*Phát hiện một số tác nhân lây nhiễm qua đ−ờng truyền máu:
- Xét nghiệm phát hiện HBsAg, anti-HCV, anti-HIV đ−ợc tiến hành tại phòng sàng lọc Viện Huyết học – Truyền máu Trung −ơng, sử dụng kỹ thuật
ELISA bằng dàn máy tự động với thuốc thử của h{ng Bio-Rad(Pháp). Các xét nghiệm này đ−ợc làm định kỳ 6 tháng/lần.
- Xét nghiệm tìm kháng thể kháng giang mai trong huyết thanh đ−ợc tiến hành tại phòng sàng lọc Viện Huyết học – Truyền máu Trung −ơng, sử dụng kỹ thuật RPR. Kỹ thuật này dựa trên nguyên lý: Hạt latex có gắn kháng nguyên Cardiolipin (một thành phần bình th−ờng của mô) sẽ bị ng−ng kết nếu trong huyết thanh, huyết t−ơng của ng−ời cho máu hoặc bệnh nhân có kháng thể kháng giang maị Đây là kỹ thuật rẻ tiền, có độ đặc hiệu và độ nhạy cao, có thể dùng cả huyết thanh hoặc huyết t−ơng, cho kết quả nhanh nhận định đ−ợc bằng mắt th−ờng [17]. Xét nghiệm này đ−ợc làm cho các bệnh nhân Hemophilia vào điều trị tại Trung tâm Hemophilia và khoa C7 Viện Huyết học - Truyền máu TW từ tháng 1/2008 đến hết tháng 6/2008, những bệnh nhân này đ{ đ−ợc truyền máu và chế phẩm máu từ đợt điều trị tr−ớc.
*Xét nghiệm kháng thể kháng VIII bằng ph−ơng pháp Bethesda:
Xét nghiệm này đ−ợc tiến hành tại phòng Đông máu Viện Huyết học- Truyền máu Trung −ơng.
Cách lấy máu:
Máu tĩnh mạch đ−ợc chống đông bằng dung dịch citrat natri 3,8% với tỷ lệ máu/ chống đông = 9/1, ly tâm ngay 2500g trong 15 phút để tách lấy huyết t−ơng nghèo tiểu cầu, cho vào ống nhựa , bảo quản ngay ở tủ lạnh -300C cùng với huyết t−ơng chứng.
Nguyên lý:
Khi thêm yếu tố VIII vào huyết t−ơng có chứa kháng thể kháng VIII và ủ hỗn hợp trong một khoảng thời gian thì yếu tố VIII sẽ dần bị trung hoà.
Nếu hỗn hợp đ−ợc ủ trong vòng 2 giờ ở 370C thì độ mạnh của kháng thể có thể xác định bằng đơn vị t−ơng ứng với l−ợng yếu tố VIII cho vào bị trung hòạ Nguồn yếu tố VIII thêm vào là pool huyết t−ơng của nhiều ng−ời bình th−ờng.
- Mẫu bệnh: thêm 0,2 ml huyết t−ơng bệnh nhân vào 0,2 ml pool huyết t−ơng bình th−ờng.
- Mẫu chứng: thêm 0,2 ml huyết t−ơng không có yếu tố VIII hoặc imidazol vào 0,2 ml pool huyết t−ơng bình th−ờng.
- Lắc đều rồi ủ ở 370C trong 2giờ sau đó định l−ợng yếu tố VIIỊ Phân tích kết quả:
Nồng độ yếu tố VIII còn lại trong mẫu huyết t−ơng của bệnh nhân đ−ợc thể hiện bằng phần trăm so với nồng độ yếu tố VIII còn lại trong mẫu chứng. Một đơn vị Bethesda là l−ợng kháng thể có thể trung hoà 50% của 1 đơn vị yếu tố VIII thêm vào ủ 2 giờ và ở 370C.
Nếu nồng độ yếu tố VIII còn lại trong huyết t−ơng của bệnh nhân >50% thì bệnh nhân đó không có kháng VIIỊ Nếu nồng độ yếu tố VIII còn lại trong huyết t−ơng bệnh nhân ≤ 50% thì bệnh nhân đó có kháng thể kháng VIII và cần pha lo{ng huyết t−ơng bệnh nhân để xác định hiệu giá kháng thể [53], [67].
Ví dụ: Huyết t−ơng bệnh nhân pha lo{ng 1/8 +pool huyết t−ơng bình th−ờng, sau ủ nồng độ yếu tố VIII còn lại là 50% = 1đơn vị Bethesda (BU) thì số đơn vị ức chế là 1x8 = 8 BỤ