KHẢO sát KHẢ NĂNG đối KHÁNG của các CHỦNG xạ KHUẨN TRIỂN VỌNG đối với nấm trichoconis padwickii gây BỆNH LEM lép hạt TRÊN lúa

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP Luận Văn Tốt Nghiệp Kỹ Sƣ NGÀNH BẢO VỆ THỰC VẬT KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN TRIỂN VỌNG ĐỐI VỚI NẤM Trichoconis padwickii GÂY BỆNH LEM LÉP HẠT TRÊN LÚA LÊ QUANG TOÀN Cần Thơ, 12/2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP Luận Văn Tốt Nghiệp Kỹ Sƣ NGÀNH BẢO VỆ THỰC VẬT Mã ngành: 52620112 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN TRIỂN VỌNG ĐỐI VỚI NẤM Trichoconis padwickii GÂY BỆNH LEM LÉP HẠT TRÊN LÚA Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGS TS Lê Minh Tƣờng Lê Quang Toàn MSSV: B1504936 Lớp: Bảo Vệ Thực Vật K41 Cần Thơ, 12/2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NƠNG NGHIỆP LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan luận văn “Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa” cơng trình nghiên cứu thân tham gia thực dƣới hƣớng dẫn PGS TS Lê Minh Tƣờng Các kết trình bày luận văn tốt nghiệp trung thực đảm bảo độ tin cậy Cần Thơ, ngày tháng năm 2018 Ngƣời cam đoan Lê Quang Toàn i TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP XÁC NHẬN Kính gởi: Bộ mơn Bảo vệ Thực vật - Cán hƣớng dẫn: PGS TS Lê Minh Tƣờng - Cơ quan công tác: Khoa Nông Nghiệp - Xác nhận: đọc, đồng ý chịu trách nhiệm nội dung cho phép sinh viên Lê Quang Toàn, MSSV: B1504936, Lớp: NN1573A1 trình bảo vệ luận văn “Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa” tốt nghiệp kỹ sƣ ngành Bảo vệ Thực vật Cần thơ, ngày …… tháng …… Năm 2018 Cán hƣớng dẫn PGS TS Lê Minh Tƣờng ii TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP LÝ LỊCH CÁ NHÂN I LÝ LỊCH SƠ LƢỢC - Họ tên: LÊ QUANG TOÀN - Ngày tháng năm sinh: 20/05/1997 - Giới tính: Nam - Dân tộc: Kinh - Quê quán: số nhà 415, đƣờng Nguyễn Tri Phƣơng, khóm Long Thạnh B, phƣờng Long Thạnh, thị xã Tân Châu, tỉnh An Giang - Họ tên cha: Lê Quang Thanh - Họ tên mẹ: La Thị Lệ Nga II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP - Từ 2003 đến 2008: Học sinh tiểu học Trƣờng tiểu học Long Thạnh B - Từ 2008 đến 2012: Học sinh trung học sở Trƣờng THCS Long Thạnh - Từ 2012 đến 2015: Học sinh trung học phổ thông Trƣờng THPT Tân Châu - Từ 2015 đến 2019: Sinh viên trƣờng Đại học Cần Thơ Cần Thơ, ngày tháng năm 2018 Ngƣời khai Lê Quang Tồn iii LỜI CẢM TẠ Kính dâng Cha Mẹ ngƣời ln hi sinh nghiệp tƣơng lai Con ghi nhớ công ơn sinh thành, dƣỡng dục nên ngƣời, động lực giúp vƣợt qua khó khăn để đạt đƣợc kết nhƣ ngày hôm Chân thành ghi ơn sâu sắc đến: Thầy Lê Minh Tƣờng tận tình hƣớng dẫn, bảo, động viên em suốt trình thực luận văn tốt nghiệp Thầy Trần Vũ Phến cố vấn học tập Thầy giúp em nhiều suốt thời gian học tập trƣờng Đại học Cần Thơ Các thầy cô mơn Bảo Vệ Thực Vật nói riêng thầy trƣờng Đại học Cần Thơ nói chung dạy dỗ truyền đạt kiến thức cho em Chân thành biết ơn anh Nguyễn Hồng Q tận tình giúp đỡ truyền đạt kinh nghiệm quý báo trình thực thí nghiệm Thành thật cảm ơn bạn sinh viên lớp Bảo Vệ Thực Vật khóa 41 anh chị khóa trƣớc giúp đỡ tơi thời gian thực đề tài Trân Trọng! Gửi lời cảm ơn sâu sắc Lê Quang Toàn iv Lê Quang Toàn (2018) “Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa” Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ chuyên nghành Bảo vệ Thực vật, Khoa Nông Nghiệp, Trƣờng Đại học Cần Thơ Cán hƣớng dẫn: PGS TS Lê Minh Tường TÓM LƢỢC Đề tài “Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm Trichoconis padwicki gây bệnh lem lép hạt lúa điều kiện phòng thí nghiệm” thực phịng thí nghiệm Bệnh môn Bảo vệ Thực vật, khoa Nông Nghiệp, trường Đại học Cần Thơ từ tháng 05/2018 đến tháng 10/2018 nhằm đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng với nấm Trichoconis padwickii Đề tài gồm thí nghiệm: Thí nghiệm 1: Đánh giá khả ức chế mọc mầm bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng (CT4.8, TG2.1 ĐT 3.4) thực phịng thí nghiệm với lần lặp lại Kết cho thấy huyền phù chủng xạ khuẩn có khả ức chế mọc mầm bào tử nấm Trichoconis padwickii Trong đó, chủng