Rối loạn tăng sinh dòng lympho là bệnh khá thường gặp, liên quan đến các đặc điểm lâm sàng hoặc sinh học cụ thể nhưng đôi khi cũng do tình cờ phát hiện. Phương pháp dấu ấn miễn dịch hay đo tế bào dòng chảy đa thông số đóng một vai trò quan trọng trong chẩn đoán nhanh trên các mẫu máu ngoại vi, tủy xương, mô lympho, giúp hướng dẫn chẩn đoán, điều trị và theo dõi thích hợp cho bệnh nhân.
Tổng Quan Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP DẤU ẤN MIỄN DỊCH TRONG CHẨN ĐOÁN VÀ THEO DÕI CÁC BỆNH LÝ ÁC TÍNH CỦA DỊNG LYMPHƠ Ngơ Quốc Đạt1, Bùi Phương Quỳnh1, Phan Đặng Anh Thư1 TÓM TẮT Rối loạn tăng sinh dòng lympho bệnh thường gặp, liên quan đến đặc điểm lâm sàng sinh học cụ thể đơi tình cờ phát Phương pháp dấu ấn miễn dịch hay đo tế bào dịng chảy đa thơng số đóng vai trị quan trọng chẩn đốn nhanh mẫu máu ngoại vi, tủy xương, mô lympho, giúp hướng dẫn chẩn đốn, điều trị theo dõi thích hợp cho bệnh nhân Sự phát triển máy đo dịng chảy 10 màu hữu ích chẩn đốn u lympho khơng Hodgkin (lymphơm) Ngày đạt hồ sơ kiểu hình miễn dịch hồn chỉnh quần thể tế bào lympho thiết kế kháng thể đầy đủ tối ưu Từ khoá: bệnh lý rối loạn tăng sinh dịng lympho (LPD), u lympho khơng Hodgkin (lymphơm) (NHL), đo tế bào dòng chảy (FMC) ABSTRACT APPLICATION OF FLOW CYTOMETRY IN DIAGNOSIS AND MANAGEMENT OF MATURE LYMPHOID MALIGNANCIES Ngo Quoc Dat, Bui Phuong Quynh, Phan Dang Anh Thu * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 – No - 2021: 14 - 21 Lymphoproliferative disorders are rather frequent diseases, associated with specific clinical or biological features but also sometimes of fortuitous discovery Multiparameter flow cytometry plays a major role for a rapid diagnostic indication, on peripheral blood or bone marrow samples in most instances, guiding complementary analyses and allowing for the proper therapeutic management of patients The development of 8- and 10-colour clinical instruments has had considerable impact on the diagnosis of non-Hodgkin’s lymphomas by flow cytometry A reasonably complete immunophenotypic profile of any lymphocyte population can today be achieved from a couple of well-designed panels Keywords: Lymphoproliferative disorder (LPD), Non-Hodgkin Lymphoma (NHL), flow cytometry (FCM) đến biểu lâm sàng diễn biến bệnh Phân ĐẶT VẤN ĐỀ loại khối u mô tạo huyết hạch lympho Trong lịch sử, việc phân loại ung thư hạch theo WHO, xuất lần vào năm 2001(2) lympho phụ thuộc nhiều vào hình thái tế cập nhật gần vào năm 2016(3) cho bào(1) Những tiến gần công nghệ nhìn chi tiết loại u cung cấp nhiều phương pháp chẩn đoán mới, huyết học ác tính cho phép có lượng lớn thông tin hệ Xác định kiểu miễn dịch đo dòng chảy thống tạo máu phát triển chức tế bào chiến lược chẩn đoán đặt cho tế bào tạo máu Kiến thức nhiều loại ung thư tế bào lympho trưởng xác định phân loại thực thể bệnh nhờ thành Các kiến nghị Hiệp hội Đồng thuận kết hợp liệu hình thái học, kiểu miễn dịch Quốc tế (Bethesda, 2006) phân tích kiểu miễn di truyền, xem xét thông tin liên quan Bộ môn Mô phôi – Giải phẫu bệnh, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: TS Phan Đặng Anh Thư ĐT: 0947877908 Email: phandanganhthu@gmail.com 14 Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 dịch u tân sinh huyết học – lympho cho thấy việc phân tích kiểu miễn dịch theo dịng phần quan trọng chẩn đoán bao gồm triệu chứng lâm sàng gan lách to, khối u, tăng lympho máu ngoại vi giảm dòng tế bào máu(4) Cũng có vai trị việc phân loại bệnh chẩn đoán, theo dõi bệnh tồn lưu (MRD) theo dõi tái phát tiến triển bệnh CÁC NGUYÊN LÍ CỦA DẤU ẤN MIỄN DỊCH TẾ BÀO Đo dòng chảy tế bào kỹ thuật cho phép phân tích đặc tính vật lý kiểu biểu kháng nguyên dịch huyền phù (suspensions) tế bào sống nguyên vẹn Bước chuẩn bị tế bào thường bao gồm ly giải hồng cầu nhuộm bạch cầu lại kháng thể kết hợp với thuốc nhuộm huỳnh quang (fluorochromes) Khi mẫu ủ, cần rửa để loại bỏ kháng thể dư thừa sau thu nhận máy đo dòng chảy Khi chất lỏng đưa vào máy đo dòng chảy tế bào, hệ thống chất lỏng máy phân tích sử dụng kỹ thuật gọi tập trung thủy lực (hydrodynamic focusing) để tổ chức tế bào thành dòng tế bào Sau đó, dịng tế bào qua số chùm tia laser có bước sóng khác (có thể từ tia laser đơn lẻ đến bốn nhiều tùy thuộc vào hệ thống máy) Khi tế bào qua chùm tia laser, phá vỡ đường ánh sáng laser, phân tán theo nhiều hướng Sự phân tán đo thiết bị đo để tạo tham số tán xạ trước (FSC) tán xạ bên (SSC) Các tham số cung cấp thông tin kích thước độ phức tạp tế bào, nói chung, FSC tỷ lệ với kích thước tế bào SSC liên quan đến độ phức tạp độ chi tiết bên tế bào Các tia laser gây kích thích chất huỳnh quang gắn với kháng thể liên kết với tế bào kết phát xạ huỳnh quang Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Tổng Quan đo cách sử dụng loạt máy dò huỳnh quang lọc quang học Phổ phát xạ số chất huỳnh quang chồng lên đáng kể nên việc điều chỉnh toán học liệu, gọi bù trừ, áp dụng phép điều Việc lựa chọn tổ hợp kháng thể phải thực cẩn thận để giảm thiểu nhu cầu hiệu chỉnh bù PHÂN TÍCH TẾ BÀO DỊNG CHẢY Mỗi phép đo thực máy dò gọi kiện kiện tương đương với tế bào Một dò cung cấp cho kiện ngưỡng phát giá trị số để vào cuối trình thu nhận, tế bào có giá trị số đại diện cho tất tham số khác đo FSC SSC biến tuyến tính cường độ huỳnh quang thường hiển thị thang logarit (logarithmic scale) Đánh giá cường độ huỳnh quang xác định dương tính âm tính biểu protein tính chất định lượng liệu đo dịng chảy tế bào, đo cường độ biểu hiện, thường biểu thị cường độ huỳnh quang trung bình Kết biểu diễn đồ thị theo hai cách chính; biểu đồ tham số nhất, phân bố tần suất tham số đề cập biểu đồ hai tham số (thường gọi biểu đồ điểm) với tham số trục, kiện hiển thị dạng điểm (Hình 1, 2) Dữ liệu đo dịng chảy tế bào thường phân tích cách áp dụng vùng chọn (gating), cho phép xác định nhóm dân số quan tâm loại trừ kiện khác để phân tích sâu Vùng chọn vùng đơn lẻ kết hợp nhiều vùng Khi vùng chọn áp dụng, kiểm tra tế bào kiện để thiết lập hình ảnh chi tiết kiểu hình miễn dịch dân số chọn 15 Tổng Quan Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Hình Biểu đồ biểu diễn liệu dòng chảy tế bào (a) đồ thị hai tham số FSC SSC; (b) đồ thị hai tham số FL1 so với SSC cho phép dễ dàng phân biệt tập hợp dương tính, CD64 + bạch cầu đơn nhân (màu xanh lam) tập hợp bạch cầu đa nhân trung tính hoạt hóa (màu xanh lam nhạt