Hàm lượng các chất điều hoà tăng trưởng thực vật của khúc cắt sơ khởi chồi ở ba vị trí non, trung gian, già có nguồn gốc từ chồi trên trái dứa có sự khác biệt.
Hàm lượng AIA cao nhất ở vị trí già, thấp ở vị trí non và trung gian. Zeatin cao nhất ở vị trí non, không khác biệt so với vị trí trung gian và thấp nhất ở vị trí già. GA3 tăng cao nhất ở vị trí trung gian và thấp ở vị trí già. ABA ở cả ba vị trí non, trung gian, già không có sự khác biệt.
Bảng 3.6. Hoạt tính các chất điều hoà tăng trưởng thực vật của khúc cắt sơ khởi chồi có nguồn gốc từ chồi trên trái dứa tương ứng với ba vị trí non, trung gian, già
Hoạt tính các chất điều hoà tăng trưởng thực vật (mg/l) Vị trí
AIA Zeatin GA3 AAB Non 0,42 ± 0,05a 0,42 ± 0,04b 1,16 ± 0,09ab 1,0 ± 0,29a
Trung gian 0,54 ± 0,07a 0,36 ± 0,03b 1,5 ± 0,14b 1,5 ± 0,29a
Già 0,92 ± 0,05b 0,08 ± 0,01a 0,82 ± 0,05a 0,67 ± 0,17a
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p=0,05
0 0.5 1 1.5 2
Non Trung gian Già
trí s kh i ch i Ho t tín h cá c ch t u h o à n g tr n g th c v t (m g /l ) AIA Zeatin GA3 AAB
Hình 3.1. Hoạt tính các chất điều hoà tăng trưởng thực vật của khúc cắt sơ khởi chồi có nguồn gốc từ chồi trên trái dứa tương ứng với ba vị trí non, trung gian, già
3.1.3. Xử lý chất điều hòa tăng trưởng thực vật 3.1.3.1. Xử lý riêng rẽ
• AIA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy trên môi trường MS có bổ sung AIA ở các nồng độ khác nhau. Trên môi trường MS có bổ sung AIA 0,1mg/l, kích thước vùng mô phân sinh ngọn (chiều ngang, chiều cao) tăng trưởng mạnh nhất.
Bảng 3.7. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung AIA ở các nồng độ khác nhau
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 149,1 ± 5,9a 74,6 ± 2,8a
Nồng độ AIA (mg/l) Sau 10 ngày nuôi cấy 0 170,7 ± 8,6ab 76,6 ± 5,4a 0,001 182,5 ± 14,3ab 66,6 ± 7,6a 0,01 168,4 ± 9,1ab 75,4 ± 9,7a 0,1 191.2 ± 7,8c 80,7 ± 4,6b 0,5 187,7 ± 3,5b 66,7 ± 6,3a 1,0 191,2 ± 4,6b 78,9 ± 9,1a
• ANA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung ANA ở các nồng độ khác nhau. Ở môi trường MS có bổ sung ANA 0,01 mg/l, vùng mô phân sinh ngọn tăng trưởng chiều ngang và chiều cao cao nhất nhưng vẫn không khác biệt có ý nghĩa với môi trường đối chứng MS.
