3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài
1.8.Một số nghiên cứu về bệnh cúm gia cầm
Trước diễn biến phức tạp của bệnh cúm gia cầm, Viện Thú y Quốc gia đã hợp tác với Trung tâm kiểm soát dịch bệnh Hoa Kỳ (CDC) nhằm tăng cường năng lực, trang thiết bị và kỹ thuật phát hiện, phân lập và giám định virus. Đến cuối năm 2003, Viện Thú y đã có đủ khả năng về con người và vật liệu để xác định chủng H5 virus cúm gia cầm.
* Kết quả nghiên cứu phân lập virus
Với sự giúp đỡ của CDC, chủng virus cúm gia cầm lưu hành ở Việt Nam được xác định là H5N1 và công bố dịch vào ngày 8/1/2004.
Khi phân tích các mẫu virus cúm thông qua giải mã gene, Nguyễn Tiến Dũng (2004) [7] cho thấy: Dịch cúm gia cầm tại Việt Nam là do một loại virus duy nhất (cả về không gian và thời gian gây ra). Có nghĩa là dịch có nguồn gốc
từ một ổ dịch ban đầu sau đó lây ra khắp cả nước. Virus cúm gia cầm Việt Nam có nguồn gốc từ các virus cúm lưu hành ở Trung Quốc.
* Kết quả nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học
Năm 2004, khi dịch cúm xảy ra, tác giả Lê Văn Năm đã có nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ, các biểu hiện lâm sàng, đặc điểm bệnh lý ở gà, ngan, vịt, gà tây, chim vẹt nhằm giúp cho việc chẩn đoán được thuận lợi hơn.
Các nghiên cứu khi khảo sát dịch tễ của 3 đợt dịch đã chỉ ra rằng nguồn gốc các ổ dịch trong vụ dịch đầu năm 2004 là do sự di truyền của đàn gia cầm giống, còn đợt dịch thứ 2 là từ ngan sau đó đến vịt gây ra và ở đợt dịch thứ 3 tại Tây Nam Bộ là do dịch địa phương do bán gia cầm và vit mang trùng (Nguyễn Tiến Dũng và cs, 2005) [8].
Một nghiên cứu khác tại đồng bằng Bắc Bộ cho thấy tỷ lệ gà có huyết thanh dương tính ở hộ chăn nuôi là 9,4%, trong khi đó ở hộ chăn nuôi gà lẫn vịt là 69,5%. Điều đó đồng nghĩa với nguy cơ mắc cúm gia cầm của gà nuôi lẫn thủy cầm cao gấp 8 lần so với nuôi riêng biệt.
Chƣơng 2
NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tƣợng nghiên cứu
Nghiên cứu được tiến hành trên các đối tượng là các loại gà, vịt, ngan nuôi ở các phương thức khác nhau thuộc quy mô tỉnh Bắc Giang.
2.2. Nội dung nghiên cứu
- Một số đặc điểm dịch tễ của bệnh cúm gia cầm tại tỉnh Bắc Giang từ năm 2004 đến nay.
- Xác định những biến đổi bệnh lý đại thể ở gà mắc bệnh cúm gia cầm H5N1. - Xác định những biến đổi bệnh lý vi thể ở gà mắc bệnh cúm gia cầm H5N1.
2.3. Vật liệu dùng trong nghiên cứu
Các trang thiết bị, cơ sở vật chất của phòng Bệnh lý - Trung tâm chẩn đoán thú y Trung ương.
- Mẫu bệnh phẩm được sử dụng trong nghiên cứu là phổi, tim, gan, thận…. của gà mắc bệnh.
- Hoá chất sử dụng làm tiêu bản vi thể, trong nuôi cấy tế bào, nhuộm hóa miễn dịch: formol 10%, cồn, xylen, parafin, thuốc nhuộm haematoxylin, thuốc nhuộm eosin...
- Tủ lạnh, tủ ấm 370C, tủ sấy...
- Máy đúc tự động, máy cắt Microton, máy PCR, máy chụp ảnh gel. - Các dụng cụ khác gồm: Lam kính, kính hiển vi, găng tay…
2.4. Phƣơng pháp nghiên cứu
2.4.1. Điều tra một số chỉ tiêu và tình hình dịch cúm gia cầm từ năm 2004 đến năm 2013 đến năm 2013
Thu thập số liệu của chi cục Thú y tỉnh Bắc Giang và điều tra thực tế năm 2012.
