Chồi 4 tuần tuổi trong môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l được cấy chuyền sang môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l với tỉ lệ NH4/ NO3 thay đổi lần lượt: loại NH4NO3, loại KNO3 , loại cả NH4NO3, KNO3 và thay thế bằng NH4Cl.
Khi loại NH4NO3hay NH4NO3và KNO3 chiều cao chồi, số lá và chiều dài lá giảm khác biệt với đối chứng. Trên môi trường loại KNO3chiều cao chồi, chiều dài lá không khác biệt so với đối chứng, chỉ có số lá giảm.
Bảng 3.20. Số lượng chồi, chiều cao chồi, số lá và chiều dài lá từ sự nuôi cấy chồi 4 tuần tuổi trên môi trường MS bổ sung BA 1mg/l và AIA 0,1 mg/l với với tỉ lệ NH4/ NO3 thay đổi sau 5 tuần
Môi trường Số chồi (cái) Chiều cao chồi (cm) Số lá (cm) Chiều dài lá (cm) Đối chứng 1,5 ± 0,0b 1,3 ± 0,1b 10,3 ± 1,5b 1,2 ± 0,1b Loại NH4NO3 1,0 ± 0,0ab 0,6 ± 0,1a 5,3 ± 0,3a 0,7 ± 0,1a Loại KNO3 1,2 ± 0,2ab 1,1 ± 0,1 b 7,3 ± 0,7a 1,3 ± 0,1b Loại NH4NO3, KNO3 và thay thế bằng NH4Cl 0,7 ± 0,3a 1,3 ± 0,3a 8,3 ± 1,7a 0,5 ± 0,1a
3.1.6. Tạo rễ
Cây con in vitro 6 tuần tuổi có nguồn gốc từ cụm chồi của cây dứa Ananas
comosus Merr trên môi trường BA 4 mg/l và AIA 0,1 mg/l được cấy vào môi
trường MS có bổ sung ANA hay AIA ở các nồng độ khác nhau.
Bảng 3.21. Số sơ khởi rễ tạo thành từ cây con 6 tuần tuổi của cây dứa Ananas
comosus Merr sau 1 tuần nuôi cấy trong môi trường MS có bổ sung các chất điều
hòa tăng trưởng khác nhau
Môi trường Số sơ khởi rễ tạo thành/ cây MS 0,0 ± 0,0a ANA 0,5 mg/l 0,0 ± 0,0a ANA 1 mg/l 1,7 ± 0,3ab AIA 1 mg/l 2,0 ± 0,6b AIA 2 mg/l 4,0 ± 1,0c AIA 2,5 mg/l 5,0 ± 0,6c
Ảnh 3.20. Cây con in vitro trên môi trường MS có bổ sung BA 4 mg/l và AIA 0,2
mg/l tách ra từ cụm chồi sau 6 tuần nuôi cấy.
Ảnh 3.21. A, B. Sơ khởi rễ hình thành từ chồi Ananas comosus Merr 6 tuần tuổi
trong môi trường AIA 2,5 mg/l sau 1 tuần nuôi cấy.
0.1 cm
A B
3.1.7. Khảo sát sự tăng trưởng của cây con trong vườn ươm
Cây con in vitro 16 tuần tuổi chuyển ra ngoài vườn ươm sau 20 ngày cho thấy
sự khác biệt có nghĩa về chiều cao cây và số rễ. Tuy số lá và chiều dài rễ không có sự khác biệt nhưng cây sinh trưởng và chống chịu tốt với bộ lá xanh tốt, bộ rễ đầy đủ và không có dấu hiệu tăng trưởng chậm.
B ng 3.22. Chiều cao cây, số lá, sổ rễ và chiều dài rễ c a cây con in vitro sau 20
ngày chuy n ra v n m
Cây con Chi u cao cây (cm) Số lá (cái) S r (cái) Chi u dài r (cm) Tr c khi chuy n ra v n m 2,6 ± 0,9 11,0 ± 1,2 9,0 ± 0,6 1,5 ± 0,0
Sau 20 ngày chuy n ra v n m
3,9 ± 0,7 13,7 ± 1,0 21,3 ± 1,2 2,7 ± 0,1
T- Test + - + -
“+” khác biệt có ý nghĩa
Ảnh 3.22. Cây con in vitro 16 tuần tuổi
Ảnh 3.23. Cây con in vitro 16 tuần tuổi trước khi ra vườn ươm
nh 3.24. Cây con in vitro 16 tuần tuổi sau khi ra v n m 20 ngày 1 cm