Bảng 3.8. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung ANA ở các nồng độ khác nhau
Kích thước mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 135,1± 6,3b 54,4 ± 6,3a
Nồng độ ANA (mg/l) Sau 10 ngày nuôi cấy
0 173,7 ± 8,6c 78,1 ± 4,9b 0,001 166,7 ± 14,3c 62,9 ± 8,1ab 0,01 138,6 ± 4,6b 61,4 ± 4,6ab 0,1 170,1 ± 7,6c 56,9 ± 6,2b 0,5 122,8 ± 9,3ab 59,3 ± 1,9ab 1,0 110,3 ± 5,4a 61,3 ± 3,4a
• BA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA ở các nồng độ khác nhau. Ở môi trường BA 0,5 mg/l và BA 1 mg/l vùng mô phân sinh ngọn tăng trưởng cao nhất khác biệt có ý nghĩa với đối chứng. Bảng 3.9. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA ở các nồng độ khác nhau
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 142,0 ± 5,4ab 59,8 ± 2,6ab
Nồng độ BA (mg/l) Sau 10 ngày nuôi cấy 0 163,5 ± 18,7b 72,0 ± 4,6bc 0,1 164,7 ± 7,3bc 63,4 ± 3,3ab 0,5 186,2 ± 0,8c 78,6 ± 2,8c 1,0 181,8 ± 1,7c 80,1 ± 7,6c 5,0 165,4 ± 4,0bc 65,0 ± 3,7ab 10 136,0 ± 7,3a 54,7 ± 1,6a
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p=0,05
• GA3
Mẫu cấy ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung GA3 ở các nồng độ khác nhau. Ở các nghiệm thức, kích thước của vùng mô phân sinh ngọn có sự khác biệt với đối chứng. Môi trường MS có bổ sung GA3 10 mg/l, chiều ngang và chiều cao của vùng mô phân sinh ngọn cao nhất.
Ngâm mẫu cấy trong GA3 ở các nồng độ khác nhau trong 1h. Trong trường hợp ngâm mẫu cấy trong GA3 100mg/l, kích thước vùng mô phân sinh ngọn (chiều ngang và chiều cao) tăng lên rõ rệt, khác biệt có ý nghĩa so với đối chứng. Bảng 3.10. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung GA3ở các nồng độ khác nhau
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p=0,05
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 143,7± 4,8a 64,7 ± 3,6a
Đối chứng (MS) 179,1± 3,9cde 78,0 ± 1,9bc
Xử lý bằng cách bổ sung vào môi trường
GA31mg/l 185,8 ± 4,7def 71,8 ± 1,7ab GA310mg/l 199,1 ± 0,8f 93,3 ± 3,3d GA320mg/l 198,9 ± 2,9f 77,9 ± 0,6bc Xử lý bằng cách ngâm GA310 mg/l 173,2 ± 4,1bcd 63,8 ± 2,1a GA320 mg/l 163,5 ± 5,3b 65,1 ± 0,5a GA350 mg/l 167,7 ± 7,3bc 72,3 ±1,4ab GA3100 mg/l 193,6 ± 5,3ef 85,4 ± 7,5cd
Ảnh 3.4. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS (đối chứng)
Ảnh 3.5. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung AIA 0,1 mg/l (vùng mô phân sinh ngọn gia tăng kích thước so với đối chứng)
21µm 63µm
Ảnh 3.6. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 0,5 mg/l (vùng mô phân sinh ngọn gia tăng kích thước so với đối chứng)
Ảnh 3.7. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l (vùng mô phân sinh gia tăng kích thước, xuất hiện sơ khởi chồi nách ở nách là gần mô phân sinh)
62 µm
H 3.8. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian khi ngâm GA3 100 mg/l trong 1 giờ sau 10 ngày trên môi trường MS (vùng mô phân sinh gia tăng kích thước so với đối chứng)
Ảnh 3.9 Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung GA3 10mg/l (vùng mô phân sinh gia tăng kích thước so với đối chứng nhưng không khác biệt với cách xử lý ngâm)
64µm
3.1.3.2. Xử lý phối hợp
• BA phối hợp ANA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, ANA ở các nồng độ khác nhau. Ở môi trường hay BA 1 mg/l và ANA 0,5 mg/l sự tăng trưởng vùng mô phân sinh ngọn đạt cao nhất và khác biệt so với đối chứng.