CT4.8 ĐT3.4 có khả ức chế mọc mầm cao với tỷ lệ mọc mầm 41,59% 39,26% tỉ lệ mọc mầm nghiệm thức đối chứng 69,00% thời điểm 24 sau xử lí Thí nghiệm 2: Đánh giá khả giết chết bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ triển vọng điều kiện phịng thí nghiệm với lần lặp lại Kết cho thấy, chủng CT4.8, TG2.1 ĐT3.4 có khả giết chết bào tử nấm Trichoconis padwickii Trong đó, chủng CT4.8 cho khả giết chết bào tử nấm cao với log mật số bào tử sống 4,46 thời điểm 24 khác biệt so với đối chứng với log mật số bào tử nấm sống 5,48 Đặc biệt, chủng xạ khuẩn CT4.8 cho khả giết bào tử nấm cao kéo dài đến 24 sau thí nghiệm Thí nghiệm 3: Khảo sát khả ức chế phát triển khuẩn ty nấm Trichoconis padwickii môi trường thạch dịch trích chủng xạ khuẩn điều kiện phịng thí nghiệm với lần lặp lại Dịch trích chủng xạ khuẩn (CT4.8, TG2.1 ĐT3.4) có khả ức chế phát triển khuẩn ty nấm kéo dài đến 12 ngày sau bố trí Ở thời điểm 12 ngày sau bố trí, chủng xạ khuẩn CT4.8 cho khả ức chế cao với đường kính tản nấm 53,76 mm Kế đến, chủng ĐT3.4 cho hiệu ức chế cao với đường kính tản nấm 67,13 mm thấp khác biệt so với đối chứng (với đường kính tản nấm 89,44 mm) Thí nghiệm 4: Khảo sát khả ức chế phát triển sinh khối nấm Trichoconis padwickii môi trường PDB dịch trích chủng xạ khuẩn triển vọng điều kiện phịng thí nghiệm với lần lặp lại Dịch trích chủng xạ khuẩn cho khả ức chế hình thành sinh khối nấm Nghiệm thức CT4.8 v cho hiệu ức chế cao với trọng lượng sinh khối nấm 202,30 mg, đối chứng với trọng lượng sinh khối nấm 465,83 mg Từ khóa: Bệnh lem lép hạt, dịch trích, Trichoconis padwickii , xạ khuẩn, ức chế mọc mầm vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i XÁC NHẬN ii LÝ LỊCH CÁ NHÂN iii LỜI CẢM TẠ iv TÓM LƢỢC v MỤC LỤC vii DANH SÁCH BẢNG ix DANH SÁCH HÌNH x CHƢƠNG GIỚI THIỆU CHƢƠNG LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 SƠ LƢỢC VỀ BỆNH LEM LÉP HẠT 2.1.1 Định nghĩa 2.1.2 Triệu chứng 2.1.3 Thiệt hại bệnh 2.1.4 Một số tác nhân gây lem lép hạt lúa 2.2 BỆNH LEM LÉP HẠT TRÊN LÚA DO NẤM Trichoconis padwickii 2.2.1 Triệu trứng 2.2.2 Phân bố 2.2.3 Tác Nhân 2.2.4 Đặc điểm lây lan lƣu tồn bệnh 2.2.5 Biện pháp phòng trị 2.3 XẠ KHUẨN 2.3.1 Giới thiệu chung 2.3.2 Sự phân bố xạ khuẩn tự nhiên 2.3.3 Vai trò xạ khuẩn phòng trừ sinh học bệnh 2.3.4 Ứng dụng xạ khuẩn phòng trừ sinh học bệnh 10 CHƢƠNG PHƢƠNG TIỆN – PHƢƠNG PHÁP 13 3.1 PHƢƠNG TIỆN 13 3.1.1 Thời gian địa điểm 13 3.1.2 Vật liệu 13 vii 3.2 PHƢƠNG PHÁP 16 3.2.2 Thí nghiệm 1: Khảo sát khả ức chế mọc mầm bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng 16 3.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát khả giết chết bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng 17 3.2.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hƣởng dịch trích xạ khuẩn nồng độ 20% phát triển khuẩn ty nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng mơi trƣờng thạch 18 3.2.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát khả ức chế hình thành sinh khối nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng môi trƣờng lỏng 19 3.2.5 Xử lý số liệu 20 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 4.1 KHẢ NĂNG ỨC CHẾ SỰ MỌC MẦM BÀO TỬ NẤM Trichoconis padwickii CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN TRIỂN VỌNG 21 4.2 KHẢ NĂNG GIẾT CHẾT BÀO TỬ NẤM Trichoconis padwickii CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN TRIỂN VỌNG 23 4.3 ẢNH HƢỞNG CỦA 20% DỊNH TRÍCH XẠ KHUẨN CHỨA TRONG MÔI TRƢỜNG THẠCH ĐỐI VỚI SỰ PHÁT TRIỂN KHUẨN TY NẤM Trichoconis padwickii 25 4.4 ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH TRÍCH XẠ KHUẨN CHỨA TRONG MƠI TRƢỜNG PDB ĐỐI VỚI SỰ PHÁT TRIỂN SINH KHỐI NẤM Trichoconis padwickii 29 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 5.1 KẾT LUẬN 32 5.2 ĐỀ NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM THẢO 33 PHỤ CHƢƠNG viii nghiệm thức TG2.1 với trọng lƣợng sinh khối nấm 45,30 mg nghiệm thức ĐT3.4 72,53 mg khác biệt ý nghĩa mức 1% so với đối chứng Tại thời điểm NSBT, chủng xạ khuẩn cho hiệu cao KNƢC phát triển sinh khối nấm Trong đó, nghiệm thức