2.4.2. Phương pháp nghiên cứu dịch tễ
- Sử dụng tổng hợp các phương pháp nghiên cứu dịch tễ học mô tả (Descriptive study), nghiên cứu dịch tễ học phân tích (Analytic study) và nghiên cứu dịch tễ học thực nghiệm.
- Phương pháp dịch tễ học nghiên cứu hồi quy dựa vào bảng câu hỏi điều tra để tổng hợp các thông tin về các ổ dịch.
- Phương pháp dịch tễ học thực địa dựa vào việc điều tra ổ dịch để tổng hợp các yếu tố nguy cơ làm phát tán lây lan dịch bệnh và so sánh đối chiếu các thông tin của một số ổ dịch.
2.4.3. Phương pháp chẩn đoán bệnh
* Phương pháp chẩn đoán dựa vào triệu chứng lâm sàng: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Để xác định được triệu chứng lâm sàng chủ yếu của gia cầm bị bệnh, chúng tôi tiến hành quan sát, ghi chép, thống kê các biểu hiện lâm sàng của gia cầm từ khi xuất hiện những dấu hiệu bệnh lý đầu tiên. Đồng thời dựa vào các đặc điểm dịch tễ học, những can thiệp trong quá trình bệnh xảy ra cũng như thu thập các thông tin liên quan, tiến hành phân tích, thống kê để đưa ra những kết quả chính xác. Xác định chính xác những triệu chứng lâm sàng chủ yếu có ý nghĩa vô cùng quan trọng cho các bước chẩn đoán tiếp theo.
* Phương pháp chẩn đoán trong phòng thí nghiệm:
Có nhiều phương pháp chẩn đoán virus cúm gia cầm trong phòng thí nghiệm nhưng để có kết quả nhanh, thông thường ta dùng phương pháp RT – PCR. Nếu có virus cúm hoặc virus cúm thuộc subtype nào dựa vào primer chạy mẫu.
2.4.4. Phương pháp mổ khám
Đối với những gà mắc bệnh cúm còn sống, chúng tôi quan sát triệu chứng lâm sàng và kiểm tra tổn thương bên ngoài, trên da. Với những gia cầm gần chết hoặc đã chết có triệu chứng rõ ràng chúng tôi tiến hành mổ khám kiểm tra tổn thương đại thể của tất cả các cơ quan theo quy trình mổ khám của Trung tâm chẩn đoán Thú y Quốc gia - Cục Thú y.
- Nếu gia cầm còn sống phải dùng các biện pháp làm chết để tránh gây biến đổi lớn về mức độ quan sát bệnh lý (dùng điện, cắt tiết...).
- Cán bộ tham gia mổ khám phải mang đầy đủ các trang thiết bị bảo hộ đã được chuẩn bị trước.
- Kiểm tra bên ngoài: Thể trạng cơ thể, da, lông, u, các lỗ tự nhiên, khớp, ngoại ký sinh trùng và các tổn thương...
- Mổ khám bên trong:
+ Nhúng ướt lông gia cầm bằng nước có pha dung dịch sát trùng.
+ Đặt gia cầm nằm ngửa trên bàn mổ, dùng kéo hoặc dao cắt da giữa vùng bụng và bẹn ở hai bên chân, lật chân sang hai bên đồng thời kéo da bộc lộ hai cơ đùi.
+ Cắt da vùng giữa lỗ huyệt và xương lưỡi hái, một tay cầm hai chân, tay kia cầm phần da trên xương hái kéo ngược chiều nhau lên tận vùng diều bộc lộ cơ ngực.
+ Kiểm tra cơ ngực, cơ đùi, xương lưỡi hái về tình trạng khô cơ, xuất huyết, biến dạng...
+ Dùng kéo hoặc dao rạch da từ phần diều lên tận phía dưới mỏ, bộc lộ diều, thực quản, khí quản, tuyến ức để kiểm tra bên ngoài.