Bảng 3.11. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA, ANA ở các nồng độ khác nhau
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p=0,05
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 132,1 ± 3,2a 61,6 ± 0,9a
Sau 10 ngày nuôi cấy
BA 0 mg/l và ANA 0 mg/l 161,7 ± 3,5b 63,6 ± 2,7a BA 0,5mg/l và ANA 0,1mg/l 183,7 ± 2,1cd 79,7 ± 2,4c BA 0,5mg/l và ANA 0,5mg/l 194,3 ± 2,6de 84,4 ± 0,3c BA 0,5mg/l và ANA 1mg/l 178,2 ± 2,2c 82,4 ± 1,7c BA 0,5mg/l và ANA 10 mg/l 189,3 ± 2,4cd 76,8 ±6,5bc BA 1 mg/l và ANA 0,1 mg/l 190,7 ± 4,1cd 79,2 ± 3,9c BA 1 mg/l và ANA 0,5 mg/l 203,5 ± 4,6e 89,5 ± 0,5c BA 10 mg/l ANA 0,1mg/l 143,8 ± 7,6a 66,6 ±7,6ab
Ảnh 3.10. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và ANA 0,5mg/l (vùng mô phân sinh tăng rộng)
Ảnh 3.11. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ngọn ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 0,5 mg/l và ANA 0,5 mg/l
63µm 65 µm
• BA phối hợp AIA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, AIA ở các nồng độ khác nhau. Ở môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1mg/l, sự tăng trưởng vùng mô phân sinh ngọn khác biệt rõ nhất so với đối chứng.
Bảng 3.12. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA, AIA ở các nồng độ khác nhau
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 135,2 ± 3,4a 67,5 ± 1,0a
Sau 10 ngày nuôi cấy
BA 0 mg/l AIA 0 mg/l 153,4 ± 6,2b 69,2 ± 2,3a BA 0,5mg/l AIA 0,1mg/l 169,5 ± 0,4cd 70,0 ± 2,5ab BA 0,5mg/l AIA 0,5mg/l 164,3 ± 2,8bc 78,0 ± 1,5b BA 0,5mg/l AIA 1mg/l 163,4 ± 6,7bc 70,3 ± 1,4ab BA 0,5mg/l AIA 10 mg/l 161,1 ± 4,3bc 71,0 ± 1,6ab BA 1 mg/l AIA 0,1 mg/l 202,5 ± 2,7e 86,1 ± 5,6c BA 1 mg/l AIA 0,5 mg/l 180,9 ± 6,0d 74,9 ± 0,3ab BA 10 mg/l AIA 0,1mg/l 169,3 ± 4,7cd 75,7 ± 3,1ab
• BA, ANA và GA3
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, ANA và GA3 ở các nồng độ khác nhau. Ở các nghiệm thức phối hợp BA, ANA và GA3, sự tăng trưởng của vùng mô phân sinh ngọn không khác biệt với đối chứng.
Bảng 3.13. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA, ANA và GA3 riêng rẽ hay phối hợp ở các nồng độ khác nhau
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p=0,05
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang (µm) Chiều cao (µm) Mẫu cấy ban đầu 143,3 ± 6,5a 66,9 ± 0,8abc
Sau 10 ngày nuôi cấy
MS nguyên 152,1 ± 7,0ab 72,4 ± 1,1a BA 1 mg/l 175,5 ± 6,1cde 75,6 ± 3,1bcd ANA 0,5 mg/l 148,6 ± 4,1ab 61,8 ± 1,7ab GA3 1mg/l 191,8 ± 3,5ef 70,5 ± 1,2abc GA3 10 mg/l 197,7 ± 1,5f 86,7 ± 1,2d GA3 20 mg/l 198,2 ± 0,9f 80,2 ± 0,9cd BA 1 mg/l, ANA 0,5 mg/l, GA3 1mg/l 166,4 ± 0,9bcd 65,7 ± 1,4 ab BA 1 mg/l, ANA 0,5 mg/l, GA3 10 mg/l 181,7 ± 2,4def 57,2 ± 0,6a BA 1 mg/l, ANA 0,5 mg/l, GA3 20 mg/l 159,1 ± 8,4abc 57,3 ± 3,1a
• BA, AIA và GA3
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, AIA và GA3 ở các nồng độ khác nhau. Ở các nghiệm thức phối hợp BA, AIA, GA3, sự tăng trưởng của vùng mô phân sinh ngọn không khác biệt với đối chứng.
