Hóa dược 2

z TRƯỜNG ĐẠI HỌC DUY TÂN KHOA DƯỢC  THỰC HÀNH HĨA DƯỢC Năm học: 2017-2018 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược LỜI NĨI ĐẦU Tài liệu Thực tập Hóa dược soạn thảo nhằm đáp ứng yêu cầu sau: - Nội dung thực tập phù hợp với tài liệu lý thuyết Hóa dược Y tế xuất năm 2007 - Cập nhật kiến thức theo Dược điển Việt Nam IV Dược điển thông dụng giới - Phù hợp với điều kiện trang thiết bị môn khả cung ứng hóa chất nhà trường Tài liệu gồm có thực tập, ngồi cịn có phần phụ lục giới thiệu “cách xác định giới hạn tạp chất” “cách xác định độ trong, màu sắc dung dịch” để sinh viên tiện tra cứu ứng dụng Trong thực tập, tơi trình bày phương pháp kiểm nghiệm thuốc điển hình, ngồi cịn giới thiệu cách định tính hai ba thuốc khác Các phương pháp phân tích ứng dụng kiểm nghiệm hóa dược giới thiệu cách tóm tắt để sinh viên ôn lại ứng dụng cụ thể Tài liệu " Thực tập Hóa dược 2" biên soạn dựa theo đề cương chi tiết thông qua Hội đồng khoa học khoa Dược - trường Đại học Duy Tân, sử dụng để giảng dạy cho dành cho sinh viên dược năm thứ tư hệ quy sinh viên dược năm thứ ba hệ liên thơng Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược MỤC LỤC Lời nói đầu Bài 1: Metronidazol, Quinin sulfat, Menbendazol Bài 2: Chloramphenicol, Erythromycin, Tetracyclin kháng sinh β-lactam Bài 3: Isoniazid, Streptomycin sulfat, Rifampicin Bài 4: Povidone-iodine, Nước oxy già, Nystatin, Griseofulvin Bài 5: Prednisolon acetat, Glibenclamid, Levothyroxin natri Bài 6: Viên nén Co-trimoxazol Phụ lục Tài liệu tham khảo Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Bài METRONIDAZOL, QUININ SULFAT, MEBENDAZOL Mục tiêu thực hành: Nhận thức cảm quan, thực hành phép thử định tính thuốc metronodazol, quinin sulfat mebendazol Định lượng metronidazol hai phương pháp Dụng cụ, thuốc thử - Dụng cụ: Máy đo độ chảy; Phân cực kế; Quang phổ UV-VIS; pH met - Thuốc thử: HCl M; HCl 10%; H2SO4 10%; NaNO2 0,1 M M; BaCl2 5% NaOH 10%; nước Br2; amoniac đặc; 2-naphtol; ethanol 96%; dinitrobenzen 1%; màu mẫu VL6; Dung dịch chì mẫu 10 ppm; Acid acetic khan; HClO4 0,1 M dịch chì mẫu 10 ppm; Acid acetic khan; HClO4 0,1 M I KIỂM NGHIỆM METRONIDAZOL Công thức: CH2CH2OH O2N N Me C6H9O3N3 ptl : 171,20 N Tính chất: - Bột kết tinh màu trắng vàng, vị đắng; dễ biến màu ánh sáng - Khó tan nước dung môi hữu cơ; tan acid vô lỗng Hố tính, định tính 2.1 Xác định nhiệt độ nóng chảy: F = 159 – 163oC 2.2 Phản ứng xác định nhóm nitro thơm: Nguyên tắc: Khử hóa nhóm -NO2 H sinh thành nhóm –NH2; sản phẩm tạo thành cho phản ứng đặc trưng amin thơm bậc Tiến hành: - Ống nghiệm 1: Đun nồi cách thuỷ 5-10 phút hỗn hợp gồm: 10 mg metronidazol; ml nước; 0,5 ml HCl 10% viên kẽm hạt; để nguội, lọc thu dịch lọc Thêm 1-2 giọt NaNO2 0,1 M vào dịch lọc, trộn - Ống nghiệm 2: Hoà tan khoảng 0,1 g 