ỨNG DỤNG HỆ THỐNG NGẬP CHÌM TẠM THỜI (TIS) TRONG NHÂN NHANH LAN Mokara Chao Praya Sunset

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐAI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG HỆ THỐNG NGẬP CHÌM TẠM THỜI (TIS) TRONG NHÂN NHANH LAN Mokara Chao Praya Sunset Ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã ngành : D420201 Chuyên ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực : CAO VĂN HẢI Niên khóa : 2011 - 2015 Tháng 8/2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐAI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG HỆ THỐNG NGẬP CHÌM TẠM THỜI (TIS) TRONG NHÂN NHANH LAN Mokara Chao Praya Sunset Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực NGUYỄN TRƯỜNG GIANG CAO VĂN HẢI Tháng 8/2015 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn Ban Giám đốc trung tâm Cơng nghệ Sinh học Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện để thực đề tài nghiên cứu trung tâm tài trợ toàn kinh phí, trang thiết bị máy móc hóa chất để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu Xin gửi lời cám ơn tới ThS Nguyễn Xuân Dũng Trưởng phịng Cơng nghệ Sinh học Thực vật, KS Nguyễn Trường Giang nghiên cứu viên phịng Cơng nghệ Sinh học Thực vật, Trung tâm công nghệ sinh học Tp Hồ Chí Minh, tận tình hướng dẫn giúp đỡ, truyền thụ cho nhiều kiến thức kinh nghiệm quý báu công việc sống từ giúp tơi hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp trung tâm Xin gửi lời cám ơn tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, q thầy (cơ) mơn Cơng nghệ Sinh học giúp đỡ suốt thời gian học tập trường Đặc biệt, xin gửi lời cám ơn đến thầy Nguyễn Phan Thành tận tình giúp đỡ, hướng dẫn cho nhiều lời khuyên bổ ích thời gian tơi thực đề tài thời gian học tập ghế nhà trường Xin gửi lời cám ơn đến anh (chị) nhân viên Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp Hồ Chí Minh, bạn thực đề tài nghiên cứu trung tâm hỗ trợ nhiều trình thực đề tài Cuối xin gửi lời cảm ơn đến gia đình tơi động viên khích lệ tơi nhiều thời gian qua Tp.Hồ Chí Minh, ngày 27 tháng năm 2015 Sinh viên thực Cao Văn Hải i TÓM TẮT Hiện nay, hiệu kinh tế việc trồng hoa lan cắt cành cao đồng thời nhu cầu tiêu thụ thị trường nội địa xuất lớn Tuy nhiên, nguồn cung giống trồng hạn chế với giá giống cao Cho nên việc nhân giống lan Mokara với số lượng lớn, chất lượng tốt đồng thời hạ giá thành giống trở thành vấn đề cấp thiết Bằng tiến kỹ thuật nuôi cấy mô, đặc biệt phương pháp ni cấy mơ hệ thống ngập chìm tạm thời tạo ưu lớn công tác nhân nhanh in vitro giúp rút ngắn thời gian nuôi cấy Tuy nhiên phương pháp nuôi cấy hệ thống ngập chìm tạm thời cịn Việt Nam nên chưa có nghiên cứu chuyên sâu điều kiện nuôi cấy đặc biệt giống lan Mokara Chao Praya Sunset Xuất phát từ cấp thiết đề tài “Ứng dụng hệ thống ngập chìm tạm thời (TIS) nhân nhanh lan Mokara Chao Praya Sunset” đề xuất nghiên cứu Nghiên cứu thực đối tượng lan Mokara Chao Praya Sunset với vật liệu cụm PLBs, nuôi cấy hệ thống ngập chìm tạm thời, tập trung vào tối ưu hóa điều kiện ảnh hưởng tới việc nhân nhanh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset thể tích mơi trường ni cấy, chu kỳ ngập chìm nồng độ chất điều hòa sinh trưởng sử dụng môi trường nuôi cấy Kết nghiên cứu cho thấy mơi trường MS có bổ sung mg/l BA kết hợp với 0,1 mg/l