hơn), so với tập hợp khác không nhuộm màu (c) mối quan hệ hai màu huỳnh quang CD45 CD19 mẫu chứa tế bào non dòng lympho B, tế bào lympho T NK, tế bào lympho B bạch cầu trung tính(5) Hình Biểu đồ biểu diễn liệu dịng chảy tế bào (a) Xếp lại tập hợp bạch cầu có màu ‘bản đồ’ CD45/SSC tuỷ xương; (b) chọn vùng tế bào lympho cho phép phân biệt tế bào lymphô CD19 + CD3 + (c) chọn tiếp quần thể CD3 + cho phép hiển thị tập tế bào T CD4 CD8; (d) biểu diễn biểu đồ mật độ quần thể (a) (e) biểu diễn đường cong quần thể (a)(5) 16 Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 ỨNG DỤNG CỦA PHƢƠNG PHÁP ĐO DỊNG CHẢY TẾ BÀO Máy đo dịng chảy tế bào ban đầu sử dụng chủ yếu để đếm tế bào thực tế, công nghệ tương tự sử dụng máy phân tích cơng thức máu toàn phần Vào đầu năm 1980, số lượng lớn kháng thể đơn dòng chống lại kháng nguyên bạch cầu người sản xuất điều tạo cách mạng lĩnh vực đo dòng chảy tế bào, cho phép sử dụng thường quy phương pháp miễn dịch tế bào Ngày nay, có nhiều tiến lớn thiết bị đo tế bào dòng chảy gia tăng đáng kể tính sẵn có kháng thể chất huỳnh quang Từng xuất hạn chế quan nghiên cứu, máy đo tế bào với (hoặc nhiều hơn) màu có sẵn cơng cụ lâm sàng sử dụng để chẩn đốn phịng thí nghiệm Bây thường xuyên đánh giá 10 (hoặc nhiều hơn) thông số đồng thời(6) Số lượng tham số kiểm tra lớn lượng thơng tin thu từ lần chuẩn bị tế bào lớn Sự tăng thông tin mở rộng lợi ích phương pháp đo dòng chảy tế bào để khảo sát kháng nguyên diện tế bào tạo máu bình thường ác tính Kiến thức kiểu hình miễn dịch áp dụng để xác định diện hay vắng mặt dân số tế bào bình thường tế bào ung thư thuộc loại khác cách đánh giá: Dòng tế bào Giai đoạn phát triển tế bào Sự diện dân số đơn dòng Một kiểu hình miễn dịch dân số quan tâm Việc đánh giá đồng thời số lượng lớn kháng nguyên làm tăng tính đặc hiệu phân loại kiểu hình miễn dịch Do đó, điều làm tăng độ nhạy giúp cho việc phát xác định dân số nhỏ hỗn hợp nhiều tế bào phức tạp Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Tổng Quan Phƣơng pháp đo dòng chảy tế bào để phân loại tân sinh dòng lympho B Dân số tế bào B xác định thiết lập mối quan hệ; giai đoạn phát triển tế bào B đại diện mẫu đánh giá; tính đơn dịng (clonitiy) dân số tế bào B xác định cuối kiểu hình tổng hợp chi tiết tạo bao gồm việc xác định dấu hiệu cụ thể khối u Xác định dòng tế bào Kháng nguyên tế bào B mô tả B1 (ngày gọi CD20) lần sử dụng để mơ tả tế bào ác tính từ bệnh nhân lymphoma bệnh bạch cầu vào năm 1981(7) Kể từ đó, nhiều kháng nguyên khác xác định biểu độc quyền tế bào lympho B, bao gồm CD19, CD22, CD79a, CD79b thành phần khác phức hợp thụ thể tế bào B Dấu hiệu sử dụng phổ biến để đánh dấu dịng tế bào lympho B CD19 dấu hiệu có mặt tất giai đoạn vòng đời tế bào lympho B, từ tế bào đầu dịng (early progenitors) tương bào biệt hóa giai đoạn cuối Một số lymphom tế bào B cho thấy CD19 biểu (down-regulation) điều làm cho việc phát dân số tế bào khó khăn sử dụng CD19, đặc biệt tế bào B bình thường Mức độ biểu CD19 thấp thường thấy lymphơm dạng nang đơi thấy hầu hết loại lymphom tế bào B(6) Để khắc phục vấn đề gây việc giảm biểu hiện, nên sử dụng kết hợp dấu ấn chọn vùng (gating markers), ví dụ CD19 CD20 Giai