2-naphtol vào ml NaOH 10% Môn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Nhỏ giọt dịch ống vào ống 1: Xuất màu đỏ 2.3 Phản ứng màu Hoà 10 mg chất thử vào ml NaOH 10%, đun nhẹ: Xuất màu tím đỏ, chuyển sang màu vàng thêm HCl 10% tới pH acid Thử tinh khiết: Theo DĐVN IV 3.1 Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 1,0 g metronidazol vào vừa đủ 20 ml HCl M - Độ đục dung dịch không đục mẫu đối chiếu số II (Xem phụ lục) - Màu dung dịch không đậm màu mẫu VL6 (Xem phụ lục) 3.2 Kim loại nặng: Không 20 ppm (phụ lục 9.4.8) - Lấy 1,0 g metronidazol thử theo phương pháp (xem phụ lục) - Dùng ml dung dịch chì mẫu 10 ppm để chuẩn bị mẫu đối chiếu Định lượng 4.1 Phương pháp quang phổ UV Tiến hành: - D.d 1: Hòa tan 40 mg metronidazol HCl 0,1 M thành 100 ml - D.d 2: Pha loãng ml d.d HCl 0,1 M thành 100 ml Đo nhanh độ hấp thụ d.d bước sóng 277 nm Tính hàm lượng metronidazol C6H9O3N3 chế phẩm thử, lấy trị số hấp thụ riêng E (1%, cm) 277 nm 372 Chất chế phẩm thử phải đạt 99,0 - 101,0% (chất khô) * Chú ý: Đo quang phổ UV với metronidazol ánh sáng đỏ; lấy kết đo lần đo đầu 4.2 Phương pháp môi trường khan Tiến hành: Hòa tan khoảng 0,15 g metronidazol vào 50 ml acid acetic khan Chuẩn độ dung dịch HClO4 0,1 M; thị đo điện ml dung dịch HClO4 0,1 M tương đương 17,12 mg chất C6H9O3N3 II NHẬN THỨC, ĐỊNH TÍNH QUININ SULFAT, MEBENDAZOL QUININ SULFAT Công thức: (C20H24N2O2)2 H2SO4 , 2H2O ptl : 783,0 1.1 Tính chất Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược - Bột kết tinh màu trắng đục, vị đắng; biến màu chậm để ánh sáng - Tan nước nguội; tan ethanol [α]D20 = từ - 237o đến - 245o (2% / HCl 0,1 M) 1.2 Định tính 1.2.1 Các phản ứng chung alcaloid Cinchona a Phản ứng Thaleoquinin Tiến hành: Hoà mg chất thử vào ml nước Tẩm vài giọt dịch thu lên tờ giấy lọc Đặt vết tẩm ướt lên miệng lọ nước Br2 đến màu vàng nhạt; đặt vết lên miệng lọ amoniac đặc: Màu đỏ chuyển dần sang xanh lục b Phát huỳnh quang: - Pha dung dịch quinin sulfat 2% - Thêm 1ml H2SO4 10% vào dung dịch quinin sulfat 2%, trộn đều; đặt ống nghiệm đèn UV 365: Huỳnh quang xanh lơ 1.2.2 Xác định góc quay cực riêng Hịa tan khoảng 0,500 g quinin sulfat vào HCl 0,1 M thành 250 ml Đo góc quay cực dung dịch phân cực kế Xác định góc quay cực riêng [α]D20 quy nồng độ dung dịch theo chế phẩm khan, theo công thức: [α]D20 = α / C l α = góc quay cực đo C = nồng độ (%) dung dịch quinin sulfat vừa pha đo l = Độ dài ống đo (dm) Trị số [α]D20 nằm khoảng từ - 237o đến - 245o 1.2.3 Phản ứng ion sulfat SO42Trong ống nghiệm hòa tan khoảng 45 mg quinin sulfat vào ml HCl 10% Thêm 2-3 giọt BaCl2 5%: Xuất tủa BaSO4 màu trắng MEBENDAZOL Công thức: NH C16H13N3O3 ptl : 295,3 N NH COO Me O 2.1 Tính chất - Bột kết tinh màu trắng vàng nâu, nhẹ xốp, không mùi - Khó tan nước, ethanol, ether; tan nhẹ acid acetic