M Ở ĐẦU
2.3.2.2 Thời gian nuôi cấy
- Hoạt hóa giống GS115/ phyAI và GS115/ phyB trong môi trường YPD lỏng trong 24 giờ.
- Hút dịch nuôi cấy trong môi trường YPD-lỏng cấy vào môi trường BMGY (với tỷ lệ giống như đã được khảo sát ở mục 3.2.1), nuôi lắc trong 24h.
- Giống sau khi được nuôi trong môi trường BMGY, ly tâm và chuyển vào môi trường BMMY, nuôi lắc trong 5 ngày. Có bổ sung methanol với lượng 2%(v/v) mỗi 24giờ.
- Sau thời gian nuôi cấy trong môi trường BMMY, 24 giờ, 48 giờ, 72 giờ, 96 giờ, 120 giờ đều lấy dịch nuôi cấy đi ly tâm và lọc. Lấy dịch lọc đem đi xác định hàm lượng protein và hoạt độ chung của phytase. Xác định thời gian nuôi cấy thích hợp nhất, cho hoạt độ phytase cao nhất.
2.3.2.3 Môi trường nuôi cấy
- Hoạt hóa giống GS115/ phyAI và GS115/ phyB trong môi trường YPD lỏng trong 24 giờ.
- Hút dịch nuôi cấy trong môi trường YPD-lỏng, cấy vào môi trường BMGY và môi trường Nước giá-Glycerol, nuôi lắc trong 24 giờ.
- Giống sau khi được nuôi trong môi trường BMGY và môi trường Nước giá-Glycerol, ly tâm và chuyển môi trường BMMY và môi trường Nước giá-Methanol, nuôi lắc trong 4 ngày. Có bổ sung methanol với lượng 2%(v/v) mỗi 24 giờ.
- Sau thời gian nuôi cấy trong môi trường BMMYvà môi trường Nước giá-Methanol, dịch nuôi cấy được ly tâm, lọc. Lấy dịch lọc đem đi xác định hàm lượng protein và hoạt độ chung
Luận Văn Thạc Sĩ Trang62 Vật liệu &Phương pháp
phytase. Vẽ đồ thị tương quan giữa hai loại môi trường và hoạt độ chung phytase để xác định môi trường nào sẽ cho hoạt độ phytase cao.