NAA, thể tích mơi trường 200 ml bình TIS, cài đặt hệ thống ngập chìm với chu kỳ ngập chìm phút giãn cách áp dụng vào nuôi cấy lan Mokara Chao Praya Sunset cho kết tạo chồi (10,84 chồi/cụm) thích hợp Đề tài thành cơng bước đầu việc xác định điều kiện môi trường thích hợp cho tái sinh chồi từ PLBs giống lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời (TIS) ii SUMMARY Currently, economic efficiency of growing orchids is very high at the same time the demand of consumption in the domestic market and exports is huge However, the supply of seeds is restricted with high price Therefore breeding Mokara orchid with large numbers, good quality and reduced the cost of seedlings has become an urgent problem With the advances of tissue culture techniques, especially temporary immersion systems has created a huge dominant for plant micropropagation and reduced the culture period However, the system is still new in Viet Nam so we don’t have intensive research on the culture conditions, especially on the Chao Praya Sunset Mokara orchids Comes from the imperative that the subject “Application temporary immersion system (TIS) for micropropagation Mokara Chao Praya Sunset orchids” has been proposed research Research projects on the object is the Mokara Chao Praya Sunset orchilds with material is PLBs, cultured on temporary immersions systems (TIS) Which focus on optimizing the main conditions affecting the shoot multiplication of Mokara Chao Praya Sunset orchilds on temporary immersion system (TIS) as volume of liquid medium, immersions cycle and concentrations of plant growth regulators used in cultivation The results of the basic cultivation conditions of Mokara Chao Praya Sunset orchilds on temporary immersion system (TIS) Showed appropriate culture medium was MS medium supplemeted with mg/l BA and 0.1 mg/l NAA Volume of the medium was 200 ml on each jar of TIS, immersions of every hours was better for shoot multiplication The number of shoot obtained from the above culture conditions was 10.8 shoots/explant This result was initial success in finding the basic cultivation conditions affecting the shoot multiplication of Mokara Chao Praya Sunset orchilds using temporary immersion system Key words: Temporary immersion system, Mokara, plant culture, … iii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii SUMMARY iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii CHƯƠNG MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu 1.3 Nội dung CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược lan Mokara 2.1.1 Phân loại học 2.1.2 Nguồn gốc 2.2 Đặc điểm thực vật học sinh thái lan Mokara 2.2.1 Nhiệt độ môi trường 2.2.2 Ẩm độ môi trường 2.2.3 Ánh sáng môi trường 2.3 Một số đặc điểm lan Mokara Chao Praya Sunset 2.4 Giá trị kinh tế lan Mokara 2.5 Môi trường dinh dưỡng 2.5.1 Nguồn carbon 2.5.2 Khoáng đa lượng 2.5.3 Khoáng vi lượng 2.5.4 Vitamin 2.5.5 Chất điều hòa sinh trưởng 2.5.6 Một số yếu tố khác ảnh hưởng tới tái sinh 2.6 Một số phương pháp nhân giống 10 iv 2.6.1 Kỹ thuật giống môi trường bán rắn 10 2.6.2 Kỹ thuật nuôi cấy lỏng 10 2.6.3 Kỹ thuật ni cấy ngập chìm tạm thời 11 2.6.4 Một số nghiên cứu nhân giống in vitro hệ thống ngập chìm tạm thời 19 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 21 3.1 Thời gian địa điểm thực 21 3.2 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 21 3.