IV. MỘT SỐ NGHIÊN CỨU MỚ
b/ Nghiên cứu một số đặc điểm nuôi cấy của các chủng nấm men được lựa chọn
Các thí nghiệm này phục vụ cho mục đích nghiên cứu tạo dạng “giống khởi động” (starter culture) cho quá trình xử lý bã thải hoa quả giàu cellulose từ các chủng nấm men được lựa chọn
Ảnh hưởng của pH nuôi cấy ban đầu
Các chủng nấm men được nuôi cấy trên môi trường chứa CMC với các thang pH từ 3 đến 6. Nuôi cấy lắc 220 vòng/phút, ở 300C. Sau 3 ngày nuôi cấy, xác định hoạt tính CMC-aza của các chủng nấm men
Kết quả cho thấy các chủng đều có khả năng tổng hợp enzym cellulase trong dải pH môi trường nuôi cấy là 4,0 - 6,0 nhưng pH tối ưu nhất là 5,0.
Ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy
Các chủng nấm men được nuôi cấy lắc trong môi trường chứa CMC, pH 5,0; 220 vòng/phút ở các thang nhiệt độ từ 200C - 450C. Sau 3 ngày xác định hoạt tính CMC-aza. men.
Kết quả cho thấy các chủng nấm men được chọn để nghiên cứu đều không phải là các chủng nấm men ưa nhiệt. Chúng phát triển thích hợp nhất ở nhiệt độ 30 - 350C tùy từng chủng. Ở nhiệt độ cao (40 - 450C), hoạt tính của các chủng đều giảm.
Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy
Vài chủng được nuôi cấy lắc ở 300C ,vài chủng khác được nuôi ở 350C; pH 5,0. Sau mỗi ngày xác định hoạt tính phân giải CMC, đồng thời xác định sinh khối tế bào thông qua hàm lượng protein
Sau ngày nuôi cấy đầu tiên, các chủng được nuôi ở 350C đã đạt được hoạt tính lớn nhất. Các chủng được nuôi ở 300C đạt được hoạt tính cao nhất bắt đầu từ ngày nuôi cấy thứ hai. Qua ngày thứ ba, hoạt tính của tất cả các chủng đều giảm dần có thể do sinh trưởng của nấm men giảm dần, nguồn dinh dưỡng cạn dần hoặc do cellulase bị thủy phân. Như vậy thời gian nuôi cấy có ảnh hưởng rõ rệt đến khả năng tổng hợp enzym cellulase.
Các kết quả nghiên cứu trên đây đã lần lượt trả lời được các câu hỏi: ở điều kiện nhiệt độ, pH nào, thời gian nuôi cấy bao lâu để hoạt tính phân giải cellulose của các chủng nấm men cao nhất đồng thời đạt được sinh khối tế bào cao nhất. Các kết quả này rất quan trọng trong việc sản xuất “giống khởi động”, là tập hợp của các chủng nấm men được tuyển chọn, dùng trong chế biến thức ăn gia súc từ phế thải của các nhà máy chế biến hoa quả, đặc biệt là nhà máy chế biến dứa.