+ Dùng kéo cắt ngang phần cơ giữa lỗ huyệt và xương lưỡi hái, cắt tiếp lên phía trên hai bên sụn sườn qua xương đòn, xương quạ, loại những tổ chức dính, nhấc bỏ xương lưỡi hái ra ngoài bộc lộ xoang bụng và xoang ngực.
+ Quan sát các túi khí và phía ngoài các cơ quan nội tạng trong xoang bụng và xoang ngực.
+ Lấy gan, mật lá lách để kiểm tra màu sắc, kích thước, hoại tử... + Kiểm tra tuyến tụy
+ Cắt đứt phía trên dạ dày tuyến, lật toàn bộ dạ dày, ruột ra phía sau để kiểm tra, tránh nhiễm bẩn dụng cụ và các tổ chức khác.
+ Kiểm tra toàn bộ cơ quan sinh dục (buồng trứng, ống dẫn trứng, tinh hoàn, ống dẫn tinh...).
+ Kiểm tra thận, ống dẫn niệu.
+ Kiểm tra túi Fabricius bên ngoài và bên trong về hình dáng, kích thước, màu sắc, dịch...
+ Dùng kéo mở một bên mỏ quan sát xoang miệng. Cắt ngang mỏ trên kiểm tra xoang.
+ Mở thực quản thẳng tới diều kiểm tra dịch, chất chứa và mùi bên trong. + Dọc khí quản kiểm tra dịch, xuất huyết, hoại tử bên trong.
+ Kiểm tra xoang bao tim, dịch bên trong, kiểm tra cơ, xoang và van. + Tách phổi khỏi xương sườn và kiểm tra về màu sắc, độ xốp.
+ Rạch khớp gối để kiểm tra dịch, bẻ xương đùi để kiểm tra độ cứng, mềm, chẻ dọc xương đùi để kiểm tra tủy.
+ Cắt đầu gia cầm ở đốt atlas, lột da, dùng kéo cắt xương cắt sang hai bên từ lỗ chẩm đến cạnh xương đỉnh, lật hộp sọ để bộc lộ não. Dùng kéo cong vô trùng tách màng não, cắt các dây thần kinh để lấy não.
+ Dùng kéo rạch ruột rạch từ dạ dày tới ổ nhớp, kiểm tra các tổn thương, xuất huyết...
+ Dùng dụng cụ vô trùng lấy mẫu bệnh phẩm dùng cho xét nghiệm trong phòng thí nghiệm.
+ Ghi báo cáo mổ khám và phiếu gửi bệnh phẩm. + Xử lý hấp, tiêu độc gia cầm.
2.4.5. Phương pháp làm tiêu bản vi thể (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Từ những mẫu bệnh phẩm có các biến đổi đại thể cần tiến hành làm tiêu bản để xác định bệnh tích vi thể chủ yếu của bệnh. Phương pháp làm tiêu bản vi thể theo quy trình tẩm đúc bằng parafin, nhuộm Haematoxilin – Eosin (HE) theo phương pháp của Trung tâm chẩn đoán Thú y Trung ương, các bước của quá trình làm tiêu bản vi thể như sau:
Lấy mẫu: Sau khi mổ khám xong, lấy mẫu các tổ chức gan, não, lách, phổi, ruột... mẫu bệnh phẩm được cắt thành những miếng nhỏ hình chữ nhật hoặc hình tam giác sao cho tiết diện đủ cả phần trong và ngoài tổ chức, cho vào bình đựng dung dịch Formol 10% (thể tích gấp 9 lần thể tích bệnh phẩm), với tổ chức nổi (phổi) dùng gạc phủ lên trên.
Làm tiêu bản vi thể:
+ Lấy các miếng tổ chức cố định trong Formol ra cắt mỏng 2 - 3 mm, cho vào máy chạy tự động (để qua đêm).
+ Đúc khuôn. + Cắt tiêu bản:
Cắt gọt khối block, để trên mặt khay đá hoặc máy làm lạnh.
Đặt khối block nến song song với mép lưỡi dao, cắt chiều dày 2 - 5µm. Chọn lát cắt tiêu bản phẳng thả vào nồi chưng cất nhiệt độ nước 30 - 350C, dùng lam kính vớt dán lát cắt bằng albumin rồi để khô.