đoạn phát triển tế bào Khi dân số tế bào lympho B khoanh vùng, đánh giá thông tin giai đoạn phát triển tế bào cách đánh giá kháng ngun có biểu thay đổi suốt vịng đời tế bào lympho B Một dấu ấn quan trọng CD10 Tế bào B tiền thân có CD10 dương tính biểu nội 17 Tổng Quan bào CD79 a/b, lại thiếu biểu CD20 khơng có globulin miễn dịch bề mặt Khi tế bào lympho B trưởng thành, biểu CD10 giảm CD20 tăng lên tế bào nhận globulin miễn dịch bề mặt Kiến thức đường biệt hóa bình thường tế bào sử dụng để xác định chất tế bào Có thể đánh giá giai đoạn phát triển tế bào cách sử dụng kết hợp dấu ấn Ví dụ kết hợp CD10 với CD20 Khơng giống tế bào tiền thân, tế bào B có nguồn gốc từ trung tâm mầm tân sinh có biểu CD20 mạnh mẽ đó, hai dân số phân biệt kháng nguyên xác kiểm tra Dấu hiệu nhận biết rối loạn tăng sinh dòng lympho B (LPDs) hạn chế chuỗi nhẹ immunoglobulin (Ig), nghĩa là, biểu đơn hình chuỗi nhẹ κ λ bề mặt Ig (sIg) Lưu ý, điều đòi hỏi phải rửa kỹ mẫu có chứa Igs tự huyết tương, chẳng hạn máu ngoại vi (PB) tủy xương (BM) để loại bỏ chúng chúng tiêu thụ kháng thể đích Đối với nhận dạng tế bào lympho B, khuyến cáo kháng thể bao gồm hai kháng nguyên tế bào pan-B (thường CD19 CD20), giảm điều hòa số kháng nguyên pan-B đặc điểm chung NHL tế bào B xảy sau điều trị trúng đích Một bảng kháng thể ngắn (bao gồm CD5, CD10, CD19, CD20 CD45) bảng kháng thể phụ lớn (CD9, CD11c, CD13, CD15, CD22, cCD22, CD23, CD25, CD33, CD34, CD38, CD43, CD58, cCD79a, CD79b, CD103, FMC7, Bcl-2, c κ, c λ, TdT, Zap-70, cIgM) cần thiết cho việc xác định kiểu hình miễn dịch LPD tế bào B đề xuất vào năm 2006 Nhóm đồng thuận quốc tế Bethesda Các bảng tương tự sau khuyến nghị European Leukemia-Net, hiệp hội Euroflow tác giả khác(5) Việc bao gồm bảng kháng thể CD10 CD38 cho phép dễ dàng xác định quần thể tế 18 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 bào B trưởng thành (còn gọi haematogone) tuỷ xương tế bào B trung tâm mầm (GC) hạch lympho mẫu mô khác Kiến thức kiểu hình miễn dịch tế bào B trung tâm mầm GC (GCB) (CD20 sáng/CD10 + /CD38 +) giúp phân biệt quần thể với tăng sinh đơn dịng tế bào với kiểu hình miễn dịch tế bào B trung tâm mầm, ví dụ u lympho nang (FL) Việc đưa CD5 vào bảng kháng thể để phân biệt CD5 + LPD ví dụ bệnh bạch cầu lympho mãn tính / lymphoma tế bào nhỏ (CLL / SLL) từ lymphom tế bào lớp áo (MCL) (cũng thường đồng biểu CD19 CD5) Ngoài ra, việc đưa CD5 vào bảng sàng lọc hữu ích việc chẩn đoán u lympho tế bào T(5) Nếu CD5 CD23 đưa vào ống sàng lọc, quần thể dương tính kép với CD20 mờ biểu chuỗi nhẹ giúp nhanh chóng xác định trường hợp CLL tế bào B (B-CLL) điển hình Các trường hợp điển hình nên đánh giá dấu ấn bổ sung, ví dụ, CD43, CD79b, CD81 CD200 Tương tự, việc đưa CD10 vào ống sàng lọc xác định trực tiếp LPD có nguồn gốc từ tế bào B trung tâm mầm(5) Phƣơng pháp đo dòng chảy tế bào để phân loại tân sinh tế bào T tế bào NK Việc phân tích tân sinh tế bào lympho T tế bào NK nghi ngờ có nguồn gốc từ tế bào NK thực theo bước tương tự với tế bào lympho B Xác định dịng tế bào Có nhiều kháng nguyên dòng tế bào lymphoT (CD2, CD3, CD5 CD7) tế bào NK (CD2, CD16, CD56) Sự biểu bề mặt CD3 xảy trình trưởng thành tế bào lympho