xử lý xạ khuẩn CT4.8 cho hiệu cao với trọng lƣợng sinh khối nấm 90,33 mg, khác biệt ý nghĩa mức 1% so với đối chứng (356,50 mg) Còn nghiệm thức cịn lại TG2.1 ĐT3.4 có trọng lƣợng sinh khối nấm lần lƣợt 220,63 mg 251,98 mg không khác biệt ý nghĩa với nhƣng khác biệt ý nghĩa mức 1% so với đối chứng Bảng 4.4 Khả ức chế hình thành sinh khối nấm Trichoconis padwickiii dịch trích chủng xạ khuẩn triển vọng STT Nghiệm Thức CT4.8 TG2.1 ĐT3.4 ĐC Mức ý nghĩa CV (%) Trọng lƣợng sinh khối nấm (mg) qua thời điểm khảo sát NSBT NSBT NSBT 21,93 d 45,30 c 72,53 b 169,30a ** 10,91 90,33 c 220,63 b 251,98 b 356,50a ** 6,41 202,30 d 309,23 c 360,28 b 465,83a ** 4,09 Ghi chú: giá trị cột theo sau hay nhiều chữ giống khơng khác biệt mức ý nghĩa 1% qua phép thử Duncan **: Khác biệt mức ý nghĩa 1% Tƣơng tự thời điểm NSBT, dịch trích chủng xạ khuẩn cho hiệu cao với trọng lƣợng sinh khối nấm dao động khoảng 202,30 đến 360,28 mg khác biệt ý nghĩa mức 1% so với đối chứng (465,83 mg) Trong đó, nghiệm thức CT4.8 tiếp tục cho hiệu ức chế cao với trọng lƣợng sinh khối nấm 202,30 mg khác biệt ý nghĩa so với nghiệm thức lại Từ kết bảng 4.4 cho thấy dịch trích chủng xạ khuẩn CT4.8, TG2.1 ĐT3.4 có hiệu ức chế đến phát triến sinh khối nấm T padwickii mơi trƣờng ni lỏng (PDB) Trong đó, nghiệm thức xử lý xạ khuẩn CT4.8 cho hiệu cao từ thời điểm NSBT kéo dài đến NSBT Sở dĩ dịch trích xạ khuẩn có khả ức chế phát triển sinh khối nấm bệnh xạ khuẩn tiết số chất kháng sinh để ức chế phát triển nấm bệnh nhƣ: streptomycin, kanamycin, neomycin, phosphomycin thienamycin (Manteca and Sanchez, 2010) Thực theo nghiên cứu 30 Beer et al (1984), Streptomyces sp tiết số chất kháng sinh chất kiểm soát sinh học tác động đến phân hủy vách tế bào sợi nấm Bên cạnh đó, theo nghiên cứu Nguyen et al (2012) sử dụng dịch trích thơ xạ khuẩn Streptomyces griseus mơi trƣờng PDB có ni cấy nấm Phytophthora capsici Sau xử lí, nghiệm thức khơng có dịch trích xạ khuẩn quan sát dƣới kính hiển vi thấy sợi nấm P casici phát triển bình thƣờng, ngƣợc lại xử lí dịch trích thơ xạ khuẩn với nồng độ 500 ppm phát sợi nấm P capsici bị biến dạng, hoại tử sinh khối Ngoài khả tiết kháng sinh, xạ khuẩn tiết enzyme ngoại bào góp phần ức chế mầm bệnh nhƣ trƣờng hợp Streptomyces sp sản xuất hợp chất chitinase β-1,3-glucanase phân hủy vách tế bào nấm, nhƣ thành tế bào Fusarium oxyporum, Sclerotinia minor (Keikha et al., 2015); Streptomyces nigellus NRC 10 có khả tiết enzyme β-1,3- glucanase β-1,4- glucanase ức chế phát triển sợi nấm Pythium ultimum gây hại cà chua (Helmy et al., 2010) Có thể q trình ni lắc để thu dịch trích chủng xạ khuẩn CT4.8, TG2.1 ĐT3.4, ba chủng tiết nhiều hợp chất có tính chất kháng nấm, từ đƣợc xử lý vào mơi trƣờng PDB có ni nấm T padwickii, chúng gây tổn hại ức chế phát triển sợi nấm làm hạn chế hình thành sinh khối nấm Nhƣ vậy, ngồi việc dịch trích chủng xạ khuẩn CT4.8, TG2.1 ĐT3.4 (ở nồng độ dịch trích 20%) có khả ức chế phát triển mơi trƣờng thạch nấm T padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chúng cịn có khả ức chế phát triển sinh khối nấm môi trƣờng lỏng (PDB) 31 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Hai chủng xạ khuẩn CT4.8 ĐT3.4 thể khả ức chế mọc mầm bào tử nấm Trichoconis padwickii cao với tỷ lệ mọc mầm lần lƣợt 41,59% 39,26% thời điểm 24 sau xử lý Chủng xạ khuẩn CT4.8 cho khả giết chết bào tử nấm cao với log mật số bào tử sống 4,46 thời điểm 24 sau xử lý Dịch trích chủng xạ khuẩn CT4.8 cho khả ức chế khuẩn ty nấm cao mơi trƣờng thạch với đƣờng kính tản nấm 53,76 mm thời điểm 12 ngày sau bố trí Dịch trích chủng xạ khuẩn CT4.8 ức chế nấm Trichoconis padwickii hiệu thời điểm NSBT với trọng lƣợng sinh khối nấm 21,93 mg 5.2 ĐỀ NGHỊ Khảo sát khả quản lí bệnh lem lép hạt lúa nấm Trichoconis padwickii chủng xạ khuẩn CT4.8 ĐT3.4 điều kiện nhà lƣới 32 TÀI LIỆU THAM THẢO Agarwal, P C., S B Mathur and C N Mortensen, 1989 Seedborne disease and seed health testing of rice Danish Goverment Institute of Seed Pathology for Development Countries, Denmark CBA International Mycological Institute (CMI), 104 pp Al-Askar, A