đặc Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược - Rất tan aceton, chloroform - Tan acid formic hỗn hợp acid formic isopropanol 2.2 Định tính Phản ứng màu: Trộn 10 mg mebendazol với ml ethanol 96%, thêm ml dung dịch dinitrobenzen 1% ethanol 96% ml dung dịch NaOH M, trộn đều: Xuất màu vàng đậm Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Bài CHLORAMPHENICOL, ERYTHROMYCIN TETRACYCLIN VÀ KHÁNG SINH β-LACTAM Mục tiêu thực hành: Chloramphenicol: Nhận vị đắng; thực phản ứng định tính Pha dung dịch nước định lượng quang phổ UV Nhận biết cảm quan thử định tính:Erythromycin, tetracyclin; phản ứng màu phân biệt kháng sinh β-lactam Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Đèn UV 254 365 nm; Quang phổ UV-VIS; Bình định mức 500 ml; Khay sứ nhiều lỗ; Nồi cách thủy - Thuốc thử: H2SO4 98% 15%; HCl đặc 18% (1/2); HNO3 10%; Acid acetic 1%; NaOH 10% M; NaNO2 0,1 M; AgNO3 5%; CuSO4 5%; Kẽm hạt; 2-naphtol; Bản silicagel GF254; chloroform; methanol; aceton; formol I KIỂM NGHIỆM CHLORAMPHENICOL Công thức: C11H12O5N2Cl2 H NH CO CHCl2 O2N ptl : 323,13 C C CH2OH OH H Tính chất - Bột kết tinh màu trắng trắng ánh vàng, vị đắng - Độ tan: Tan nước; tan aceton, ethanol, ethylacetat - Nhiệt độ chảy 149-153oC [α]D20 = từ +18,5o đến +20,5o (ethanol) Định tính 2.1 Các phản ứng nitrophenyl chlor hữu Nguyên tắc: Trong dung dịch, tác dụng H sinh (dùng Zn /H+), nhóm nitro chuyển thành nhóm amin thơm bậc 1; nguyên tử chlor hữu chuyển sang dạng ion Cl- (vô cơ) Môn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược H NH CO CHCl2 O2N C C CH2OH +H H2N R + 2Cl- OH H Tiến hành: Trong ống nghiệm, phân tán 0,10 g chloramphenicol vào ml acid sulfuric 15% Thả viên kẽm hạt để sơi bọt khí, lắc, đến tan hết kẽm Lọc lấy dịch lọc để tiến hành phản ứng sau: a Phản ứng amin thơm bậc Lấy ml dịch lọc vào ống nghiệm, thêm 1- giọt NaNO2 0,1 M Thêm 0,5 ml dung dịch 2- naphtol 0,5% NaOH 10%: Xuất màu đỏ tủa đỏ b Ion Cl – Lấy 1ml dịch lọc, thêm giọt AgNO3 5%: xuất tủa màu trắng xám, tan amoniac 2.2 Phản ứng màu (Phép thử nhanh) Tiến hành: Trộn 0,10 g chất thử vào ml NaOH 10%; đun hỗn hợp: từ từ xuất màu vàng, đậm dần thành đỏ cam, đỏ 2.3 Sắc ký lớp mỏng - Pha tĩnh: Silicagel GF254 - Pha động: Chloroform - Methanol- Nước (90 : 10 : 1) - Dung dịch thử: 50 mg chloramphenicol thử 10 ml aceton - Dung dịch đối chiếu: 50 mg chloramphenicol chuẩn 10 ml aceton Chấm riêng biệt dung dịch thử đối chiếu lên sắc ký + Vết 1: µl dung dịch thử + Vết 2: µl dung dịch đối chiếu Triển khai sắc ký pha động đến chiều cao 15 cm; lấy mỏng ra, để khơ ngồi khơng khí kiểm tra đèn UV 254 nm - Nhận định kết quả: Vết sắc đồ vết trùng hợp với vết sắc đồ vết vị trí (Rf) màu sắc Thử tinh khiết Giới hạn clorid: DĐVN IV - Lấy 1,0 g chất thử trộn vào 20 ml nước 10 ml HNO3 10%; lắc phút; lọc