Thu cao toàn phần bằng phương pháp chiết ngâm dầm, với dung môi chiết là cồn 96%, theo tỉ lệ 6 : 1.
Cân 10 kg lá Chùm ngây tươi cho vào bình ngấm có lót bông ởđáy. Rót dung môi vào bình cho đến xấp xấp bề mặt của mẫu. Giữ yên ở nhiệt độ phòng trong một ngày cho dung môi xuyên thấm vào cấu trúc tế bào thực vật và hòa tan các hợp chất tự nhiên. Thu dịch chiết và tiếp tục rót dung môi mới vào bình. Gộp dịch chiết lại,
26
đem cô giảm áp để thu hồi dung môi và có được cao toàn phần (cao cồn tổng) [5], [10].
2.2.2.2 Chiết cao phân đoạn từ cao toàn phần [5], [10]
Cao cồn tổng ban đầu chứa hầu hết các hợp chất hữu cơ từ phân cực đến kém phân cực. Sử dụng kỹ thuật chiết lỏng – lỏng để phân chia cao cồn tổng ban đầu thành những phân đoạn có tính phân cực khác nhau.
Việc chiết lỏng – lỏng được thực hiện trong bình lắng gạn, ởđiều kiện nhiệt độ phòng.
Hòa tan cao cồn tổng cồn vào một lượng tối thiểu cồn, sau đó rót thêm một lượng lớn nước.
Lắc phân đoạn phần dịch này lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dần: Dietyl eter, Cloroform, Etyl acetat. Tiến hành lắc cho đến khi không còn chất hòa tan vào dung môi thì mới chuyển sang dung môi phân cực hơn.
Thu các phân đoạn, đem cô giảm áp để loại dung môi. Ta thu được 4 phân đoạn cao: cao Eter, cao Cloroform, cao Etyl acetat và phần dịch lắc còn lại sau cùng là cao nước [5], [10].
Tóm tắt quay trình theo sơđồ trong hình 2.1.
Các phân đoạn cao thu được sẽđược khảo sát các thành phần hóa học và thử hoạt tính chống oxi hóa nhằm chọn ra phân đoạn có tiềm năng cao nhất. Phân đoạn này sẽ tiếp tục được phân tích để xác định và tách chiết ra các hợp chất có hoạt tính chống oxi hóa.