A., W M Abdul Khair and Y M Rashad, 2011 In vitro antifungal activity of Streptomyces spororaveus RDS28 against some phytopathogenic fungi African Journal of Agricultural Research (12): 2835 – 2842 Aluko, M O., 1998 The Plant quarantine system for rice in Negeria Rice seed health IRRI 91 – 99 pp Apichaisataienchote, B., V Korpraditskul, S Fotso and H Laatsch, 2006 Aerugine, an Antibiotic from Streptomyces fradiae Strain SU-1 Kasetsart J (Nat Sci.) 40: 335 – 340 Backman, P A., M Wilson and J F Murphy, 1997 Bacteria for biological control of plant disease In: Rechcigl N A and J E Rechecigl (eds), environmentally safe approaches to crop diseaes control Lewis Publishers, Baco Raton, Floria, 95 – 109 Beer, S V., J R Rundle and J L Norelli, 1984 Recent progress in the development of biological control of fire blightda review Acta Hortic 151: 195 – 201 Boukaew, S and P Prasertsan, 2014 Suppression of rices heath blight disease using a heat stable culture filtrate from Streptomyces philanthi RM – – 138 Crop Protection 61: – 10 Bùi Thị Hà, 2008 Nghiên cứu xạ khuẩn thuộc chi streptomyces sinh chất kháng sinh chống nấm gây bệnh chè Thái Nguyên Luận văn thạc sĩ sinh học Trường đại học sư phạm Thái Nguyên 67 trang Bùi Tuyết Nhi, 2018 Khảo sát đặc điểm hình thái, khả gây hại chủng nấm Pithomyces spp gây bệnh lem lép hạt lúa bƣớc đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ Thực vật Bộ môn Bảo vệ Thực vật Khoa Nông nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Cao, L., Q Zhiqi, Y Jianlan, T Hongming and Z Shining, 2005 Isolation and characterization of endophytic Streptomyces antogonist of Fusarium wilt pathogen from surface – Sterilized banana roots Federation of 33 European Microbiological Societies Microbiology Letters 247: 147 – 152 Copping, L G and S O Duke, 2007 Natural products that have been used commercially as crop protection agents Pest Manag Sci 63: 524 – 554 Danaei, M., A Baghizadeh, S Porseiedi, J Amini and M M Yaghoobi, 2013 Effect of volatile substances of Streptomyces coelicolor on control of Botrytis cinerea and Penicillium chrysogenum Caspian Journal of Applied Sciences Research (11): 45 – 51 Dewi Hastuti, R., Y Lestari, A Suwanto and R Saraswati, 2012 Endophytic Streptomyces spp as biocontrol agents of rice bacterial leaf blight pathogen (Xanthomonas oryzae pv oryzae) HAYATI Journal of Biosciences 19 (4): 155 – 162 Đoàn Thị Kiều Tiên, 2012 Đánh giá khả gây hại dòng nấm Fusarium oxysporum f.sp sesami mè bƣớc đầu nghiên cứu hiều phòng trừ biện pháp hóa học sinh học Luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ Trường Đại học Cần Thơ Đỗ Thu Hà, 2004 Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống nấm phân lập từ đất Quảng Nam - Đà Nẵng Luận án Tiến sĩ sinh học Trường Đại học sư phạm Hà Nội 161 trang Đỗ Thu Hà, Hà Cẩm Thu, Phạm Thị Ngọc Dung Đặng Thị Nguyệt Sƣơng, 2010 Nghiên cứu phân bố động thái hệ vi sinh vật đất Điện Thắng Nam – Điện Bàn – Quảng Nam Tạp chí khoa học công nghệ Đại học Đà Nẵng – Số (40) Getha, K and S Vikineswary, 2002 Antagonistic effects of Streptomyces violaceusniger strain G10 on Fusarium oxysporum f.sp cubense race 4: indirect evidence for the role of antibiosis in the antagonistic process The Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 28 (6): 303 – 10 Gopalakrishman, S., S Pande, M Sharma, P Humayun, B K Kiran, D Sandeep, M S Vidya, K Deepthi and O Rupela, 2011 Evalution of actinomycete isolates obtained froom herbal vermicompost for the biological control of Fusarium wilt of chickpea Crop Protection 30: 1070 – 1078 Helmy, S M., K Zeinat, S A Mahmoud, S Moataza, M Nagwa and H Amany, 2010 Streptomyces nigellus as a biocontrol agent of tomato 34 damping – off disease caused by Pythium umtimum Electronic journal of polish agricultural universities 13(4) 11 pp Herrington, P R, J T Craig and J E Sheridan, 1987 Methyl vinyl ketone: a volatile fungistatic inhibitor from Streptomyces griseoruber Soil Biol Biochem 19 (5): 509 – 512 Hobbs, G., C M Frazer, D C J Gardner, J A Cullum and S G Oliver, 1989 Dispersed