T, với nguyên bào lympho (lymphoblast) dương tính CD3 bào tương (cyCD3) Biểu CD2, CD5 CD7 nhìn thấy tất giai đoạn phát triển, dân số nhỏ thiếu biểu tồn mẫu thử từ cá thể khỏe Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 mạnh Cũng giống tân sinh tế bào lympho B, việc sử dụng nhiều kháng nguyên để kiểm tra cải thiện khả nhận dạng tế bào T dân số âm tính với số kháng nguyên liên quan đến tế bào T gây khó khăn sai sót chẩn đoán Giai đoạn phát triển Tế bào lympho T trưởng thành xác định diện biểu CD3 bề mặt Nguyên bào lympho tế bào T âm tính với CD3 bề mặt dương tính với CD3 bào tương biểu CD1a Sau xếp lại gen TCR, tế bào trở nên dương tính với CD3 bề mặt khỏi tuyến ức vào hệ tuần hồn ngoại vi dạng tế bào T trưởng thành Có số lượng lớn dân số tế bào T trưởng thành có mẫu thử bình thường, bao gồm dân số T điều hịa, T tác động T nhớ Các tế bào trưởng thành thường phân chia thành thành phần T hỗ trợ (CD4 +) T độc tế bào (CD8 +) thấy khác biệt lớn tỷ lệ dân số dân số bình thường phản ứng Ƣu điểm nhƣợc điểm kỹ thuật miễn dịch tế bào Phân tích liệu đo dòng chảy tế bào trình khách quan gồm phép đo định tính định lượng Kết không bị ảnh hưởng mức độ chủ quan giống đánh giá hình thái tế bào Tế bào xác định hình thái biểu kháng nguyên chúng hầu hết trường hợp, việc xác định dòng thường đơn giản Bản chất đa tham số liệu đo dòng chảy tế bào cho phép đánh giá nhiều kháng nguyên đồng thời, giúp kiểm tra biểu đồng biểu kháng nguyên dân số cụ thể Số lượng lớn tế bào phân tích nhanh chóng, với hầu hết phịng xét nghiệm thường xuyên thu thập liệu mức tối thiểu 100.000 tế bào trình bày từ 500.000 đến 1.000.000 tế bào phân tích tế bào tồn lưu MRD Kết có nhanh so với phân tích mơ học mẫu Chun Đề Giải Phẫu Bệnh Tổng Quan không cần phải trải qua giai đoạn xử lý cố định kéo dài cần thiết cho hình thái tế bào hóa mơ miễn dịch Dữ liệu tạo phép đo dòng chảy tế bào đáng tin cậy tương đương kết mẫu thử Đối với sinh thiết mô, đặc biệt sinh thiết lõi kim nhỏ chọc hút tủy xương, việc thiếu tế bào tân sinh mẫu khơng thiết khơng có bệnh(7) Nhiều nốt khối u tân sinh cho thấy không quán việc lấy mẫu không xác dẫn đến sinh thiết khơng có tế bào ác tính khơng đại diện cho toàn khối u Chất lượng mẫu phết bị ảnh hưởng việc pha lỗng mẫu với máu ngoại vi Càng ngày có nhiều nơi khơng chọn phương pháp cắt bỏ hồn tồn để sinh thiết hạch, thay vào ưu tiên thủ thuật xâm lấn chọc hút kim nhỏ (FNA) sinh thiết kim lõi(8) Mặc dù quy trình giúp bệnh nhân giảm khó chịu thời gian phục hồi, mẫu thu tế bào nhiều làm tăng nhiều thách thức cho chẩn đốn Nếu mẫu q nhỏ, đến mức khơng thể chẩn đốn khơng thể tránh khỏi sinh thiết phẫu thuật gây chậm trễ điều trị, số trường hợp, ảnh hưởng đến kết bệnh nhân Dữ liệu đo dòng chảy tế bào hỗ trợ nhiều việc đưa chẩn đoán trường hợp này(9,10) với nghiên cứu cho thấy độ nhạy phép đo dòng chảy tế bào bối cảnh FNA cao PCR(11) Kiến thức thành phần tế bào mẫu, diện dân số đơn dòng diện bất thường kiểu hình tạo điều kiện cho việc sử dụng hiệu tế bào mẫu mô hạn chế sẵn có cách định xét nghiệm thêm Việc tích hợp phân tích dịng chảy tế bào dịch hút tế bào đánh giá mô học sinh thiết kim lõi cách tiếp cận đầy hứa hẹn để tăng