Mức độ cho phép có hiệu lực hiện nay đối với các độc tố từ thực vật phù du được dựa chủ yếu trên các số liệu được lấy từ các vụ ngộ độc. Tuy nhiên, các số liệu này ít khi chính xác và đầy đủ và chủ yếu bị hạn chế ở các giá trị gắn với ngộ độc cấp tính. Trong một số trường hợp, giá trị cho phép cũng được điều chỉnh cho phù hợp với giới hạn của phương pháp phát hiện. Để thực hiện mục đích đánh giá nguy cơ thì lượng cá (hoặc nhuyễn thể) được đưa vào cơ thể nên được tiêu chuẩn hóa.
8.1. Đánh giá nguy cơ nhiễm các độc tố gây liệt cơ có trong nhuyễn thể (PSP)
Hiện nay việc đánh giá nguy cơ độc tố học cho các độc tố PSP chỉ có thể dựa trên các số liệu độc tính cấp tính. Các số liệu về độc tính mạn và độc tính bán trường trên động vật cũng như con người lại không có sẵn. Liều lượng thấp nhất gây nên các triệu chứng ngộ độc PSP nhẹ ở người dao động giữa 120 và 304
g/người và các liều thấp nhất liên quan đến sự nhiễm độc nghiêm trọng, thậm chí gây tử vong dao động trong khoảng 456 và 576 g/người. Để bảo vệ được nhiều hơn nữa các đối tượng dễ bị tổn thương (trẻ em, người cao tuổi, người không khỏe mạnh) người ta áp dụng hệ số không chắc chắn bằng 10 để tính toán các giá trị TDI cho các độc tố nhiễm phải, dựa vào các số liệu trên con người. Tuy nhiên, đối với PSP việc tính toán phức tạp vì các yếu tố sau: ở mức độ nào thì các tác động được coi là “có hại”, và ở mức độ nào thì là NOAEL và LOAEL thực sự? Mặt khác, vì các số liệu trên PSP đại diện cho rất nhiều cá thể biểu thị sự khác nhau lớn trong tính nhạy cảm thì hệ số không chắc chắn 10 có thể không còn cần thiết nữa (Aune, 2001). Phần lớn các quốc gia áp dụng một mức chịu đựng là 80 g STX eq /100g thịt vẹm. Nếu tiêu thụ nhuyễn thể được ước lượng trong khoảng 100 và 300 g trong một bữa ăn thì người ta sử dụng thêm một hệ số an toàn trong khoảng <1 đến 3,8 cho các triệu chứng nhẹ và từ 1,9 đến 7,2 cho sự nhiễm độc nghiêm trọng hoặc tử vong. Có thể nói hệ số an toàn này là rất nhỏ gần như là không có.
Tuy nhiên, thực tế là việc thiết lập một mức chấp nhận thấp là rất khó thực hiện bởi vì phép thử sinh học trên chuột hiện nay là phương pháp đươc sử dụng rộng rãi để xác định các độc tố PSP và giới hạn phát hiện hiện nay của phép thử này xấp xỉ là 40 g PSP (tương đương STX)/100g nhuyễn thể. Một khi các phương pháp phân tích hóa học nhạy (và đáng tin cậy) có sẵn thì các số liệu độc tính của STX và các dẫn xuất của chúng sau khi bị phơi nhiễm cấp tính và mãn tính (mãn tính bán trường) nên được đánh giá lại.
8.2. Đánh giá nguy có nhiễm độc nhuyễn thể gây tiêu chảy (DSP)
Các độc tố khác nhau trong hỗn hợp DSP có thể được chia thành ba nhóm có tên gọi là axit okadaic, các DTXs có liên quan đến nhau về cấu trúc, các PTXs và các YTXs.
309
Một nhóm các nhà khoa học của EU về độc tố học của DSP và AZA vừa đề nghị các mức cho phép cho ba nhóm độc tố DSP này (EU/SANCO, 2001).