growth of Streptomyces in liquid culture Appl Microbiol Biotechnol 31: 272 – 277 Igarashi, Y., M Ogawa, Y Sato, N Saito, R Yoshida, H Kunohc, H Onaka and T Furumai, 2000 Fistupyrone, a novel inhibitor of the infection of Chinese cabbage by Alternaria brassicicola, from Streptomyces sp TPA0569 J Antibiot 53: 1117 – 1122 Jadarat, Z., A Dawagreh, Q Ababned and I Saadoun, 2008 Influence of culture conditions on cellulase production by Streptomyces sp (Strain J2) Jordan Journal of Biological Sciences 1(4): 141 - 146 Joo, G J., 2005 Purification and characterization of an extracellular chitinase from the antifungal biocontrol agent Streptomyces halstedii Biotechnology Letters 27: 1483–1486 Keikha, N., S A A Mousavi, A R Nakhaei, M H Yadegari, G H S Bonjar and S Amiri, 2015 In vitro evaluation of enzymatic and antifungal activities of soil – actinomycetes isolates and their molecular identifcation by PCR Jundishapur J Microbiol 8(5): e14874 Lê Hữu Hải, Trần Thị Thu Thủy, Phạm Văn Dƣ, Dƣơng Ngọc Thành Phạm Văn Kim, 2010 Ảnh hƣởng số biện pháp kỹ thuật đến bệnh lem lép hạt, suất chất lƣợng xay xát lúa gạo Tạp chí khoa học trường DHCT 2010 Số 16b, tr 155 – 164 Lê Minh Tƣờng Ngô Thị Kim Ngân, 2014 Phân lập đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Rhizoctonia solani Kunh gây bệnh đốm vằn lúa Tạp chí Khoa học trường Đại học Cần Thơ (4): 80 – 86 Lê Minh Tƣờng Trần Thị Thu Em, 2014 Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa Tạp chí Khoa học trường Đại học Cần Thơ 4: 120 - 126 Lê Minh Tƣờng, Đinh Hồng Thái, Lý Văn Giang Phạm Tuấn Vũ, 2016 Xạ khuẩn vài trò xạ khuẩn quản lý bệnh hại trồng Trong: 35 Lê Văn Vàng Nguyễn Thị Thu Cúc (chủ biên), Quản lí dịch hại trồng thân thiện môi trƣờng Nhà xuất Đại học Cần Thơ Trang: 203 – 217 Lê Tuấn Anh, 2016 Khảo sát số đặc tính chủng xạ khuẩn có triển vọng quản lý bệnh cháy lúa nấm Pyricularia oryzae gây Luận văn tốt nghiệp đại học Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Lê Thị Bích, 2011 Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn nấm Fusarium oxysporum f.sp niveum điều kiện phịng thí nghiệm Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ Thực vật Bộ môn Bảo vệ Thực vật Khoa Nông nghiệp Và Sinh học Ứng dụng Trường Đại Học Cần Thơ Lê Thị Quỳnh Nhƣ, 2018 Khảo sát đặc điểm hình thái, khả gây hại chủng nấm Curvularia spp gây bệnh lem lép hạt lúa bƣớc đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ Thực vật Bộ môn Bảo vệ Thực vật Khoa Nông nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Li, J., W Liu, L Luo, D Dong, T Liu, T Zhang, C Lu, D Liu, D Zhang and H Wu, 2015 Expression of Paenibacillus polymyxa β-1,3, 1,4glucanase in Streptomyces lydicus A01 improves its biocontrol effect against Botrytis cinerea Biological Control 90: 141 – 147 Li, Q., P Ning, L Zheng, J Huang, G Li and T Hsiang, 2010 Fumigant activity of volatiles of Streptomyces globisporus JK-1 against Penicillium italicum on Citrus microcarpa Postharvest Biology and Technology 58: 157 – 165 Li, Q., Y Jiang, P Ning, L Zheng, J Huang, G Li, D Jiang and T Hsiang, 2011 Suppression of Magnaporthe oryzae by culture filtrates of Streptomyces globisporus JK-1 Biological Control 58: 139 – 148 Lu C G., W C Liu, J Y Qiu, H M Wang, T Liu and D W Liu, 2008 Identification of an antifungal metabolite produced by a potential biocontrol actinomyces strain A01 Brazilian Journal of Microbiology 39: 701 – 707 Manteca, A and J Sanchez, 2010 Streptomyces developmental cycle and secondary metabolite production Applied Microbiology and Microbial Biotechnology Pages: 560 – 566 Mew, T W and J K Mirsa, 1994 A manual of rice seed health testing IRRI Philippines 113 pp 36 Mew, T W and P Gonzales, 2002 A handbook of rice seedborne fungi IRRI 83 pp Mueller, K E., 1983 Field problems of tropical rice IRRI 178 pp Nguyen, X H., K W Naing, Y S Lee, H Tindwa, G H Lee, B K Jeong, H M Ro, S J Kim, W J Jung and K Y Kim, 2012 Biocontrol potential of Streptomyces griseus H7602 against root rot disease (Phytophthora capsici) in Pepper Plant Pathol J 28(3): 282 - 289 Nguyễn