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 21 3.4 Phương pháp nghiên cứu 21 3.4.1 Điều kiện nuôi cấy tiêu theo dõi 21 3.4.2 Khảo sát ảnh hưởng thể tích mơi trường lên tái sinh chồi 22 3.4.3 Khảo sát ảnh hưởng chu kỳ ngập chìm lên tái sinh chồi 23 3.4.4 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA NAA lên tái sinh chồi 23 3.5 Xử lý số liệu tiêu theo dõi 24 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Ảnh hưởng thể tích mơi trường lên tái sinh chồi 25 4.2 Ảnh hưởng chu kỳ ngập lên tái sinh chồi 29 4.3 Ảnh hưởng nồng độ BA NAA lên tái sinh chồi 32 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 5.1 Kết luận 35 5.2 Kiến nghị 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT B1 Thiamine B6 Pyridoxine BA - benzyladenin Ctv Ctv NAA Naphthalen actic acid MS Murasige Skoog PLBs Protocol - like bodies PVP Polyvinylpyrrolidone TIS Temporary Immersion system vi DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 3.1 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng thể tích mơi trường 22 Bảng 3.2 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng thời gian ngập 23 Bảng 3.3 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nồng độ chất điều 24 Bảng 4.1 Ảnh hưởng thể tích mơi trường lên tái sinh chồi .25 Bảng 4.2 Ảnh hưởng chu kỳ ngập chìm lên tái sinh 29 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nồng độ BA NAA lên tái sinh chồi 32 vii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Lan Mokara Chao Praya Sunset ………… …………………….… …… Hình 2.2 Hệ thống ngập chìm phần chế thay mơi trường dinh dưỡng 14 Hình 2.3 Hệ thống RITA® 15 Hình 2.4 Hệ thống bình sinh đơi BIT® .16 Hình 2.5 Bình Plantima .17 Hình 2.6 Hệ thống plantima 17 Hình 4.1 Ảnh hưởng thể tích mơi trường lên tái sinh chồi .27 Hình 4.2 Chồi lan Mokara Chao Praya Sunset tái sinh từ PLBs sau tuần .28 Hình 4.3 Ảnh hưởng chu kỳ ngập chìm lên tái sinh chồi 31 Hình 4.4 Ảnh hưởng nồng độ BA NAA lên tái sinh 34 viii Hình 4.4 Ảnh hưởng nồng độ BA NAA lên tái sinh chồi a) MS; c) MS + mg/l BA + 0,1 mg/l NAA; e) MS + mg/l BA + 0,1 mg/l NAA; 34 b) MS + 0,5 mg/l BA + 0,1 mg/l NAA; d) MS + 1,5 mg/l BA + 0,1 mg/l NAA; f) MS + 2,5 mg/l BA + 0,1 mg/l NAA Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Thể tích mơi trường 200 ml thích hợp cho tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Plantima Chu kỳ ngập chìm ngập phút giãn cách thích hợp cho tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Plantima Môi trường MS bổ sung mg/l BA, 0,1 mg/l NAA thích hợp cho tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset điều kiện thể tích chu kỳ ngập chìm nêu 5.2 Kiến nghị Ứng dụng hệ thống ngập chìm tạm thời nhân nhanh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset Tiếp tục nghiên cứu khả tạo hoàn chỉnh lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Cũng nghiên cứu khả tạo PLBs, tạo chồi số giống lan có giá trị kinh tế khác như: Cattleya, Oncidium, Phalaenopsis… 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Ngơ Xn Bình - Nuôi cấy mô tế bào thực vật - Cơ sở lý luận ứng dụng Nhà xuất Khoa Học Kỹ Thuật, trang 35 - 45 Nguyễn Đức Minh Hùng, Bùi Thị Trường Thu, Trần Văn Minh 2011 Nghiên cứu nhân giống