Đồ thị hình 3.1; 3.2 và 3.3 mô tả ảnh hưởng của nồng độ dung môi chiết (ethanol) đến hàm lượng polyphenol tổng số và khả năng khử gốc tự do DPPH của dịch chiết rong mơ.
Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng ethanol ở các nồng độ khác nhau
bao gồm 0, 30, 70 và 100%. Hình 3.1 trình bày kết quả ảnh hưởng của nồng độ của dung môi chiết đến hàm lượng polyphenol tổng số. Kết quả cho thấy nồng độ dung môi ethanol ảnh hưởng đáng kể đến hàm lượng polyphenol tổng số. Khi tăng nồng độ dung môi ethanol từ 0 đến 30%, hàm lượng polyphenol tổng số lên khoảng 2 lần
(p 0,05). Tuy nhiên, khi nồng độ ethanol tăng lên từ 30 đến 100% thì hàm lượng
polyphenol giảm dần (p 0,05). Cụ thể, khi sử dụng 30% ethanol để chiết, hàm
lượng polyphenol tổng số thu được là 13,13 mg GAE/g rong khô, trong khi sử dụng 70 và 100% ethanol để chiết thì hàm lượng giảm xuống tương ứng là 3,02 và 0,89 mg GAE/g rong khô. Như vậy, 30% ethanol cho hiệu quả thu hàm lượng polyphenol tổng số là cao nhất trong dải nồng độ dung môi nghiên cứu.
Dung môi chiết là một thông số quan trọng trong quá trình chiết các hợp chất từ nguyên liệu thực vật và động vật. Từ kết quả của nghiên cứu này chúng tôi thấy rằng nồng độ dung môi chiết (ethanol) có ảnh hưởng lớn đến hàm lượng polyphenol tổng số của dịch chiết rong mơ. Kết quả này tương tự với nhiều nghiên cứu trước đây trên đối tượng rong biển và các loài thực vật trên cạn. Dent và cộng sự (2012) đã xác định khi sử dụng nồng độ dung môi ethanol 30% để chiết sẽ đem lại hiệu quả
nhất cho quá trình chiết các hợp chất polyphenol từ lá Salvia officinalis. Chew và
cộng sự (2011) nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ ethanol (0-100%) đến hàm lượng polyphenol tổng số của rau má. Kết quả cho thấy nồng độ ethanol có ảnh hưởng đáng kể đến hàm lượng polyphenol của dịch chiết thu được. Nồng độ ethanol ở 40% được xác định là nồng độ cho hàm lượng polyphenol tổng số là cao nhất.
Nhiều nghiên cứu đã chứng minh rằng khả năng hòa tan polyphenol trong dung môi chiết phụ thuộc vào độ phân cực của dung môi. Methanol là một trong những dung môi phù hợp nhất để tách polyphenol (De và cộng sự, 2005; Galvez và
cộng sự, 2005) 28, 36. Tuy nhiên, như đã đề cập ở trên methanol là một dung
môi độc tính, có thể ảnh hưởng đến sức khỏe của người sử dụng. Do vậy, ethanol là một dung môi được ưa thích sử dụng để tách các hợp chất polyphenol vì nó có tính
chất hóa học tương tự với methanol mà lại ít độc hại (Esther và cộng sự, 2003) 32.
Ethanol là dung môi phân cực mạnh nên dễ hòa tan các chất phân cực, ethanol có độ nhớt tương đối cao 1,20 cp sẽ làm cản trở dung môi thấm vào nguyên liệu nhưng lại có sức căng bề mặt khá nhỏ 20,03 dyn/cm nên hòa tan polyphenol dễ dàng. Mặc khác, độ nhớt và sức căng bề mặt của ethanol thấp hơn nước nên khi chiết trong dung môi ethanol thì dung môi này càng dễ thấm vào nguyên liệu,
không cản trở quá trình khuếch tán chất cần thiết hơn khi chiết trong nước 1.
Trong nghiên cứu này, chúng tôi thấy rằng nồng độ ethanol 30% là thích hợp để chiết các hợp chất polyphenol từ rong mơ. Khi tăng nồng độ ethanol lên cao hơn 30% thì hiệu quả chiết giảm xuống rõ rệt. Kết quả này có thể được giải thích như sau: Khi tăng nồng độ ethanol thì độ nhớt của ethanol càng tăng cao nên sẽ làm cản trở dung môi thấm vào nguyên liệu, do đó khả năng hòa tan các hợp chất polyphenol thấp.
Hình 3.1. Ảnh hưởng của nồng độ dung môi ethanol đến hàm lượng polyphenol tổng
Hình 3.2 trình bày kết ảnh hưởng của nồng độ của dung môi chiết đến tổng năng lực khử của rong mơ. Năng lực khử được đánh giá bằng độ hấp thụ ở bước sóng 700 nm, độ hấp thụ càng lớn chứng tỏ năng lực khử càng cao. Kết quả cho thấy nồng độ dung môi ethanol ảnh hưởng rõ ràng đến tổng năng lực khử.
Khi nồng độ dung môi tăng từ 0 đến 30% thì năng lực khử tăng từ 0,74 đến 0,91. Tuy nhiên, khi tiếp tục tăng nồng độ dung môi từ 30 đến 100% thì năng lực khử giảm và năng lực khử của dịch chiết thu được bằng dung môi 100% ethanol là
thấp nhất chỉ là 0,11 (p 0,05). Như vậy, kết quả này tương tự với sự ảnh hưởng
của nồng độ dung môi chiết đến hàm lượng polyphenol tổng số.
Hình 3.2. Ảnh hưởng của nồng độ dung môi ethanol đến tổng năng lực khử
(Chữ cái trên cột khác nhau chỉ ra sự khác nhau có ý nghĩa thống kê p < 0,05)
Ảnh hưởng của nồng độ dung môi chiết ethanol đến khả năng khử gốc tự do DPPH của rong mơ được trình bày ở hình 3.3. Kết quả cũng cho thấy nồng độ dung môi ethanol ảnh hưởng đáng kể đến khả năng khử gốc tự do DPPH. Cụ thể, dịch chiết thu được khi sử dụng 30% ethanol cho khả năng khử gốc tự do DPPH
(94,17%) là cao nhất (p 0,05), tiếp theo là 0% ethanol (58,68%), 70% ethanol
Như vậy, từ kết quả này có thể kết luận rằng, sự ảnh hưởng của nồng độ dung môi chiết đến hàm lượng polyphenol tổng số và khả năng chống oxy hóa là tương tự nhau. Do đó, các hợp chất polyphenol có thể là thành phần chính đóng góp vào khả năng chống oxy hóa của dịch chiết rong mơ.
Hình 3.3. Ảnh hưởng của nồng độ dung môi ethanol đến khả năng khử gốc tự do
DPPH (Chữ cái trên cột khác nhau chỉ ra sự khác nhau có ý nghĩa thống kê p < 0,05)