Đức Cƣơng, 1998 Bệnh lem lép hạt lúa hiệu phòng trừ vài loại thuốc hóa học, Luận văn tốt nghiệp Đại học, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng Trường Đại Học Cần Thơ Nguyễn Hồng Quí Lê Minh Tƣờng, 2018 Khả đối kháng xạ khuẩn nấm Colletotrichum sp gây bệnh thán thƣ có múi đồng sơng Cửu Long Tạp chí Nông nghiệp phát triển Nông thôn Chuyên đề: Phát triển nông nghiệp bền vững tác động biến đổi khí hậu: Thách thức hội tháng 8/2018 Trang: 50 – 59 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến Phạm Văn Ty, 2002 Vi sinh vật học Nhà xuất giáo dục Hà Nội, 41 trang Nguyễn Ngọc Đệ, 2008 Giáo trình lúa Trường Đại học Cần Thơ 244 trang Nguyễn Thị Phong Lan, Võ Thị Thu Ngân, Trần Phƣớc Lộc Trần Hà Anh, 2015 Tuyển chọn chủng xạ khuẩn (Streptomyces spp.) đối kháng nấm Pyricularia grisea gây bệnh đạo ơn hại lúa Tạp chí Khoa học Phát triển 13(8): 1441 – 1451 Nguyễn Trọng Nghĩa, 2017 Đánh giá khả gây hại chủng nấm Bipolaris oryzae gây bệnh đốm nâu lúa bƣớc đẩu nghiên cứu biện pháp phòng trị Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp & SHƢD Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Tý, 2018 Đánh giá khả gây hại chủng nấm Fusarium moniliforme gây bệnh lúa von bƣớc đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị xạ khuẩn Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ Thực vật Bộ môn Bảo vệ Thực vật Khoa Nông nghiệp Trường Đại Học Cần Thơ Nguyễn Văn Lực, 2013 Xác định thành phần nấm gây hại hạt số giống lúa tỉnh Sóc Trăng đánh giá hiệu số loại thuốc 37 hóa học điều kiện nhà lƣới Luận văn tốt nghiệp cao học, ngành Bảo vệ Thực vật Trường Đại học Cần Thơ Ou, S H., 1985 Rice Diseases 2nd ed Commonwealth Mycological Institude, Kew, UK Palaniyandi, S A., S H Yang, L Zhang and J W Suh, 2013 Effects of actinobacteria on plant disease suppression and growth promotion Applied Microbiology and Biotechnology 97: 9621 – 9636 Patwick, G W., 1950 Manual of rice diseases [Kew: CMI] 198 pp Prapagdee, B., C Kuekulvong and S Mongkolsuk, 2008 Antifungal potential of extracellular metabolites produced by Streptomyces hygroscopicus against Phytopathogenic Fungi Int J Biol Sci 4: 330 – 337 Phạm Hoàng Vũ, 2017 Khảo sát số chế đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn lúa Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo vệ thực vật Khoa Nông nghiệp & SHƢD Trường Đại học Cần Thơ Phạm Văn Kim, 2000a Các nguyên lý bệnh hại trồng Giáo trình giảng dạy Khoa Nông nghiệp & SHƢD Đại học Cần Thơ 185 trang Phạm Văn Kim, 2000b Vi sinh vật đại cƣơng Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trường Đại học Cần Thơ Phạm Văn Kim, 2006 Phòng trị sinh học bệnh trồng Khoa nông nghiệp Sinh học ứng dụng Trường đại học Cần Thơ 185 trang Phạm Văn Kim, 2016 Các bệnh hại lúa quan trọng Đồng sông Cửu Long Nhà xuất Nông Nghiệp 126 trang Phan Thị Phƣơng Hoa, Dƣơng Văn Hợp, Nguyễn Thị Vân, Nguyễn Hồng Anh, Nguyễn Thị Anh Đào, Nguyễn Thị Kim Quy Nguyễn Huỳnh Minh Quyên, 2011 Nghiên cứu kích thích xạ khuẩn sinh kháng sinh diệt vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh bạc lúa Việt Nam Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học, Đại học Quốc gia Hà Nội Hà Nội Trang: 1127 – 1134 Reissig, W H., E A Heinrichs, J A Litsinger, K Moody, L Fiedler, T W Mew and T Barrion, 1986 Illustrated guide to integrated pest management in rice in tropical asia International Rice Research Institute IRRI 408 pp 38 Shahin, E A and J F Shepard, 1979 An efficient technique for inducing profuse sporulation of Alternaria species Phytopathology 69: 618 – 620 Sharmar, M., P Dangi, and M Choudhary, 2014 Actinomycetes: source, identification, and their applications International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences 3(2): 801 – 832 Shimizu, M., S Yazawa and U Yusuke, 2009 A strain of endophytic Streptomyces sp for biologycal cotrol of cucumber anthracnose J Gen Plant Pathol 75: 27 – 36 Shurtleff, M C and C W Averre III, 1997 The plant disease clinic and field diagnosis of abiotic disease APS press The American Phytopathological Soceity St