4. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài
2.4.5.Nghiên cứu thời gian thoát vỏ và thời gian sống của Miracidium trong
trong nước
2.4.5.1. Nghiên cứu thời gian Miracidium thoát vỏ trong nước
* Thắ nghiệm 3: Theo dõi thời gian Miracidium thoát vỏ trong nước
Bố trắ thắ nghiệm gồm 3 lô (I, II, III), mỗi lô gồm 5 đĩa petri đƣờng kắnh 20 cm, cao 3 cm (có dán nhãn ghi thời gian bắt đầu thắ nghiệm). Các đĩa petri này chứa chứa nƣớc thu thập từ các khu vực chăn thả trâu, bò. Xác định pH của nƣớc (bằng giấy quỳ). Cho số lƣợng lớn trứng sán lá gan vào mỗi đĩa petri.
Hàng ngày, khuấy đều và dùng công tơ gút hút nƣớc có trứng sán lá gan ở mỗi đĩa petri đặt trên phiến kắnh (mỗi mẫu lấy khoảng 20 - 30 trứng), soi
Số hóa bởi trung tâm học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
dƣới kắnh hiển vi để theo dõi sự phát triển của trứng sán lá gan và xác định thời gian Miracidium thoát vỏ trong nƣớc kể từ khi cho trứng vào môi trƣờng nƣớc.
2.4.5.2. Nghiên cứu thời gian Miracidium sống trong nước (khi không gặp ký chủ trung gian)
* Thắ nghiệm 4: Theo dõi thời gian sống của Miracidium trong nước (khi không gặp ký chủ trung gian)
Tiếp tục theo dõi các mẫu trong thắ nghiệm theo dõi thời gian
Miracidium thoát vỏ trong nƣớc để lọc riêng các Miracidium mới thoát vỏ và
xác định thời gian sống của chúng trong nƣớc.
Khi trứng sán lá gan chuẩn bị bật nắp (Miracidium trong những trứng này đã hoàn chỉnh và co rút mạnh trong vỏ trứng), chúng tôi lọc riêng những trứng đó để theo dõi bằng cách: dùng công tơ gút hút riêng những trứng đó sang 1 phiến kắnh, đƣa lên kắnh hiển vi kiểm tra lại để xác định chắnh xác đó là những quả trứng sắp bật nắp, rồi cho những trứng đó vào 1 đĩa petri (đƣờng kắnh 20 cm, cao 3 cm) có chứa nƣớc. Theo dõi thƣờng xuyên để xác định thời gian Miracidium thoát vỏ. Sau khi thoát vỏ ra môi trƣờng nƣớc, quan sát dƣới kắnh hiển vi thấy Miracidium di chuyển tự do rất nhanh trong nƣớc (quan sát bằng kắnh lúp hoặc mắt thƣờng trên phiến kắnh thấy Miracidium nhƣ những hạt bụi trắng di chuyển trong nƣớc). Những Miracidium cùng thoát vỏ trong một thời điểm đƣợc chúng tôi dùng công tơ gút hút và tập trung chúng vào 1 đĩa petri (đƣờng kắnh 10 cm, cao 2 cm) có chứa nƣớc. Kiểm tra tình trạng sống, chết của Miracidium ở mỗi đĩa petri (soi dƣới kắnh hiển vi và kiểm tra dƣới kắnh lúp). Từ đó xác định đƣợc thời gian sống của Miracidium trong nƣớc khi chƣa gặp ký chủ trung gian.
Trong thắ nghiệm, chúng tôi thấy: khi mới thoát vỏ, Miracidium bơi rất nhanh trong môi trƣờng nƣớc nhờ lớp lông mao bao phủ toàn cơ thể. Khi bơi trong nƣớc, Miracidium duỗi cơ thể dài ra, còn khi cơ thể co lại thì Miracidium
Số hóa bởi trung tâm học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Miracidium sẽ chết với triệu chứng: bơi lờ đờ, biến đổi hình dạng và rữa dần. Từ đó, chúng tôi xác định đƣợc thời gian tồn tại của Miracidium trong nƣớc.