Bảng 3.14. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS bổ sung BA, AIA và GA3
riêng rẽ hay phối hợp ở các nồng độ khác nhau.
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn Môi trường
Chiều ngang(µm) Chiều cao(µm) Mẫu cấy ban đầu 143,3 ± 6,5a 66,9 ± 0,8bc
Sau 10 ngày nuôi cấy
MS nguyên 152,1 ± 7,0a 72,4 ± 1,1cd BA 1 mg/l 175,5 ± 6,1b 75,6 ± 3,1de AIA 0,1mg/l 195,1 ± 3,1c 81,8 ± 3,5ef GA3 1mg/l 191,8 ± 3,5c 70,5 ± 1,2cd GA3 10 mg/l 197,7 ± 1,5c 86,7 ± 1,2f GA3 20 mg/l 198,2 ± 0,9c 80,2 ± 0,9ef BA 1 mg/l, AIA 0,1mg/l, GA3 1mg/l 174,3 ± 3,3b 60,1 ± 2,9 ab BA 1 mg/l, AIA 0,1mg/l, GA3 10 mg/l 174,8 ± 4,5b 57,5 ± 3,7a BA 1 mg/l, AIA 0,1mg/l, GA3 20 mg/l 178,5 ± 3,9b 53,7 ± 1,9a
• Xử lý kết hợp BA, ANA hoặc AIA
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, ANA hay AIA ở các nồng độ khác nhau theo thời gian. Môi trườngBA 1mg/l và AIA 0,1 mg/lkích thước vùng mô phân sinh tănh trưởng mạnh nhất, khác biệt với đối chứng.
Bảng 3.15. Kích thước vùng mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian trên môi trường MS bổ sung BA, ANA hay AIA ở các nồng độ khác nhau, theo thời gian
Kích thước vùng mô phân sinh ngọn (µm) Ngày 10 Ngày 20 Môi trường
Chiều ngang Chiều cao Chiều ngang Chiều cao Mẫu cấy ban đầu 140,5 ± 3,8a 62,8 ± 1,6a 140,5 ± 3,8a 62,8 ± 1,6a
MS nguyên 157,1 ± 4,2b 74,3 ± 2,3b 187,7 ± 1.4b 77,2 ± 0.7b BA 0,5 mg/l ANA 0,5 mg/l 182,8 ± 1,8c 77.7 ± 7.2bc 189,3 ± 3,3b 86.9 ± 4.1c BA 1mg/l ANA 0,5 mg/l 196,7 ± 6,4d 80,9 ± 1,4bc 210,3 ± 4,6c 89,7 ± 3,3cd BA 1mg/l AIA 0,1 mg/l 201,2 ± 2,1d 86,4± 1.0c 233,8 ± 1,7d 95,1 ± 0,3d
Ảnh 3.12. Chồi từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l
Ảnh 3.13. Chồi từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 20 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l
0.15 cm
Ảnh 3.14. Mô phân sinh ngọn từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian sau 10 ngày trên môi trường MS có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l
3.1.3.3. Xử lí phối hợp các chất điều hoà tăng trưởng thực vật theo thời gian
Mẫu cấy sơ khởi chồi ở vị trí trung gian được cấy vào môi trường MS có bổ sung BA, AIA, GA3 phối hợp ở các nồng độ khác nhau. Ở tuần thứ 5, môi trường MS có bổ sung BA 1mg/l và AIA 0,1 mg/l liên tục trong 5 tuần cho số lá có màu xanh cao nhất so với các nghiệm thức còn lại.
Bảng 3.16. Số lá non màu xanh từ sự nuôi cấy khúc cắt sơ khởi chồi ở vị trí trung gian trên môi trường MS có bổ sung BA, AIA, GA3 phối hợp theo thời gian sau 5 tuần. Xử lý Tuần 1 Tuần 2 đến 5 BA 1 mg/l AIA 0,1 mg/l GA3 10 mg/l BA 1 mg/l AIA 0,1 mg/l GA3 10 mg/l