OA và DTXs
Trong các thí nghiệm trên động vật, các tác động gây ung thư và nhiễm độc gen nguyên nhân do OA và DTXs đã được thấy ở các liều lượng tương đối cao và các giai đoạn phơi nhiễm dài đã được so sánh với các mức gây tiêu chảy ở người ngay sau khi ăn nhuyễn thể bị nhiễm. Vì vậy, người tiêu thụ nhuyễn thể có chứa các độc tố này có nguy cơ đáng kể đối với bệnh ung thư . Vì vậy, đánh giá nguy cơ của con người được dựa trên N(L)OAEL từ các số liệu trên động vật hoặc con người với việc sử dụng một hệ số không chắc chắn. Các số liệu trên con người được khuyến cáo áp dụng nếu được ban hành.
Tính đến tất cả các số liệu phơi nhiễm của con người, có thể kết luận là các mức thấp nhất gây nên tiêu chảy ở người biến đổi từ 32 đến 55 g OA và / hoặc DTX1. Các số liệu này được lấy từ các số liệu trên người dân Na Uy và Nhật. Các tác động dường như tập trung ở các triệu chứng tiêu chảy, nôn mửa, đau đầu và khó chịu. Các tác động có hại đến sức khỏe không nghiêm trọng và không thuận nghịch đã được thấy ở các mức này (EU/SANCO, 2001). Các qui định hiện hành của Châu Âu cho phép các mức tối đa của OA, DTXs và PTXs là 160 g OA eq/kg mô ăn được. Nếu tiêu thụ nhuyễn thể được ước lượng nằm trong khoảng 100 và 300 g trong một bữa ăn thì có một số dư an toàn < 1 đến 3,4 cho các tác động gây tiêu chảy. Các số dư này có thể ở giá trị rất nhỏ hoặc là không hề có số dư.
EU/SANCO (2001) đã tuyên bố rằng, nếu lượng OA và DTX trong nhuyễn thể không cao hơn 16 g/100 g thịt nhuyễn thể thì không có nguy cơ đáng kể đối với sức khỏe ở mức tiêu thụ 100 g thịt vẹm/ngày.
PTXs
Liên quan đến PTXs, các số liệu độc tính trên người chưa được công bố. Vì vậy một mức an toàn cho con người được dựa trên các số liệu độc tính trên động vật. Đối với các độc tố trong nhóm PTX, số liệu trên độc tính động vật chỉ có sẵn cho PTX2. Các tác động như là sự hình thành và phát triển khối u thì chưa được biết đến. LOAEL cho PTX2 được đưa vào chuột qua đường miệng đã được báo cáo ở mức 0,25 mg/kg thể trọng dựa trên các tác động gây tiêu chảy và các tác động lên gan. NOAEL nên được ước lượng bằng cách áp dụng một hệ số 10 cho LOAEL. Để ngoại suy các số liệu trên động vât sang nguy cơ của con người, một hệ số 100 được ứng dụng. Vì vậy, bằng cách sử dụng một hệ số không chắc chắn là 1000, một mức an toàn là 0,25 g/kg thể trọng có thể được tính toán cho con người 15 g cho người lớn nặng 60 kg. EU/SANCO (2001) đã đề nghị một mức cho phép là 15 g/100g nhuyễn thể. Tuy nhiên, nếu tiêu thụ nhuyễn thể được ước lượng trong khoảng 100 và 300 g trong một bữa ăn thì mức cho phép phải nằm trong khoảng 5 và 15 g/100g mô thịt nhuyễn thể ăn được.
310
Đối với axit seco PTX2 (PTX2-SA), các số liệu phơi nhiễm đối với người được lấy từ sự cố ngộ độc nhuyễn thể pipi (56 trường hợp được đưa vào bệnh viện) ở New South Wale (Úc) vào tháng mười hai năm 1997 (ANZFA, 2001).
