Cao cồn tổng và các cao phân đoạn được tiến hành định lượng phenolic tổng bằng phương pháp Folin – Ciocalteu.
9 Lập phương trình đường chuẩn acid gallic.
Bảng 3.10: Mối tương quan giữa hàm lượng acid gallic và giá trị OD 758 nm.
Hàm lượng acid gallic (μg) OD trung bình (758 nm)
10 0,132 20 0,285 30 0,410 40 0,582 50 0,685
49
Hình 3.2: Đường chuẩn acid gallic.
9 Định lượng phenolic tổng trong cao cồn tổng và cao phân đoạn
Dựa vào đường chuẩn acid gallic để xác định hàm lượng phenolic tổng có trong các phân đoạn cao. Phương trình hồi quy: y = 0,014x – 0,0021 R2 = 0,9955
Bảng 3.11: Hàm lượng phenolic tổng trong cao cồn tổng và cao phân đoạn
Mẫu Khối lượng cao (mg) OD 758 nm Hàm lượng phenolic tổng (μg GAE/mg) Cao tổng 0,4 0,483 108,011 Cao eter 0,4 0,221 44,528 Cao cloroform 0,4 0,522 110,914
Cao etyl acetat 0,1 0,309 271,822
Cao nước 0,4 0,408 90,881
Hàm lượng phenolic tổng trong cao cồn tổng là 108,011 μg GAE/mg (μg
đượng lượng acid gallic/ml), chiếm khoảng 8,6 % khối lượng cao. Kết quả cho thấy lá Chùm Ngây có chứa hàm lượng phenolic khá cao, vì vậy có tiềm năng là nguồn chất chống oxy hóa tự nhiên dồi dào.
50
Theo kết quả định lượng, trong các cao phân đoạn, hàm lượng phenolic tập trung nhiều nhất trong cao etyl acetat, 271,822 μg GAE/mg, chiếm khoảng 22,2% khối lượng cao. Đối chiếu với kết quả định tính hóa học phân đoạn có thể thấy các hợp chất có trong phân đoạn này là flavonoid, coumarin là những hợp chất thuộc nhóm phenolic. Vì thế, hàm lượng phenolic tổng trong phân đoạn etyl acetat cao nhất.
Phân đoạn cloroform có hàm lượng phenolic tổng cao thứ hai, 110,914 μg GAE/mg. Phân đoạn này cũng chứa khá nhiều các hợp chất phenolic, tuy nhiên các hợp chất phenolic này có độ phân cực kém hơn so với hợp chất phenolic trong cao etyl acetat. Dựa vào kết quả định tính chóa học các phân đoạn có thể dự đoán chúng là các anthraquinon và flavonoid dạng tự do.
Cao eter có hàm lượng phenolic tổng thấp nhất, 44,528 μg GAE/mg. Như
vậy ngoài những thành phần như chlorophyl, tạp, chất béo, phân đoạn này cũng có chứa một lượng ít các hợp chất phenolic kém phân cực. Các hợp chất này có thể là flavonoid, antraquinon, coumarin ở dạng tự do.