Hàm lƣợng microcystin trong dịch chiết chủng LT2 là 102,4ng/ml và chủng LT8 là 108,8ng/ml. Sự phõn hủy đƣợc bắt đầu bằng cỏch bổ sung dịch chiết microcystin thụ vào cỏc mẫu nƣớc vụ trựng (dựng bỡnh cú thể tớch 1000ml bổ sung 600 ml) để thu đƣợc nồng độ microcystin tổng số là 10 àg/l. Cỏc chủng vi khuẩn phõn giải vi khuẩn lam đƣợc đƣa vào bỡnh với mật độ tế bào nuụi cấy là 2,5 ì 106 tế bào/ml. Cỏc bỡnh sau đú đƣợc nuụi tĩnh trong điều kiện phũng thớ nghiệm (30oC). Kiểm tra mẫu sau 1 giờ bằng cỏch lấy 50 ml dịch đem lọc qua màng lọc kớch thƣớc
Rhodospirillum rubrum D30778
Sphingomonas sibiricus Y10678
Sphingomonasparapaucimobilis D13724 Sphingomonassanguinis D13726 Sphingomonaspaucimobilis D13725 67 Sphingomonas trueperi X97776 94
Sphingomonasmali Y09638
Sphingomonasasaccharolytica Y09639 N7
61 80 58
Porphyrobacter tepidarius D844
Erythromicrobium ramosum AB013
Porphyrobacter neustonensis L0 68
Erythrobacter longus M59062
Erythrobacter litoralis AB0133
99 56
Novosph aromaticivorans U20756
Sphingomonassubterraneae U20773
Novosphi capsulatum D16147 87
Sphingomonassubarctica X94102 96
Sphingomonasagrestis Y12803
Sphingomonaschlorophenolica X87162
Sphingomonasflava X87164 96
Sphingomonasyanoikuyae D13728 93
Sphingomonasnatatoria AB024288
Erythr ursincola AB024289
Sphingomonassuberifaciens D13737 100 Sphingomonasadhaesiva D13722 Sphingomonasterrae D13727 Sphingomonasmacrogoltabida SPP16SRR 54 99 100 78 100 75 96 69 0.02
0,2 àm. Dịch thu đƣợc bảo quản trong catrit Sep-Pak ODS trƣớc khi tiến hành phõn tớch. Thớ nghiệm đối chứng (khụng cú vi khuẩn) đƣợc tiến hành song song. Hai chủng vi khuẩn N4, N7 đƣợc tuyển chọn dựng làm phõn giải microcystin cho cỏc thớ nghiệm cú nồng độ microcystin cao từ 2, 5 và 10 àg/l theo nhƣ phƣơng phỏp đó trỡnh bày. Hiệu quả phõn giải microcystin đƣợc xỏc định nhờ phƣơng phỏp bỏn thời gian nhƣ mụ tả của Kenefick.
Kết quả đƣợc trỡnh bày ở bảng 3.8 và hỡnh 3.30.
Bảng 3.8. Hằng số tốc độ phõn giải (K) và thời gian bỏn phõn giải microcystin ở cỏc
nồng độ khỏc nhau Chủng
vi khuẩn
Nồng độ microcystin ban đầu
2 àg/l 5 àg/l 10 àg/l
(1) (2) (3)
K(1/ngày) t0,5(ngày) K(1/ngày) t0,5(ngày) K(1/ngày) t0,5(ngày)
N4 0,076 0,074 0,045 0,102 0,043 0,140 N7 0,094 0,092 0,052 0,156 0,056 0,153 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 Hà m lƣợ ng M C phõ n giải 2 5 10
Nồng độ microcystin ban đầu
N4 N7
Hỡnh 3.30. Thời gian bỏn phõn giải microcystin ở cỏc nồng độ khỏc nhau của 2
Khả năng phõn giải độc tố của chỳng khỏ nhanh, đặc biệt ở nồng độ độc tố thấp 2 àg/l, thời gian bỏn phõn giải microcystin tƣơng đối ngắn, đối với chủng LT2 là 0,074 ngày (1 giờ 47 phỳt), đối với LT8 là 0,092 ngày (2 giờ 12 phỳt). Với nồng độ microcystin cao gấp 5 lần (2 àg/l), thời gian bỏn phõn giải của 2 chủng LT2, LT8 lần lƣợt là 0,14 ngày (3 giờ 21 phỳt) và 0,153 ngày (3 giờ 40 phỳt). Hằng số tốc độ ban đầu trong cỏc nghiờn cứu của chỳng tụi là từ 0,43-0,56 /ngày, so sỏnh với hằng số tốc độ trong bỏo cỏo của Jones [28] từ 0,05-0,3/ngày, Jones đó đo mức độ phõn giải microcystin bằng cỏc thể tớch khỏc nhau của tế bào cũn lại khụng bị tỏch chiết từ mụi trƣờng nuụi cấy vi khuẩn phõn giải microcystin. Hằng số tốc độ theo Kenefick [28 ] là 0,25/ngày cũng phản ỏnh sự phõn giải chậm hơn. Cỏc kết quả trờn cho phộp chỳng tụi sơ bộ kết luận 2 chủng vi khuẩn Sphingomonas N4, N7 phõn lập từ nƣớc hồ cú hoạt tớnh phõn giải độc tố microcystin. Khả năng phõn giải đối với từng loại độc tố microcystin cụ thể sẽ đƣợc tiến hành trong cỏc nghiờn cứu tiếp theo.