Paul, Minnesata 245 pp Sigee, D C., 1993 Bacterial plant pathology: cell and molecular aspects Published by the press syndicate of the university of Cambridge United Kingdom 325 pp Silvia, D S and T T Mika, 2008 Friends and foes: Streptomyces as modulalators of plant disease and symbiosis Atonie van Leeuwenhoek 94: 11 – 19 Tian, X L., L X Cao, H M Tan, Q G Zeng, Y Y Jia, W Q Han, and S N Zhou., 2004 Study on the communities of endophytic fungi and endophytic Actinomycetes from rice and their antipathogenic activities in vitro World Journal of Microbiology and Biotechnology 20(3): 303 – 309 Trần Thị Phƣơng Nhã, 2009 Nghiên cứu thành phần bệnh nấm hại hạt giống lúa nhập nội năm 2008 2009 Hải Phòng biện pháp quản lý hạt giống phòng trừ bệnh Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội 80 trang Trần Thị Thu Thủy, 2005 Bài giảng Bệnh Truyền Qua Hạt Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Trần Thị Thu Thủy, 2011 Xác định nấm gây bệnh lem lép hạt lúa Đồng sông Cửu Long Tạp chí khoa học trường ĐHCT 2011 Số 17a: 155 - 163 Trần Văn Hai, 1999 Kết nghiên cứu bệnh lem lép hạt lúa hiệu phòng trừ số loại thuốc hóa học 1995 – 1997 Báo cáo khoa học 39 đề tài cấp Khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng Trường đại học Cần Thơ 87 trang Trejo-Estrada, S R., A Paszczynski and D L Crawford, 1998 Antibiotics and enzymes produced by the biocontrol agent Streptomyces violaceusniger YCED-9 Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 21: 81 – 90 Umezawa, H., Y Okami, T Hashimoto, Y Suhara, M Mamada and T Takeuchi, 1965 A new antibiotic, kasugamycin J Antibiot Ser A 18: 101 – 103 Valois D., K Fayad, T Barasubiye, M Garon, C Déry, R Brzezinski and C Beaulieu, 1996 Glucanolytic actinomycetes antagonistic to Phytophthora fragariae var rubi, the causal agent of raspberry root rot Applied and Environmental Microbiology 62(5): 1630 – 1635 Viện Quy hoạch Thiết kế Nông nghiệp, 2014 Quy hoạch chuyển đổi cấu trồng đất trồng lúa giai đoạn 2014 – 2020 Võ Thanh Hoàng, 1993 Giáo trình bệnh chuyên khoa Phần bệnh lƣơng thực thực phẩm Bộ môn Bảo vệ Thực vật Khoa Nông nghiệp & SHƢD Trường Đại học Cần Thơ 282 trang Võ Thị Mỹ Kim, 2016 Khảo sát khả gây hại chủng nấm Pyricularia oryzae gây bệnh cháy lúa vùng đất bƣớc đầu nghiên cứu biện pháp phòng trị Luận văn tốt nghiệp Đại học Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng Trường Đại học Cần Thơ Vũ Triệu Mân Lê Lƣơng Tề, 1998 Giáo trình bệnh nơng nghiệp Trƣờng đại học Nông Nghiệp I Hà Nội Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội 294 trang Waksman, S A., 1961 The actinomycetes classification, identification and descriptions of garena and species Vol The Willians & Wilkink Co., Baltimore USA 363 pp Walter, M Y and D L Crawford, 1995 Characterization of Streptomyces lydicus WYEC108 as a potential biocontrol agent against fungal root and seed rots Appl Environ Microbiol 61: 3119 – 3128 40 PHỤ CHƢƠNG Phụ bảng 1: Bảng ANOVA tỷ lệ bào tử mọc mầm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 14,10% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 913,993 177,273 1091,267 Trung bình bình phƣơng 304,664 14,773 Ftính Giá trị P 20,623 0,0000 Phụ bảng 2: Bảng ANOVA tỷ lệ bào tử mọc mầm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 12,79% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 1085,584 227,640 1313,224 Trung bình bình phƣơng 361,861 18,970 Ftính Giá trị P 19,075 0,0001 Phụ bảng 3: Bảng ANOVA tỷ lệ bào tử mọc mầm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 12 GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 9,43% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 345,375 197,914 543,288 Trung bình bình phƣơng 115,125 16,493 Ftính 6,980 Giá trị P 0,0057 Phụ bảng 4: Bảng ANOVA tỷ lệ bào tử mọc mầm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 24 GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 7,05% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 752,607 122,010 874,617 Trung bình bình phƣơng 250,869 10.168 Ftính Giá trị P 24,674 0,0000 Phụ bảng 5: Bảng ANOVA