hoa lan Mokara kỹ thuật Bioreactor ngập chìm qng cách Tạp chí Nơng nghiệp & Phát triển Nông thôn 16: 22 - 26 Hà Thị Loan 2012 Triển khai quy trình nhân nhanh giống lan Mokara Renanthera Phalaenopsis phương pháp ngập chìm tạm thời Báo cáo nghiệm thu Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp Hồ Chí Minh 31 - 57 Dương Công Kiên 2003 Nuôi mô thực vật II Nhà xuất Đại học Quốc Gia Tp Hồ Chí Minh, trang 21 - 46 Tài liệu tiếng Anh Arditti & Ernst 1993 Micropropagation of Orchids JohnWley & Sons, Inc., pp: 467 - 520 Etienne H and Berthouly M 2002 Temporary immersion systems in plant micropropagation Plant Cell, Tissue and Organ Culture Kluwer Academic Publishers 69: 215 - 231 Friml J 2003 Current Opinion in Plant Biology Elsevier Publishers 6:7 - 12 George E.F , Michael A Hall and Greert-Jan De Klerk 2008 Plant Propagation by Tissue Culture 3rd Edition Springer, pp: 65, 176 Rai R 2007 Introduction to Plant Biotechnology Genetics and plant breeding Pusa Campus - 10 10 Georgiev V., Schumann A., Pavlov A., BleyEng T 2014 Focus on biotechnology Engineering in Life Sciences 14: 607 - 621 Tài liệu từ Internet 11 Tấn tài Hiền Lương 2012 Thị hiếu người tiêu dùng, nhu cầu thị trường hoa lan Mokara Dendrobium http://www.tvnn.vn/web/guest/news//journal_content/56_INSTANCE_L0zE/10157/379979 12 N.Q.Thiện 2007 Hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời http://www.hcmbiotech.com.vn/search_detail.php?id=45&srch=ng%E1%BA% ADp%20ch%C3%ACm&tblpg=2¤t_page=1 36 PHỤ LỤC Phụ lục Mơi trường Murashige Skoog (1962) Khống đa lượng NH4NO3 1650 mg/l KNO3 1900 mg/l CaCl2.2H2O 440 mg/l MgSO4.7H2O 370 mg/l KH2PO4 170 mg/l Khoáng vi lượng MnSO4.4H2O 22,3 mg/l H3BO3 6,2 mg/l ZnSO4.7H2O 8,6 mg/l KI 0,83 mg/l Na2MoO4.2H2O 0,25 mg/l CuSO4.5H2O 0,025 mg/l CoCl2.6H2O 0,025 mg/l Na2EDTA 37,3 mg/l Vitamin Myo-Inositol 100 mg/l Nicotinic acid 0,5 mg/l Pyridoxin.HCl 0,5 mg/l Thyamin.HCl 0,1 mg/l Biotin 0,1 mg/l Pantotate Calci mg/l Nicotinic acid 0,5 mg/l Phụ lục Cách pha mơi trường Bước 1: Tùy theo thể tích cần pha ta hút dung dịch mẹ gồm khoáng đa lượng, khống vi lượng nhóm vitamin Cân chất: đường, PVP, inositon hút BA, NAA Khuấy hịa tan hồn tồn chất nước cất theo thể tích định sẵn Bước 2: Định mức đo pH 5,8 (điều chỉnh pH NaOH 1N hay HCl 1N) Bước 3: Vệ sinh lắp ráp hộp TIS chứa môi trường Bước 4: Bơm môi trường nuôi cấy vào hộp với thể tích phù hợp với thí nghiệm, ghi rõ ngày tháng tên (kí hiệu) môi trường Bước 5: Hấp khử trùng nhiệt độ 121oC thời gian 20 phút sau lắp ráp vào hệ thống cho vận hành kiểm tra mức độ tin cậy an toàn hộp TIS hệ thống Phụ lục Kết xử lý thống kê Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng thể tích môi trường lên phát triển chồi lan Mokara hệ thống ngập chìm tạm thời Bảng Số liệu dùng cho xử lý thống kê tiêu số chồi thí nghiệm Nghiệm thức 100 ml 150 ml 200 ml 250 ml 300 ml 3,2 4,2 5,47 5,53 5,07 Lần lặp lại 2,87 4,53 4,07 5,67 4,27 3,87 4,4 4,2 5,27 4,53 Bảng Kết xử lý thống kê tiêu số chồi số liệu bảng Function: ANOVA-1 Data case no to 15 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (SC) Trung bình 3,31 4,38 5,24 5,49 4,62 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8.747 2.187 20.375 0.0001 Within 10 1.073 0.107 Total 14 9.820 Coefficient of Variation = 