khả ứng dụng phương pháp chẩn đoán xâm lấn tối thiểu 19 Tổng Quan Nhu cầu mô tế bào tươi mà hạn chế số lượng mẫu sinh thiết phân tích phương pháp đo dịng chảy tế bào Ở nhiều trung tâm, việc không thực thường qui có mẫu thử chưa cố định lâm sàng nghi ngờ lymphom Điều bất chấp lợi ích mang lại từ việc đánh giá qua liệu đo dòng chảy tế bào, cải thiện phân tích phân tử số trường hợp, cải thiện cố định xử lý block mô học thông thường Hy vọng điều thay đổi nhờ việc tập trung dịch vụ chẩn đốn u ác tính huyết học, giúp cung cấp khả tiếp cận rộng rãi với đầy đủ kỹ thuật chẩn đoán Những cải tiến độ nhạy độ đặc hiệu xét nghiệm đo dịng chảy tế bào làm cho phát dân số nhỏ tế bào ung thư tế bào trưởng thành tế bào non Một số nhóm phát diện dân số tế bào B đơn dòng xơ ẩn (occult monoclonal B-cell populations) mẫu máu ngoại vi người bình thường(12) Phân tích dịng chảy tế bào chứng minh nhạy đánh giá mô học việc đánh giá mẫu tủy xương đề cập đến để phân loại tân sinh tế bào B trưởng thành biết(13) Ý nghĩa lâm sàng việc tìm kiếm dân số nhỏ đơn dòng chưa rõ ràng Sự diện tủy xương làm nâng giai đoạn bệnh bệnh nhân điều có ảnh hưởng trực tiếp đến định điều trị Cần tiến hành nhiều xét nghiệm để đánh giá tác động liên quan đến xương mức thấp dự hậu bệnh nhân, để có hướng dẫn việc phân giai đoạn trường hợp Ý nghĩa lâm sàng phát dân số tế bào đơn dòng xơ ẩn (occult monoclonal populations) phát người khỏe mạnh ngày nhiều, cần làm rõ thêm liệu gần cho thấy tỷ lệ tiến triển tương đối thấp(14,15) Khi kĩ thuật dòng chảy tế bào tiếp tục cải tiến, tìm thấy dân số tế bào nhỏ tất 20 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 loại mẫu Điều quan trọng kết xem xét bối cảnh lâm sàng để thu giá trị tối đa từ chúng đảm bảo tốt cho bệnh nhân, không cần can thiệp nhiều trường hợp Tƣơng lai phƣơng pháp đo dịng chảy tế bào phân tích bệnh lí ác tính dịng lympho Tương lai phương pháp đo dòng chảy tế bào chắn mang đến thiết bị đo tế bào với số lượng lớn tia laser thông số, điều kèm với lựa chọn chất huỳnh quang Khi kiến thức hệ thống tạo máu tiếp tục thay đổi, có kháng nguyên nghiên cứu công dụng chúng việc phát triển kiểu hình bệnh cụ thể Phần lớn kháng thể có hướng đến việc chống lại kháng nguyên biểu bề mặt tế bào kỹ thuật cải thiện, có tham gia kháng thể nội bào Khi đo dòng chảy tế bào ngày có vai trị chẩn đốn, việc chuẩn hóa phương pháp chẩn đốn theo dõi MRD trở nên quan trọng Đồng thuận Bethesda (16) đưa kiến nghị việc sử dụng kháng thể báo cáo kết kiểu hình miễn dịch ngày có nhu cầu chuẩn hóa kháng thể (antibody panels) KẾT LUẬN Trong thập kỷ vừa qua, phương pháp miễn dịch tế bào (dòng chảy tế bào) trở thành công cụ quan trọng chẩn đốn bệnh lí huyết học ác tính Những cải tiến kĩ thuật gần mang lại xét nghiệm có độ đặc hiệu độ nhạy cao hơn, áp dụng thường qui chẩn đốn phịng xét nghiệm Nhiều loại lymphơm phân loại xác miễn dịch tế bào độc lập với các phương pháp chẩn đốn khác, cho phép phát triển quy trình chẩn đoán mạnh mẽ Sự cải tiến kỹ thuật có độ nhạy cao ngày đóng vai trị quan trọng Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Tổng Quan việc theo dõi bệnh trình điều trị 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO 11 Jaffe ES, Harris NL, Stein H, Isaacson PG (2008) Classification of lymphoid neoplasms: the microscope as a tool for disease discovery Blood, 112:4384-4399 Jaffe E, Harris N, Stein H (2002) Tumours of the Haematopoietic and Lymphoid Tissues World Health Organisation Classification of Tumours Swerdlow S, Campo E, Harris N, et al (2016) WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Wood BL, et al (2007) 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia Cytometry B Clin Cytom, 72(S1):S14-22 Porwit A, Bene MC (2018) Multiparameter flow cytometry in the diagnosis of hematologic malignancies Cambridge University press Nadler LM, et al (1981) A unique cell surface antigen identifying lymphoid malignancies of B cell origin J Clin Invest, 67:134-140 Dunphy CH (2000) Contribution of Flow Cytometric Immunophenotyping to the Evaluation of Tissues With Suspected Lymphoma? Cytometry, 42:296-306 Sandhaus LM (2000) Fine-Needle Aspiration Cytology in the Diagnosis of Lymphoma AM, 113:623-627 Gong JZ, Williams DC, Liu K, Jones C (2002) Fine-Needle Aspiration in NonHodgkin Lymphoma American Journal of Clinical Pathology, 117:880-888 Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh 12 13 14 15 16 Meda BA, et al (2000) Diagnosis and Subclassification of Primary and Recurrent Lymphoma American Journal of Clinical Pathology, 113:688-699 Maroto A, Martinez M, Martinez MA, de Agustin P, Rodriguez-Peralto JL (2009) Comparative analysis of immunoglobulin polymerase chain reaction and flow cytometry in fine needle aspiration biopsy differential diagnosis of non-Hodgkin B-cell lymphoid malignancies Diagn Cytopathol, 37:647-653 Nieto WG, et al (2009) Increased frequency (12%) of circulating chronic lymphocytic leukemia-like B-cell clones in healthy subjects using a highly sensitive multicolor flow cytometry approach Blood, 114:33-37 Talaulikar D, Dahlstrom JE (2009) Staging bone marrow in diffuse large B-cell lymphoma: the role of ancillary investigations Pathology, 41:214-222 Dagklis A, Fazi C, Scarfo L, Apollonio B, Ghia P (2009) Monoclonal B lymphocytosis in the general population Leuk Lymphoma, 50:490-492 Rawstron AC, Hillmen P (2010) Clinical and diagnostic implications of monoclonal B-cell lymphocytosis Best Pract Res Clin Haematol, 23:61-69 Greig B, Oldaker T, Warzynski M, Wood B (2007) 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: recommendations for training and education to perform clinical flow cytometry Cytometry B Clin Cytom, 72(S1):S23-33 Ngày nhận báo: 10/10/2021 Ngày báo đăng: 08/12/2021 21 ... loại bệnh chẩn đoán, theo dõi bệnh tồn lưu (MRD) theo dõi tái phát tiến triển bệnh CÁC NGUYÊN LÍ CỦA DẤU ẤN MIỄN DỊCH TẾ BÀO Đo dịng chảy tế bào kỹ thuật cho phép phân tích đặc tính vật lý kiểu... cao hơn, áp dụng thường qui chẩn đoán phịng xét nghiệm Nhiều loại lymphơm phân loại xác miễn dịch tế bào độc lập với các phương pháp chẩn đoán khác, cho phép phát triển quy trình chẩn đốn mạnh... có vai trị chẩn đốn, việc chuẩn hóa phương pháp chẩn đoán theo dõi MRD trở nên quan trọng Đồng thuận Bethesda (16) đưa kiến nghị việc sử dụng kháng thể báo cáo kết kiểu hình miễn dịch ngày có