log mật số bào tử sống nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 0,8% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 0,158 0,022 0,180 Trung bình bình phƣơng 0,053 0,002 Ftính Giá trị P 28,573 0,0000 Phụ bảng 6: Bảng ANOVA log mật số bào tử sống nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 0,62% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 0,237 0,013 0,250 Trung bình bình phƣơng 0,079 0,001 Ftính Giá trị P 73,251 0,0000 Phụ bảng 7: Bảng ANOVA log mật số bào tử sống nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 12 GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 0,44% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 0,686 0,006 0,692 Trung bình bình phƣơng 0,229 0,001 Ftính Giá trị P 445,933 0,0000 Phụ bảng 8: Bảng ANOVA log mật số bào tử sống nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 24 GSXL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 1,23 Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 2,195 0,044 2,239 Trung bình bình phƣơng 0,732 0,04 Ftính Giá trị P 197,593 0,0000 Phụ bảng 9: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 3,09% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 125,141 1,594 126,734 Trung bình bình phƣơng 41,714 0.133 Ftính Giá trị P 314,078 0.0000 Phụ bảng 10: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 4,04% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 562,266 10,344 572,609 Trung bình bình phƣơng 187,422 0,862 Ftính Giá trị P 217,432 0,0000 Phụ bảng 11: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 3,48% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 1083,185 19,311 1102,496 Trung bình bình phƣơng 361,062 1,609 Ftính 224,371 Giá trị P 0,0000 Phụ bảng 12: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 3,24% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 2105,293 27,766 2133,059 Trung bình bình phƣơng 701,764 2,314 Ftính Giá trị P 303,295 0,0000 Phụ bảng 13: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 10 NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 2.08% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 2840,156 18,469 2858,625 Trung bình bình phƣơng 946,719 1,539 Ftính Giá trị P 615,127 0,0000 Phụ bảng 14: Bảng ANOVA đƣờng kính tản nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm 12 NSBT Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 1,04% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 2600,703 6,406 2607,109 Trung bình bình phƣơng 866,901 0,534 Ftính Giá trị P 1623,854 0,0000 Phụ bảng 15: Bảng ANOVA trọng lƣợng sinh khối nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSNL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 10,91% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 50305,422 852,374 51157,797 Trung bình bình phƣơng 16768,474 71,031 Ftính Giá trị P 236,072 0,0000 Phụ bảng 16: Bảng ANOVA trọng lƣợng sinh khối nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSNL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 6,41% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 144328,257 2603,883 146932,141 Trung bình bình phƣơng 48109,419 216,990 Ftính 221,722 Giá trị P 0,0000 Phụ bảng 17: Bảng ANOVA trọng lƣợng sinh khối nấm Trichoconis padwickii nghiệm thức thời điểm NSNL Nguồn biến động Nghiệm Thức Sai số Tổng Cộng CV: 4,09% Độ tƣ 12 15 Tồng bình phƣơng 144104,945 2249,163 146354,108 Trung bình bình phƣơng 48034,982 187,430 Ftính Giá trị P 256,282 0,0000 ... đó, đề tài ? ?Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa? ?? đƣợc thực nhằm tìm chủng xạ khuẩn có khả đối kháng cao với nấm T padwickii thông... nghiệm 1: Khảo sát khả ức chế mọc mầm bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng Mục tiêu: Tìm chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với nấm Trichoconis padwickii. .. quan sát) *100 16 3.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát khả giết chết bào tử nấm Trichoconis padwickii gây bệnh lem lép hạt lúa chủng xạ khuẩn triển vọng Mục tiêu: Tìm chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với nấm