7.11% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 9.940 3.313 0.51 0.19 3.00 13.130 4.377 0.17 0.19 3.00 15.740 5.247 0.20 0.19 3.00 16.470 5.490 0.20 0.19 3.00 13.870 4.623 0.41 0.19 -Total 15.00 69.150 4.610 0.84 0.22 Within 0.33 Bartlett's test Chi-square = 3.231 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.520 Bảng Trắc nghiệm phân hạng tiêu số chồi thí nghiệm kết Bảng RANGE Error Mean Square = 0.1070 Error Degrees of Freedom = 10 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.8465 s_ = 0.1889 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 3.310 4.380 5.250 5.490 4.620 Ranked Order C B AB A AB Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 5.490 5.250 4.620 4.380 3.310 A AB AB B C Bảng Số liệu dùng cho xử lý thống kê tiêu khối lượng thí nghiệm Nghiệm thức 100 ml 150 ml 200 ml 250 ml 300 ml 0,66 0,68 1,3 1,37 1,58 Lần lặp lại 0,83 0,96 1,25 1,56 1,43 0,54 0,87 1,28 1,67 1,56 Trung bình 0,68 0,83 1,28 1,53 1,52 Bảng Kết xử lý thống kê tiêu khối lượng số liệu Bảng Function: ANOVA-1 Data case no to 15 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (KL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1.868 0.467 32.448 0.0000 Within 10 0.144 0.014 Total 14 2.012 Coefficient of Variation = 10.26% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 2.030 0.677 0.15 0.07 3.00 2.510 0.837 0.14 0.07 3.00 3.830 1.277 0.03 0.07 3.00 4.600 1.533 0.15 0.07 3.00 4.570 1.523 0.08 0.07 -Total 15.00 17.540 1.169 0.38 0.10 Within 0.12 Bartlett's test Chi-square = 4.481 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.345 Bảng Trắc nghiệm phân hạng tiêu số chồi thí nghiệm kết Bảng RANGE Error Mean Square = 0.01400 Error Degrees of Freedom = 10 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.3062 s_ = 0.06831 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 0.6800 0.8400 1.280 1.530 1.520 Ranked Order B B A A A Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 1.530 1.520 1.280 0.8400 0.6800 A A A B B Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng thời gian ngập chìm cách hai lần ngập chìm liên tiếp lên phát triển chồi lan Mokara hệ thống ngập chìm tạm thời Bảng Số liệu dùng cho xử lý thống kê tiêu số chồi thí nghiệm Nghiệm thức phút phút phút phút phút phút phút phút phút 3,6 2,47 4,53 4,27 4,2 4,47 6,47 5,53 Lần lặp lại 3,4 2,53 1,8 4,8 4,53 4,13 4,13 6,2 5,6 4,53 2,2 2,13 5,13 4,4 3,87 5,8 5,07 Bảng Kết xử lý thống kê tiêu số chồi số liệu Bảng Function: ANOVA-1 Data case no to 27 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (SC) Trung bình 3,84 2,4 1,98 4,82 4,6 4,24 4,16 6,16 5,4 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 42.368 5.296 49.854 0.0000 Within 18 1.912 0.106 Total 26 44.280 Coefficient of Variation = 7.80% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 11.530 3.843 0.60 0.19 3.00 7.200 2.400 0.18 0.19 3.00 5.930 1.977 0.17 0.19 3.00 14.460 4.820 0.30 0.19 3.00 13.800 4.600 0.37 0.19 3.00 12.730 4.243 0.14 0.19 3.00 12.470 4.157 0.30 0.19 3.00 18.470 6.157 0.34 0.19 3.00 16.200 5.400 0.29 0.19 -Total 27.00 112.790 4.177 1.31 0.25 Within 0.33 Bartlett's test Chi-square = 5.549 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.698 Bảng Trắc nghiệm phân hạng tiêu số chồi thí nghiệm kết Bảng RANGE Error Mean Square = 0.1060 Error Degrees