chuyên ngành bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần hơ Lê Minh Phương, Nguyễn Trường Sơn Lê Minh Tường, 2019 Khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn Erwinia sp gây bệnh thối nhũn củ khoai môn (Colocasia esculenta) Tạp chí Bảo vệ thực vật, 5: 27-34 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến Phạm Văn Tỵ, 2002 Vi sinh vật học Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Hà Nội Nguyễn hị Mỹ Ngân, 2014 Khảo sát khả phòng trị xạ khuẩn vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae Luận văn tốt nghiệp cao học ngành bảo Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 5(114)/2020 vệ thực vật Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần hơ Phạm Minh Lý, 2016 Khảo sát số chế đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh cháy bìa chủng xạ khuẩn triển vọng Luận văn tốt nghiệp kỹ sư chuyên ngành bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần hơ Ertuğrul, S., G Dửnmez and S Takaỗ, 2007 Isolation of lipase producing Bacillus sp from olive mill wastewater and improving its enzyme activity Journal of Hazardous Materials, 149(3): 720-724 Hsu, S., J Lockwood, 1975 Powered chitin agar as a selective medium for enumeration of actinomycetes in water and soil Apllied microbiology, 29(3): 422-426 Mitra, P and P Chakrabartty, 2005 An extracellular protease with depilation activity from Streptomyces nogalator Journal of Scientiic and Industrial Research, 64(12): 978-983 Wonni, I., B Cottyn, L Detemmerman, S Dao, L Ouedraogo, S Sarra and V Verdier, 2014 Analysis of Xanthomonas oryzae pv oryzicola Population in Mali and Burkina Faso Reveals a High Level of Genetic and Pathogenic Diversity Phytopathology, 104(5): 520-531 Yan-Min V., T Da Quun, T Shi Min and Z Ding, 2000 he antagonism of 26 strains Streptomyces sp against several vegetables pathogens Hebaei Agric Univ., 23: 65-68 Evaluation of antagonistic ability of actinomyces for Xanthomonas oryzae pv oryzicola causing bacterial leaf streak disease on rice Tang Kim, Tran Van Dung, Le Minh Tuong Abstract he research was conducted in the laboratory of Plant Protection Department, Can ho University to screen actinomycetes to control bacterial leaf streak disease on rice caused by Xanthomonas oryzae pv oryzicola Eighteen of 87 strains in total were able to resist against X oryzae pv oryzicola in laboratory condition he experiments for antagonistic ability of 18 actinomyces strains in controlling X oryzae pv oryzicola arranged in completely randomized design with replications he results found that strains CT4, ĐT24, TV4 and ĐT12 had high antagonistic ability with a radius of inhibition zones reaching 5.0 mm; 4.8 mm; 4.6 mm and 4.8 mm respectively at days ater inoculation On the other hand, the lipolytic ability was also checked with replications by completely randomized design he results indicated that testing strains could produce lipase and strains ĐT24, CT4 and ĐT12 expressed the lipolytic activity, with the lipolytic halo radius of 14.00 mm; 14.90 mm and 15.20 mm respectively at days ater testing Beside, protease activity assay was tested with replications by completely randomized design he results found that strains could produce protease and the ĐT24 isolate expressed the highest proteinolytic activity with proteinolytic halo radius of 17.58 mm at days ater testing Keywords: Actinomyces, bacterial leaf streak on rice, lipid, protein, Xanthomonas oryzae pv Oryzicola Ngày nhận bài: 13/4/2020 Ngày phản biện: 22/4/2020 Người phản biện: TS Trần Đình Giỏi Ngày duyệt đăng: 29/4/2020 NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG NGẢI ĐEN (Kaempferia parvilora) BẰNG CHỒI CỦ Đào hùy Dương1, Nguỹn hị hu1, Trần Ngọc Lân1, Nguỹn Đắc Bình Minh1, Nguỹn Viết Trung2 TÓM TẮT Ngải đen loại dược liệu quý Việt Nam, nhân giống từ chồi củ, khối lượng củ giống từ 30 g - 40 g/1 nhánh cho tỷ lệ nảy mầm cao 100%, trồng nên chọn loại củ giống nhánh to khỏe không nên chọn củ nhiều nhánh nhỏ hành phần giá thể đất + trấu hun (1 : 1) cát 100% cho tỷ lệ nảy mầm đạt 100%, thời gian ươm tới xuất vườn 45 - 46 ngày Bổ sung chất kích thích sinh trưởng GA3 nồng độ 150 ppm, N3M ROOTS NEW (pha theo khuyến cáo) cho tỷ lệ nảy mầm cao 100%, thời gian ươm tới xuất vườn giảm từ - 12 ngày so với đối chứng Chế độ che bóng thích hợp 60 - 70% có tỷ lệ sống sót 100%, tăng khản phát triển Từ khóa: Ngải đen (Kaempferia parvilora), chồi củ, kỹ thuật nhân giống Viện Nghiên cứu Phát triển Vùng, Bộ Khoa học Công nghệ; Trường THPT hạch Bàn, Hà Nội 49 ... Xanthomonas oryzae pv oryzicola điều kiện phịng thí nghiệm Kết đánh giá nhanh khả đối kháng chủng xạ khuẩn vi khuẩn X oryzae pv oryzicola (Xoc) gây bệnh sọc lúa cho thấy có 18 chủng xạ khuẩn thực có khả. .. khuẩn Xoc gây bệnh sọc lúa mức độ khác qua thời điểm khảo sát Nổi bật chủng xạ khuẩn CT4, ĐT24, TV4 ĐT12 thể khả đối kháng với vi khuẩn Xoc tốt với BKVVK cao thời gian trì khả đối kháng bền vững... nghị Khảo sát khả phòng trị bệnh sọc lúa chủng xạ khuẩn điều kiện nhà lưới TÀI LIỆU THAM KHẢO Hình Khả phân giải protein chủng xạ khuẩn thời điểm NSKC Nhìn chung, chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả