- Thìa nhựa 1 2ml để trải chất hấp phụ lên tấm kính thành một lớp mỏng đồng
d)Pha tĩnh là bột canxi cacbonat, pha động là hệ dung môi: toluen axeton.
Cách tiến hành tương tự phần trên. Khi cho dung môi là 100% toluen chúng tôi thấy chỉ có vùng chất màu vàng di chuyển khá nhanh xuống dưới còn vùng chất màu xanh di chuyển rất chậm, chúng tôi cho rằng vùng chất màu vàng là caroten do chất này không phân cực nên hấp phụ yếu với canxi cacbonat phân cực đồng thời tan tốt trong toluen là dung môi không phân cực nên di chuyển
xanthophyl chưa tách khỏi nhau do chúng phân cực hơn nên bị canxi cacbonat hấp phụ mạnh hơn và di chuyển chậm. Sau đó chúng tôi cũng tăng dần sự phân cực của dung môi bằng cách mỗi thí nghiệm tăng 5% thể tích axeton, kết quả khi tỷ lệ axeton càng cao vùng chất màu xanh di chuyển càng nhanh như vậy quá trình tách ở đây chủ yếu theo cơ chế hấp phụ. Kết quả với tỷ lệ thể tích toluen - axeton (9,5:0,5) thì quá trình tách tối ưu với thời gian 20 phút tách được 3 vùng màu theo thứ tự từ dưới lên là: màu vàng, màu xanh tươi và màu xanh vàng.
Theo các tài liệu [5, 9] chúng tôi cho rằng các vùng màu đó lần lượt là caroten (vàng), chlorophyl a (xanh tươi), chlorophyl b (xanh vàng), các xanthophyl có thể vẫn trong vùng chất chứa chlorophyll b.
Hình 3.4. Tách chất màu trong lá xanh với pha tĩnh là bột canxi cacbonat pha động là toluen – axeton (9,5:0,5)
Như vậy ta dễ dàng nhận thấy ete dầu hoả tách tốt hơn toluen. Các trường hợp tỷ lệ axeton cao hơn tách không hiệu quả do khi dung môi có độ phân cực cao quá chlorophyl và các xanthophyl di chuyển nhanh gần với tốc độ của caroten nên không tách được.