qua giấy lọc (đã rửa nước tới hết tủa trắng với AgNO3 5%) - Lấy 15 ml dịch lọc làm dung dịch thử (Xem cách thử phụ lục) Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Pha dung dịch màu chuẩn: Bảng 9.3.1 DĐVN IV Bảng 9.3.1 Các dung dịch màu chuẩn D.d màu chuẩn Dung dịch gốc (ml) Màu vàng 30 Màu đỏ VN (vàng - nâu) D dịch HCl 1% 30 Màu xanh 24 16 24 10 62 V (vàng) 24 70 VL (vàng - lục) 96 2 Đ (đỏ) 10 20 70 N (nâu) Pha dung dịch màu đối chiếu: (DĐVN IV) Bảng 9.3.2 b Dung dịch màu đối chiếu VN D.d màu đối chiếu D.d màu chuẩn N (ml) D.d HCl 1% (ml) VN1 100,0 0,0 VN2 75,0 25,0 VN3 50,0 50,0 VN4 25,0 75,0 VN5 12,5 87,5 VN6 5,0 95,0 VN7 2,5 97,5 Bảng 9.3.2 c Dung dịch màu đối chiếu V D.d màu đối chiếu D.d màu chuẩn V (ml) D.d HCl 1% (ml) V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 100,0 75,0 50,0 25,0 12,5 5,0 2,5 0,0 25,0 50,0 75,0 87,5 95,0 97,5 36 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Bảng 9.3.2 d Dung dịch màu đối chiếu VL D.d màu đối chiếu VL1 VL2 VL3 VL4 VL5 VL6 VL7 D.d màu chuẩn VL (ml) 25,0 15,0 8,5 5,0 3,0 1,5 0,75 D.d HCl 1% (ml) 75,0 85,0 91,5 95,0 97,0 98,5 99,25 37 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 1) STT Hoạt chất Cimetidin Famotidin Ranitidin Nizatidin Omeprazol Esomeprazol Pantoprazol Lanzoprazol Gastropulgite 10 Sucralfat 11 Bisacodyl 12 Sorbitol BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định 38 Môn: Thực hành Hóa dược STT Hoạt chất 13 Loperamid 14 Diphenoxylat 15 Lactobacillus acidophilus 16 Oresol 17 Khoa: Dược BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Ringer lactat 18 Pancreatin 19 Pancrealipase 39 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 2) STT Hoạt chất Estradiol Ethinylestradiol Hydroxyestron Progesteron Medroxyprogesteron acetat Levonorgestrel Gestronol Mifepriston Testosteron propionat 10 Methyltestosteron 11 Fluoxymesteron 12 Cyproteron BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định 40 Mơn: Thực hành Hóa dược STT Hoạt chất 13 Cortison 14 Prednison 15 Hydrocortison 16 Prednisolon 17 Khoa: Dược BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Methylpresnisolon 18 Dexamethason 19 Triamcinolon 20 Budesonid 41 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 3) STT Hoạt chất Levothyroxin natri Liothyroxin natri Carbimazol Propylthiouraccil Glibenclamid Glipizid Repaglidin Metformin Acarbose 10 Oxytocin 11 Cloramin T 12 BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Clohexidin 42 Môn: Thực hành Hóa dược STT Hoạt chất 13 Benzalkonium clorid 14 Sulfamethoxazol 15 Sulfacetamid natri 16 Khoa: Dược BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Sulfadimerazin 17 Bạc - sulfadiazin 18 Sulfaguanidin 19 Sulfamethizol 20 Sufadoxin 43 Môn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 4) STT Hoạt