Đồ thị hình 3.7; 3.8 và 3.9 thể hiện ảnh hưởng của thời gian chiết đến hàm lượng polyphenol tổng số và khả năng chống oxy hóa của dịch chiết rong mơ.
Hình 3.7 cho thấy thời gian chiết ảnh hưởng đến hàm lượng polyphenol tổng số trong dịch chiết rong mơ. Khi tăng thời gian chiết từ 10 đến 30 phút thì hàm lượng polyphenol tăng từ 6,66 đến 13,13 mg GAE/g rong khô nhưng khi tăng thời gian từ 30 đến 120 phút thì hàm lượng polyphenol giảm (từ 13,13 đến 12,43 mg GAE/g rong khô) nhưng không đáng kể. Như vậy, chiết trong thời gian 30 phút là thích hợp để thu các hợp chất polyphenol từ rong mơ. Kết quả này cũng tương tự với kết quả công bố của Dent và cộng sự (2013) khi xác định thời gian chiết 30 phút
cho hiệu quả chiết các hợp chất polyphenol từ lá Salvia officinalis là cao nhất.
Thông thường thời gian chiết càng dài thì hiệu quả chiết các hợp chất càng cao. Tuy nhiên, sự ảnh hưởng của thời gian chiết còn phụ thuộc vào đặc tính của nguyên liệu (như kích thước, độ ẩm) và hợp chất cần chiết. Trong nghiên cứu này, 30 phút là khoảng thời gian thích hợp cho quá trình chiết các hợp chất polyphenol
từ rong mơ. Khi tiếp tục tăng thời gian chiết, hàm lượng polyphenol tổng số thu được không thay đổi đáng kể. Thời gian chiết dài sẽ tiêu tốn nhiều năng lượng và các chi phí khác. Do đó, thời gian 30 phút được lựa chọn cho các nghiên cứu tiếp theo. Kéo dài thời gian chiết mà hàm lượng polyphenol tổng số thu được không tăng mà có chiều hướng giảm có thể được giải thích như sau: Thời gian chiết kéo dài các hợp chất polyphenol có điều kiện tiếp xúc nhiều hơn với oxy, trong điều kiện nhiệt độ cao, có thể bị oxy hóa. Ngoài ra, hiện tượng này còn có thể được giải thích dựa vào định luật Fick thứ 2. Theo đó, trạng thái cân bằng của quá trình khuếch tán sẽ đạt được sau một khoảng thời gian xác định, khi đó nếu tiếp tục tăng thời gian chiết lượng chất chiết thu được sẽ không thay đổi.
Hình 3.7. Ảnh hưởng của thời gian chiết đến hàm lượng polyphenol tổng số
(Chữ cái trên cột khác nhau chỉ ra sự khác nhau có ý nghĩa thống kê p < 0,05)
Hình 3.8 trình bày kết ảnh hưởng của thời gian chiết đến tổng năng lực khử của rong mơ. Năng lực khử được đánh giá bằng độ hấp thụ ở bước sóng 700 nm, độ hấp thụ càng lớn chứng tỏ năng lực khử càng cao. Kết quả cho thấy nồng độ dung môi ethanol ảnh hưởng rõ ràng đến tổng năng lực khử. Khi tăng thời gian chiết từ 10 đến 30 phút thì năng lực khử tăng từ 0,62 đến 0,71. Tuy nhiên, khi tiếp tục tăng thời gian từ 30 đến 120 phút thì năng lực khử cũng tăng nhưng không đáng kể từ
0,71 đến 0,73. Qua đó cho thấy rằng, khả năng chống oxy hóa cao khi rong được chiết trong các thời gian từ 30 đến 120 phút. Mặc dù khi tăng thời gian chiết từ 30 đến 120 phút thì hoạt tính chống oxy hóa cũng tăng nhưng mức độ tăng không đáng kể. Phân tích thống kê đã cho thấy rõ điều này. Vì vậy thời gian thích hợp để chiết là 30 phút sẽ tiết kiệm được thời gian chiết và ít tốn kém chi phí.
Hình 3.8. Ảnh hưởng của thời gian chiết đến tổng năng lực khử (Chữ cái trên
cột khác nhau chỉ ra sự khác nhau có ý nghĩa thống kê p < 0,05)
Hình 3.9 cũng cho thấy thời gian chiết ảnh hưởng đến khả năng khử gốc tự do DPPH. Kết quả này cũng tương tự với kết quả nghiên cứu của Chew và cộng sự (2011) với đối tượng nghiên cứu là rau má. Trong khoảng thời gian từ 10 đến 30 phút thì khả năng khử gốc tự do DPPH tăng từ 79,74 đến 94,17% nhưng khi tăng thời gian từ 30 đến 120 phút thì khả năng khử gốc tự do DPPH giảm từ 94,17 đến 87,73%. Điều này cũng có nghĩa rằng, khi chiết trong thời gian 30 phút thì thu được dịch chiết có khả năng chống oxy hóa cao, thời gian chiết ngắn sẽ tiết kiệm được thời gian chiết và chi phí. Vì vậy, thời gian chiết thích hợp được chọn là 30 phút.
Kết quả này được giải thích như sau: Trong quá trình trích ly, ngoài nhiệt độ tác dụng trực tiếp thì còn có yếu tố thời gian. Trong khoảng 30 phút đầu, quá trình
khuếch tán vật chất xảy ra nhanh dần và đạt giá trị cực đại tại 30 phút. Sau thời gian này, tốc độ khuếch tán vật chất sẽ tăng chậm hoặc không tăng nữa. Lúc này, nhiệt độ là yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly. Nếu thời gian kéo dài các chất chống oxi hóa trong dịch chiết phải chịu nhiệt độ càng lâu nên độ bền của nó sẽ giảm xuống. Các thành phần không bền nhiệt sẽ bắt đầu phân hủy sau khi quá trình khuếch tán vật chất đạt đến cân bằng.
Qua 3 đồ thị hình 3.7, 3.8 và 3.9 ta thấy có điểm chung đó là, cả 3 đồ thị đều có xu hướng tăng giảm như nhau. Do đó, có thể hợp chất polyphenol là thành phần chính góp phần lớn trong việc chống oxy hóa của dịch chiết từ rong mơ. Để chứng minh cho điều đó ở phần sau chúng tôi sẽ đề cập tới.
Hình 3.9. Ảnh hưởng của thời gian chiêt đến khả năng khử gốc tự do DPPH
(Chữ cái trên cột khác nhau chỉ ra sự khác nhau có ý nghĩa thống kê p < 0,05)