VI SINH VẬT
1.3.1.2. Phương pháp nuôi cấy bề mặt trên môi trường lỏng
Vi sinh vật sẽ phát triển trên bề mặt lỏng của môi trường. Do đó vi sinh vật tạo thành một lớp váng nổi trên bề mặt của môi trường tạo thành ngăn cách pha lỏng (môi trường) và pha khí (không khí). Vi sinh vật sẽ sử dụng chất dinh dưỡng từ dung dịch môi trường, oxy từ không khí để tiến hành quá trình sinh tổng hợp enzyme.
1.3.2.Phương pháp nuôi cấy chìm [19], [26]
Trong phương pháp nuôi cấy vi sinh vật bề sâu: Vi sinh vật phát triển trong lòng môi trường lỏng. Môi trường dùng để nuôi cấy trong phương pháp này là môi trường lỏng, nuôi cấy theo phương pháp này các chỉ số lý hoá của môi trường thay đổi rất mạnh. Chính sự thay đổi mạnh này dẫn đến sự thay đổi rất mạnh trong sự phát triển của vi sinh vật. So với phương pháp nuôi cấy bề mặt trên môi trường bán rắn thì phương pháp này có một số ưu điểm là ít tốn diện tích, dễ tự động hoá và cơ giới hoá, ít tốn nhân công lao động và cho năng suất cao.
Nguyên liệu dùng để nuôi cấy trong phương pháp này chính là các dung dịch đường nước bã rượu vì thế ta có thể tiết kiệm được nguyên liệu nuôi cấy. Môi trường sau khi nuôi cấy có chứa enzyme mà không cần phải ly trích enzyme như nuôi cấy trên môi trường bán rắn.
Bên cạnh đó cũng có những khó khăn và những nhược điểm khi áp dụng phương pháp này là: dễ bị nhiễm hàng loạt, điều khó khăn quan trọng hơn cả là vấn đề sục khí nhằm cung cấp khí O2 cho sự phát triển của vi sinh vật. Nếu không giải quyết tốt vấn đề sục khí trong quá trình nuôi cấy thì sẽ thu enzyme với hiệu suất thấp, chi phí sản xuất cao.
1.3.3.Các yếu tố ảnh hưởng đến sự sinh tổng hợp enzyme [20]
Mọi hoạt động sống của sinh vật đều liên quan chặt chẽ với môi trường. Các sinh vật không chỉ có những nhu cầu về thành phần và số lượng các chất dinh dưỡng mà còn chịu ảnh hưởng vào nhiều yếu tố khác như nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng,... của môi trường xung quanh. Các yếu tố này có thể làm kích thích
hoặc ức chế sinh tổng hợp thậm chí còn làm vi sinh vật bị tiêu diệt suốt thời gian bảo quản và sử dụng.