chất Penicillin G natri Bezathin penicillin G Cloxacillin natri Amoxicillin trihydrat Ampicillin Cefalothin natri Cephalexin monohydrat Cefuroxim natri Cefoxitin natri 10 Cefaclor 11 Cefotaxim natri 12 BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Ceftazidim 44 Mơn: Thực hành Hóa dược STT 13 Hoạt chất BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định Cefixim 14 Streptomycin sulfat 15 Gentamycin sulfat 16 Khoa: Dược Tobramycin sulfat 17 Kanamycin 18 Neomycin sulfat 19 Tetracyclin hydroclorid 20 Doxycyclin hydrat 45 Môn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 5) STT Hoạt chất Cloramphenicol Erythromycin Azithromycin Clarithromycin Roxithromycin Lincomycin hydroclorid Rifampicin Vancomycin hydroclorid Fosfomycin natri 10 Isoniazid 11 Pyrazinamid 12 Ethambutol hydroclorid BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định 46 Môn: Thực hành Hóa dược STT Hoạt chất 13 Dapson 14 Clotrimazol 15 Ketoconazol 16 Floconazol 17 Naftifin hydroclorid 18 Amphotericin B 19 Nystatin 20 Griseofulvin Khoa: Dược BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định 47 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Họ tên : ………………………………… Lớp: ……………………………………… BẢNG BÁO CÁO HOẠT CHẤT VÀ CÁC BIỆT DƯỢC THƯỜNG GẶP (Bài thực hành số 6) STT Hoạt chất Quininsulfat Artemisinin Mebendazol Albendazol Niclosamid Praziquantel Metronidazol Zidovudin Lamivudin 10 Stavudin 11 Acyclovir 12 Oseltamivir phosphat BD nội BD ngoại Chỉ định Chống định 48 Mơn: Thực hành Hóa dược STT 13 14 Hoạt chất BD ngoại Chỉ định Chống định Melphalan Procarbazin hydroclorid 16 Cisplatin 18 BD nội Adefovir 15 17 Khoa: Dược Methotrexat Vinblastin 19 Vincristin 20 Lipiodol 49 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ mơn Hóa dược trường Đại học Dược Hà Nội (2012), Thực tập Hóa dược Bộ Y tế (2007), Hóa dược tập 2, Nhà xuất Y học Bộ mơn Hóa phân tích trường Đại học Dược Hà Nội (2003), Kiểm nghiệm thuốc Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam, lần xuất thứ tư, Nhà xuất Y học British Pharmacopoeia (1998 2000) Pharmacopoeia of the People’s Republic of China (2005) Tha United States Pharmacopoeia 24 (2000) 28 (2007) 50 ... COOH CO NH NH2 + H2O → + N H2N- NH2 H2N- NH2 N + 2Br2 → 4HBr + N2 ↑ (KBrO3 + 5KBr + 6HCl → 3Br2 + 6KCl + 3H2O) 13 Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược Tiến hành: Dung dịch S: Hoà tan 0 ,25 0 g chất... (C20H24N2O2 )2 H2SO4 , 2H2O ptl : 783,0 1.1 Tính chất Mơn: Thực hành Hóa dược Khoa: Dược - Bột kết tinh màu trắng đục, vị đắng; biến màu chậm để ánh sáng - Tan nước nguội; tan ethanol [α]D20... Zn + 2HCl AsO33- + 9H 2H + ZnCl2 AsH3 AsH3 + HgBr2 + 3H2O (AsO33- = ion arsenid) Hỗn hợp màu nâu Nếu có As5+, dùng Sn2+ (SnCl2) I- (KI) khử As3+ : AsO43- + Sn2+ AsO33- + Sn4+ AsO43- + 2I- + 2H+