+ Nhuộm tiêu bản Hα E
Tẩy nến trong xylen 3 lần, mỗi lần 3 - 5 phút. Ngâm cồn tuyệt đối 3 - 5 phút.
Ngâm sang cồn 90% để 3 - 5 phút. Ngâm sang cồn 70% để 3 - 5 phút. Rửa dưới vòi nước chảy 3 - 5 phút.
Ngâm trong thuốc nhuộm Hematoxylin 2 - 5 phút. Rửa dưới vòi nước chảy 3 - 5 phút.
Ngâm trong thuốc nhuộm Eosin 1 - 5 phút.
Để khô trong nhiệt độ phòng (hoặc ngâm trong cồn 90% và cồn tuyệt đối), chuyển sang xylen 2 lần, mỗi lần 2 - 3 phút, gắn lamen. Để khô, soi kính.
+ Soi kiểm tra dưới kính hiển vi: Từ vật kính có độ phóng đại thấp đến vật kính có độ phóng đại cao.
2.5. Phƣơng pháp xử lý số liệu
Số liệu được xử lý theo phương pháp thống kê sinh học và phần mềm Excel.
2.6. Địa điểm nghiên cứu
Trung tâm Chẩn đoán thú y Trung ương - Cục thú y, các cơ sở chăn nuôi gia cầm trên địa bàn tỉnh Bắc Giang và Chi cục thú y tỉnh Bắc Giang.
2.7. Thời gian nghiên cứu
Chƣơng 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm tại Bắc Giang
3.1.1. Tình hình chăn nuôi gia cầm tại Bắc Giang từ năm 2001 đến nay
Để đánh giá thiệt hại của dịch cúm gia cầm đối với ngành chăn nuôi gia cầm tại tỉnh Bắc Giang, chúng tôi đã tiến hành thống kê các số liệu về tình hình chăn nuôi gia cầm của tỉnh trước và sau khi có dịch cúm. Số liệu được trình bày trên bảng 3.1.
Bảng 3.1. Tình hình chăn nuôi gia cầm tại Bắc Giang từ 2001 - 2013
Năm Số lƣợng gia cầm (1000 con) Tỷ lệ tăng đàn (%) Sản lƣợng thịt (tấn) Tỷ lệ tăng (%) Sản lƣợng trứng (quả) Tỷ lệ tăng (%) 2001 7.564 6,9 9.751 - 55.715 - 2002 8.102 7,1 10.206 4,7 57.270 2,8 2003 9.962 22.9 10.779 5,6 68.896 18,7 2004 8.257 -17,1 11.156 3,5 71.307 3,5 2005 9.075 9,9 12.166 9,1 76.369 7,1 2006 10.270 13,3 13.504 11,0 79.850 4,6 2007 10.979 6,9 14.233 5,4 82.165 2,9 2008 11.758 7,1 15.044 5.7 84.712 3,1 2009 12.639 7,5 15.916 5,8 87.676 3,5 2010 13.650 8,0 16.886 6,1 90.920 3,7 2011 14.755 8,1 17.916 6,4 94.193 3.6 2012 15.964 8,2 19.116 6.7 97.395 3.4 2013 16.984 6,3 20.358 6,5 99.927 2,6
Từ số liệu trên bảng 1.1 cho thấy:
Giai đoạn trước khi có dịch cúm gia cầm (2001-2003), ngành chăn nuôi gia cầm phát triển khá ổn định với mức tăng bình quân đạt khoảng 7%/năm. Thậm chí năm 2003 mức tăng đàn đạt 22,9% so với năm 2002.
Cùng với sự tăng về số lượng gia cầm, sản lượng thịt và trứng cũng có mức tăng trưởng đáng kể hàng năm. Sản lượng thịt tăng khoảng 5% mỗi năm. Sản lượng trứng cũng tăng mức trên 2,8%. Trong năm 2003, cùng với mức tăng đàn, sản lượng trứng cũng tăng 18,7%.
