Các ph−ơng pháp đo lactat máu đã đ−ợc phát kiến từ những năm đầu của thế kỷ 20. Nhiều ph−ơng pháp cổ điển sử dụng permanganate hay manganese dioxide để oxy hoá lactat thành acetaldehyde và hoặc CO2 hay CO. Sau đó acetaldehyde có thể đ−ợc phát hiện bằng spectophtometry, bằng cách hiệu giá hay bằng sắc ký khí (gas chromatography). Carbon monocyt có thể đ−ợc phát hiện bằng cách hiệu giá hay phân tích đo khí, CO2 định l−ợng bằng cách đo khí. Các ph−ơng pháp này t−ơng đối chính xác, song đều mất nhiều công sức và thời gian không thích hợp sử dụng trên lâm sàng.
trong hầu hết các phòng xét nghiệm lâm sàng. Ph−ơng pháp này dựa trên phản ứng sinh hoá của lactat và NAD để tạo thành pyruvat và NADH, với NADH đ−ợc phát hiện hoặc bằng ph−ơng pháp động học hay quang phổ (end - poit spectophotometry) ở b−ớc sóng 340 nm. Một ph−ơng pháp có tên Aca sử dụng lactat dehydrogenase để xúc tác quá trình chuyển lactat thành pyruvat với sự chuyển đồng thời NAD thành NADH. Để thúc đẩy phản ứng hoàn thành, cho thêm hydralazin để bắt pyruvat. Hấp thụ NADH đ−ợc xác định ở 340 nm và 383 nm, pH đ−ợc đệm ở 370C bằng Tris tại pH 8,55. Ph−ơng pháp cần 40 μl huyết t−ơng, khoảng 7 phút để hoàn thành kết quả và có dạng tuyến tính tới khoảng 20 mmol/l. Do có tính chính xác và độ tin cậy rất cao nên ph−ơng pháp này th−ờng đ−ợc các ph−ơng pháp khác đem so sánh với nó.
Gần đây, ph−ơng pháp Slide chất phản ứng nhiều lớp khô (dry multilayer slide methodology) đối với lactat đã đ−ợc đ−a vào sử dụng của hãng Kadak Ektachem, xét nghiệm cần 10 μl huyết t−ơng và sử dụng cả lactat oxidase (LO) nh− enzym chuyển đổi và peroxidase (PO) để tạo thành sản phẩm màu đo đ−ợc ở b−ớc sóng 540 nm. Ph−ơng pháp này cho dạng tuyến tính tới khoảng nồng độ 15 mmol/l và cho kết quả trong khoảng 6 phút.
Một ph−ơng pháp phân tích lactat xuất hiện với sự phát kiến ra đầu nhận cảm điện hoá học đối với lactat. Đo lactat trong máu toàn phần trong vòng 2-3 phút, ph−ơng pháp này rất hữu ích trong theo dõi các ca cấp cứu, và th−ờng đ−ợc làm cùng với xét nghiệm khí máu.
Bằng cách sử dụng một ph−ơng pháp cải tiến của đầu cảm nhận enzym điện hoá học đ−ợc phát minh lúc đầu bởi Williams và cộng sự, Racine và cộng sự sáng chế ra máy phân tích lactat trên 50 μl máu hoà loãng, huyết thanh hay dịch não tuỷ trong vòng 3 phút. Việc đo đạc đ−ợc dựa trên oxy hoá lactat thành pyruvat với sự có mặt của cytochrome B2 và ion hexacyanoferrate. Dòng điện phát sinh trong phản ứng cuối cùng có liên quan với nồng độ lactat trong
dung dịch. Ph−ơng pháp cho kết quả tuyến tính tới 9 mmol/l và đ−ợc so sánh t−ơng đối tốt với ph−ơng pháp enzym quang phổ.
Một bộ phận nhận cảm lactat đ−ợc Clark và cộng sự phát minh cho phép đo lactat trực tiếp trong máu toàn phần trong khoảng thời gian <1 phút và trên mẫu bệnh phẩm 10μl. Bộ phận nhận cảm là một điện cực enzym cực phổ (polarographic enzym electrode) làm phát sinh một dòng điện liên quan tuyến tính với nồng độ lactat. Máy cho kết quả chính xác với khoảng giao động ± 10% và tuyến tính trong khoảng giá trị 10 mmol/l, một chênh lệch âm khoảng 5% đ−ợc ghi nhận khi so sánh với ph−ơng pháp enzym quang phổ. Sự chênh lệch này không đ−ợc coi là có ý nghĩa lâm sàng.
Mặc dù các máy phân tích trên cho thấy một tiến bộ hữu dụng trong đánh giá lactat, trong khi sử dụng máy phân tích máu toàn phần hoà loãng có thể gây ra các khó khăn nh− các biến đổi do hematocrit hay tính t−ơng thích với kết quả trên huyết t−ơng. Mellen và cộng sự đã phát minh ra một điện cực enzym đo lactat trong máu toàn phần không hoà loãng. Điện cực này giúp khắc phục nh−ợc điểm của ph−ơng pháp đo máu toàn phần hoà loãng.
Gần đây nhất, nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng định l−ợng lactat trong máu toàn phần là tốt hơn, nó chỉ cần lấy ít máu, cho kết quả nhanh và có thể tiến hành cùng với xét nghiệm khí máu.
Sự khác biệt giữa giá trị lactat của máu động mạch với máu tĩnh mạch
Giới hạn tham khảo đ−ợc báo cáo đối với lactat máu động mạch khoảng 0,3 – 1,5 mmol/l; đối với máu tĩnh mạch khoảng 1,8 mmol/l.
Qua nghiên cứu của Weil MH và cộng sự (1987) theo dõi lactat máu động mạch, tĩnh mạch, tĩnh mạch trung tâm và động mạch phổi ở 35 BN nhận thấy sự chênh lệch giá trị lactat máu lấy từ 4 vị trí khác nhau từ 0,029- 0,03 mmol/l [73]. Theo tác giả Murdoch I.A và cộng sự (1994) nghiên cứu lactat máu lấy từ động mạch và tĩnh mạch phổi thấy giá trị chênh lệch nhau không nhiều 0,02
mmol/l (0,2 - 0,24 mmol/l). Nh− vậy để xét nghiệm lactat máu, ta có thể lấy máu động mạch, tĩnh mạch hoặc từ tĩnh mạch trung tâm cũng không có sự khác biệt [50]