of Freedom = 18 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.7652 s_ = 0.1880 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 3.840 2.400 1.980 4.820 4.600 4.240 4.160 6.160 5.400 Ranked Order D E E BC CD CD CD A AB Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 6.160 5.400 4.820 4.600 4.240 4.160 3.840 2.400 1.980 A AB BC CD CD CD D E E Bảng 10 Số liệu dùng cho xử lý thống kê tiêu khối lượng chồi thí nghiệm Nghiệm thức phút phút phút phút phút phút phút phút phút 1,33 1,18 1,15 1,22 1,15 1,28 1,37 1,49 1,49 Lần lặp lại 1,14 1,31 0,88 1,32 1,25 1,12 1,32 1,61 1,64 1,1 1,04 0,85 1,1 0,95 1,62 1,43 1,90 1,57 Trung bình 1,19 1,17 0,96 1,21 1,12 1,34 1,37 1,67 1,57 Bảng 11 Kết xử lý thống kê tiêu khối lượng chồi số liệu Bảng 10 Function: ANOVA-1 Data case no to 27 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (KL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1.187 0.148 6.226 0.0006 Within 18 0.429 0.024 Total 26 1.615 Coefficient of Variation = 11.97% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 3.570 1.190 0.12 0.09 3.00 3.530 1.177 0.14 0.09 3.00 2.880 0.960 0.17 0.09 3.00 3.640 1.213 0.11 0.09 3.00 3.350 1.117 0.15 0.09 3.00 4.020 1.340 0.26 0.09 3.00 4.120 1.373 0.06 0.09 3.00 5.000 1.667 0.21 0.09 3.00 4.700 1.567 0.08 0.09 -Total 27.00 34.810 1.289 0.25 0.05 Within 0.15 Bartlett's test Chi-square = 5.324 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.722 Bảng 12 Trắc nghiệm phân hạng tiêu số khối lượng chồi dựa kết Bảng 11 RANGE Error Mean Square = 0.02400 Error Degrees of Freedom = 18 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.3641 s_ = 0.08944 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 1.190 1.180 0.9600 1.210 1.120 1.340 1.370 1.670 1.570 Ranked Order BCD BCD D BCD CD ABCD ABC A AB Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 1.670 1.570 1.370 1.340 1.210 1.190 1.180 1.120 0.9600 A AB ABC ABCD BCD BCD BCD CD D Bảng 13 Số liệu dùng cho xử lý thống kê tỷ lệ mẫu chêt thí nghiệm Nghiệm thức phút phút phút phút phút phút phút phút phút 0,24 0,35 0,26 0,13 0,14 0,19 0,07 0,07 0,15 Lần lặp lại 0,15 0,29 0,25 0,12 0,19 0,2 0,05 0,04 0,19 0,19 0,36 0,39 0,15 0,15 0,29 0,07 0,04 0,05 Bảng 14 Kết xử lý thống kê tỷ lệ mẫu chêt số liệu Bảng 13 Function: ANOVA-1 Data case no to 27 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (TLC) Trung bình 0,19 0,33 0,3 0,14 0,16 0,23 0,06 0,05 0,13 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.227 0.028 13.340 0.0000 Within 18 0.038 0.002 Total 26 0.266 Coefficient of Variation = 26.12% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 0.580 0.193 0.05 0.03 3.00 1.000 0.333 0.04 0.03 3.00 0.900 0.300 0.08 0.03 3.00 0.400 0.133 0.02 0.03 3.00 0.480 0.160 0.03 0.03 3.00 0.680 0.227 0.06 0.03 3.00 0.190 0.063 0.01 0.03 3.00 0.150 0.050 0.02 0.03 3.00 0.390 0.130 0.07 0.03 -Total 27.00 4.770 0.177 0.10 0.02 Within 0.05 Bartlett's test Chi-square = 10.459 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.234 Bảng 15 Trắc nghiệm phân hạng tiêu tỷ lệ mẫu chết dựa kết Bảng 14 RANGE Error Mean Square = 0.002000 Error Degrees of Freedom = 18 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.1051 s_ = 0.02582 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 0.1900 0.3300 0.3000 0.1300 