II. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1 Nguyên liệu
8. Phương pháp bổ sung chất chống oxi hĩa vào dịch trích
Cân chính xác 5g bột trà, cho vào erlen 250, thêm vào 100 ml methanol. Tiến hành trích ly theo điều kiện tối ưu thu được. Tiến hành ly tâm hỗn hợp này để thu được phần dịch trích phía trên. Tiến hành phân tích hàm lượng chất chống oxi hĩa và polyphenol tổng của dịch trích này. Đem tồn bộ phần dịch trích cho vào bình cơ quay rồi đem cơ quay đến gần cạn hồn tồn. Lấy mẫu để xác định hàm lượng chất chống xi hĩa, polyphenol tổng để tính tốn tìm ra lượng thích hợp cho vào dầu.
Cho vào mỗi becher (loại 100ml) 50 ml mỡ cá basa. Dùng micropipette hút phần dịch trích sau khi cơ quay cho vào dầu ở nồng độ lần lượt là 400; 800;1200; 1600 ppm chất chống oxi hĩa. Mỗi nồng độ sẽ cĩ 2 mẫu giống nhau. Chuẩn bị thêm 2 mẫu đối chứng là mỡ cá chứa BHT nồng độ 200 ppm và 2 mẫu trắng là mỡ cá basa. Cho thêm dung mơi vào các mẫu dầu theo nguyên tắc thể tích dung mơi cho vào các mẫu dầu đều bằng nhau, kể cả mẫu trắng. Sau đĩ, tất cả các mẫu dầu được sục khí Nitơ rồi dùng màng plastic bọc kín miệng becher lại. Đem các mẫu này đi khuấy từ ở khoảng 55-600C trong thời gian 15 phút với tốc độ 300 vịng/phút để hịa tan hồn tồn chất chống oxi hĩa cùng dung mơi vào dầu.
Sau khi khuấy từ xong, lấy từng mẫu đem phân tích chỉ số acid và peroxide ban đầu rồi đem tất cả các mẫu cho vào tủ ấm ở 55oC. Thời gian ủ này kéo dài 8 ngày. Mỗi ngày đều lấy mẫu đo chỉ số acid và chỉ số peroxide. Cách xác định chỉ số acid và peroxide như bên dưới.