Nguyên tắc: Thử nghiệm này nhằm xác định khả năng vi sinh vật sử dụng các nguồn carbonhydrat cĩ mặt trong mơi trƣờng, khả năng sinh H2S, khả năng sinh gas.
Cơ sở sinh hĩa: Mơi trƣờng KIA là mơi trƣờng rắn chứa lactose 1%, glucose 1%, TSI tƣơng tự nhƣng chứa thêm sucrose 1%. Cĩ 3 trƣờng hợp xảy ra khi nuơi cấy vi sinh vật trên mơi trƣờng KIA :
- Chỉ lên men glucose, lên men c ả hai loại đƣờng và khơng lên men cả hai nguồn trên. Nếu vi sinh vật chỉ sử dụng glucose sau 24 giờ nuơi cấy làm phần nghiêng cĩ pH kiềm vì sau khi sử dụng hết lƣợng glucose thì vi sinh vật sử dụng pepton trong mơi trƣờng làm giải phĩng NH3 nên mơi trƣờng phần nghiêng cĩ pH kiềm, ở phần sâu mơi trƣờng cĩ sự lên men kỵ khí glucose các sản phẩm thu đƣợc là acid hữu cơ làm mơi trƣờng pH acid do trong mơi trƣờng cĩ chứa chất chỉ thị pH (thƣờng là phenol red) thì phần nghiêng của mơi trƣờng sẽ cĩ màu đỏ và phần sâu cĩ màu vàng.
- Nếu vi sinh vật sử dụng cà hai nguồn đƣờng nên phần nghiêng và sâu đều cĩ tính acid nên cả mơi trƣờng màu vàng.
- Trong trƣờng hợp cả hai nguồn carbon khơng đƣợc sử dụng thì nguồn pepton đƣợc sử dụng và làm mơi trƣờng pH kiềm nên cả mơi trƣờng cĩ màu đỏ.
Trong mơi trƣờng nếu cĩ tạo thành H2S thì mơi trƣờng cĩ màu đen , cĩ sinh gas thì gas sẽ tích tụ làm vỡ thạch hoặc tạo thành các bọt khí bên trong.
Đối với mơi trƣờng TSI thì các phản ứng xảy ra tƣơng tự, tuy nhiên trong trƣờng hợp cả phần nghiêng và phần sâu cĩ hiện tƣợng acid là do một trong hai hoặc cả hai nguồn sucrose và lactose đƣợc sử dụng. Trong trƣờng hợp này c ần làm thêm các thử nghiệm trên mơi trƣờng lactose và sucrose.
Đọc kết quả: Mơi trƣờng phần nghiêng màu đỏ, phần sâu màu vàng sử dụng glucose; phần nghiêng và phần sâu màu vàng khơng sử dụng các nguồn đƣờng trên; phần nghiêng và sâu màu vàng sử dụng các nguồn đƣờng trên.