0.1600 0.2300 0.06000 0.05000 0.1300 Ranked Order B A A BC BC AB C C BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = = = 0.3300 0.3000 0.2300 0.1900 0.1600 0.1300 0.1300 0.06000 0.05000 A A AB B BC BC BC C C Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA lên phát triển chồi lan Mokara hệ thống ngập chìm tạm thời Bảng 16 Số liệu dùng cho xử lý thống kê khối lượng chồi thí nghiệm Nghiệm thức Đối chứng 0,5 BA; 0,1 NAA BA; 0,1 NAA 1,5 BA; 0,1 NAA BA; 0,1 NAA 2,5 BA; 0,1 NAA 4,93 8,13 10,8 4,2 3,53 Lần lặp lại 5,73 7,93 11,2 5,8 3,4 3,4 6,27 8,67 10,53 6,13 4,67 Trung bình 5,64 8,24 10,84 6,64 4,42 3,64 Bảng 17 Kết xử lý thống kê tỷ lệ mẫu chết số liệu Bảng 16 Function: ANOVA-1 Data case no to 18 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (SC) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 105.297 21.059 55.478 0.0000 Within 12 4.555 0.380 Total 17 109.852 Coefficient of Variation = 9.37% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -0 3.00 16.930 5.643 0.67 0.36 3.00 24.730 8.243 0.38 0.36 3.00 32.530 10.843 0.34 0.36 3.00 19.930 6.643 1.19 0.36 3.00 13.270 4.423 0.24 0.36 3.00 10.930 3.643 0.32 0.36 -Total 18.00 118.320 6.573 2.54 0.60 Within 0.62 Bartlett's test Chi-square = 6.573 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.145 Bảng 18 Trắc nghiệm phân hạng tiêu số chồi dựa kết Bảng 17 RANGE Error Mean Square = 0.3800 Error Degrees of Freedom = 12 No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 1.537 s_ = 0.3559 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = 5.640 8.240 10.84 6.640 4.420 3.640 Ranked Order CD B A C DE E Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = 10.84 8.240 6.640 5.640 4.420 3.640 A B C CD DE E Bảng 19 Số liệu dùng cho xử lý thống kê tiêu khối lượng chồi thí nghiệm Nghiệm thức Đối chứng 0,5 BA; 0,1 NAA BA; 0,1 NAA 1,5 BA; 0,1 NAA BA; 0,1 NAA 2,5 BA; 0,1 NAA 1,58 1,73 1,8 1,82 1,59 2,02 Lần lặp lại 1,78 1,71 2,09 1,63 1,82 1,84 1,81 2,09 1,95 1,84 2,01 1,69 Trung bình 1,72 1,84 1,95 1,77 1,8 1,85 Bảng 20 Kết xử lý thống kê tiêu khối lượng chồi dựa số liệu Bảng 19 Function: ANOVA-1 Data case no to 18 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to Variable (KL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.091 0.018 0.649 Within 12 0.335 0.028 Total 17 0.425 Coefficient of Variation = 9.17% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -0 3.00 5.170 1.723 0.13 0.10 3.00 5.530 1.843 0.21 0.10 3.00 5.840 1.947 0.15 0.10 3.00 5.290 1.763 0.12 0.10 3.00 5.420 1.807 0.21 0.10 3.00 5.550 1.850 0.17 0.10 -Total 18.00 32.800 1.822 0.16 0.04 Within 0.17 Bartlett's test Chi-square = 1.102 Number of Degrees of Freedom = Approximate significance = 0.978 ... lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Khảo sát ảnh hưởng thời gian ngập chìm chu kỳ ngập chìm lên tái sinh lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời, sử dụng. .. chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Plantima Chu kỳ ngập chìm ngập phút giãn cách thích hợp cho tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Plantima... kỳ ngập lên tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập chìm tạm thời Bảng 4.2 Ảnh hưởng thời gian ngập chìm chu kỳ ngập lên tái sinh chồi lan Mokara Chao Praya Sunset hệ thống ngập