Tuy nhiên, khi dịch cúm gia cầm lần đầu tiên xuất hiện vào cuối năm 2003, do tính chất bất ngờ của dịch nên thiệt hại đối với ngành chăn nuôi là rất lớn. Số lượng đàn gia cầm năm 2004 đã giảm tới 17,1% so với năm 2003 (giảm hơn 14 triệu con gia cầm). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Năm 2005 có sự phục hồi của ngành chăn nuôi gia cầm sau 2 năm dịch liên tiếp xảy ra, tổng đàn gia cầm tăng 9,9% so với năm 2004 nhưng vẫn chưa đạt được số lượng, chất lượng như trước khi dịch xảy ra. Sản lượng trứng tăng hơn 7% và sản lượng thịt tăng hơn 9%.
Trong các năm từ 2005 - 2007, dịch cúm vẫn liên tiếp tái phát trên địa bàn tỉnh Bắc Giang. Nhờ thực hiện đồng bộ các biện pháp chống dịch (sử dụng vắc xin tiêm phòng, phát hiện dịch sớm, khoanh vùng cách ly, tiêu độc khử trùng triệt để...) nên hầu hết các ổ dịch đề được khống chế, giảm thiệt hại về kinh tế. Vì vậy, năm 2006 tỷ lệ tăng đàn vẫn đạt 13,3%, số lượng gia cầm là khoảng 10,3 triệu con, cao hơn thời điểm chưa có dịch. Sản lượng thịt và trứng đều tăng đáng kể.
Từ năm 2008 - 2013 đánh giá một cách tổng thể, không thấy xuất hiện dịch cúm gia cầm trên địa bàn tỉnh Bắc Giang. Riêng năm 2012 có phát hiện 2 ổ dịch nhỏ, được phát hiện kịp thời nên thiệt hại không đáng kể. Mức độ tăng trưởng của ngành chăn nuôi thể hiện qua sự tăng đàn, sản lượng thịt, trứng vẫn duy trì và tăng trưởng đều so với năm 2006.
Từ các nhận xét trên, có thể đánh giá thiệt hại do dịch cúm gia cầm gây ra đối với ngành chăn nuôi gia cầm của tỉnh Bắc Giang trong những năm đầu dịch mới xuất hiện là khá nghiêm trọng. Tổng đàn gia cầm đã sụt giảm rõ rệt về số lượng, chất lượng và phải mất từ 2 - 3 năm sau mới có thể phục hồi phát triển bình thường. Tuy nhiên, trong các năm tiếp theo sau khi tạm khống chế dịch do các chính sách khuyến khích chăn nuôi và công tác phòng chống dịch hiệu quả hơn nên ngành chăn nuôi gia cầm của tỉnh Bắc Giang đã được phục hồi và phát triển khá ổn định.
3.1.2. Diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm tại tỉnh Bắc Giang từ năm 2004 đến năm 2013. 2004 đến năm 2013.
Để đánh giá tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 của tỉnh Bắc Giang từ năm 2004 đến năm 2013, chúng tôi đã tiến hành điều tra tỷ lệ gia cầm mắc bệnh cúm, kết quả được thể hiện qua bảng 3.2.
Bảng 3.2. Tỷ lệ gia cầm mắc bệnh cúm từ năm 2004 đến năm 2013 Thời gian Tổng số gia cầm của tỉnh (con) Số huyện có dịch Số hộ có dịch Số gia cầm bị tiêu hủy (con) Tỷ lệ (%) 2004 8.257.000 9/10 812 245.038 2,7 2005 9.075.000 2/10 394 134.499 1,5 2007 10.979.000 7/10 172 37.199 0,3 2012 15.964.000 1/10 2 1500 0,09 2013 16.984.000 0 0 0 0
Tại Bắc Giang, dịch cúm gia cầm bắt đầu xảy ra mạnh từ cuối năm 2003, đầu năm 2004. Dịch xảy ra bất ngờ trên diện rộng (9/10 huyện) làm số gia cầm bị chết và tiêu hủy rất lớn: 245.038 con (chiếm 2,7% số gia cầm của tỉnh). Từ khi dịch xảy ra, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông
thôn đã đề ra các biện pháp thích hợp để phòng chống bệnh. Trong đó, quan trọng nhất là biện pháp tiêm phòng vaccine và vấn đề vệ sinh phòng