Theo Quilliam và các cộng sự (2000), PTX2-SA có thể là một trong những nguyên nhân gây ra triệu chứng đau ruột, dạ dày, ói mửa hoặc tiêu chảy ở người (Aune, 2001). Burgess và Shaw (2001) đã báo cáo rằng các bệnh nhân đã tiêu thụ xấp xỉ 500g pipi có chứa 300 g PTX-2SA/ kg ( 150 g PTX-2SA/ người 2,5 g/ kg thể trọng cho người có trọng lượng 60 kg). Giá trị của PTX-2SA ở mức an toàn cho người là 0,025 g / kg thể trọng có thể được tính toán bằng cách sử dụng một hệ số không chắc chắn là 10 để ngoại suy từ LOAEL sang NOAEL) (15 g / người có thể trọng là 60 kg). Điều này có nghĩa là đối với PTX2-SA, mức cho phép phải nằm trong khoảng 0,5 và 1,5 g / 100g mô ăn được với tiêu thụ nằm trong khoảng 100 và 300 g trong một bữa ăn.
YTXs
Đối với YTXs, không có thông tin về các số liệu trên người. Vì vậy, mức độ an toàn cho người được dựa vào các số liệu trên động vật. Khi đưa vào cơ thể chuột qua đường miệng thì NOAEL trên chuột đã được ước lượng là 1,0 mg/kg thể trọng dựa trên các tác động đến tim. Mức an toàn cho con người về các mức độ ngộ độc cấp tớnh của YTXs được tớnh toỏn là 10 àg/kg thể trọng bằng cỏch sử dụng một hệ số không chắc chắn là 100. Đối với người lớn nặng 60kg, điều này có nghĩa là mức độ an toàn là 600 àg YTX. Do thiếu cỏc số liệu về việc đưa cỏc chất vào cơ thể theo trình tự lặp lại cũng như một yếu tố không chắc chắn được đề xuất bởi WHO về một thành phần gây tổn thương cơ tim thì các mức an toàn đã được tính toán cho con người đã được đưa ra ở trên có thể thấp hơn, hệ số này nằm trong khoảng từ 6 tới 100 àg (EU/SANCO, 2001). EU/SANCO (2001) đó đề nghị một mức cho phộp là 100 àg YTXs/100 g thịt nhuyễn thể. Tuy nhiờn, nếu việc tiờu thụ nhuyễn thể được ước lượng nằm trong khoảng 100 và 300 g trong một bữa ăn thỡ mức cho phộp phải nằm giữa 33 và 100 àg/100 g mụ nhuyễn thể ăn được.
8.3. Đánh giá nguy cơ cho sự nhiễm độc nguyễn thể gây mất trí nhớ (ASP) Giá trị hướng dẫn được ứng dụng phổ biến là 20 mg DA/kg vẹm được lấy từ một sự cố ASP ở Canada (đảo Hoàng tử Edward) và được thực hiện ở một số quốc gia khác. Mức độ theo hướng dẫn là 20 mg DA/kg thì tương tương với một lượng đưa vào cơ thể là từ 0,03 đến 0,1 mg DA/kg thể trọng cho một người có trọng lượng cơ thể là 60 kg với giả thiết rằng sự tiêu thụ vẹm nằm trong khoảng 100 và 300 g/ bữa ăn. Số liệu dịch tễ học được sử dụng có nguồn gốc từ giá trị hướng dẫn, các tác động nhẹ lên dạ dày, ruột được biểu hiện ở người ở mức 1 mg DA/kg thể trọng. Sau đấy, giá trị hướng dẫn đã được xác nhận bởi các nghiên cứu cấp tính trên động vật. Tuy nhiên, khi các liều lượng được đòi hỏi để gây ra độc tính rõ ràng trên các loài động vật đã được so sánh thì chuột xem ra tương đối là nhạy cảm khi so sánh với khỉ và liều lượng cho vào đường miệng cần nhiều độc tố
311
hơn (nhiều hơn 10 lần ở các loài gặm nhấm) để đạt được cùng tác động khi cho vào màng trong của bụng. Chuột cho thấy các tác động rõ ràng với sự nhiễm độc DA ở một liều đơn lẻ đưa vào qua miệng khoảng 80 mg/kg thể trọng, ngược lại ở liều lượng 1 mg/kg thể trọng khỉ đã nôn mửa, ọe khan và ngáp. Một liều đơn đưa qua miệng là 0,75 mg DA/ kg thể trọng ở khỉ đã không dẫn đến những tác động rõ ràng. Tính nhạy cảm bị giảm thể hiện rõ ra bên ngoài của loài gặm nhấm có thể là kết quả của sự bất lực cuả chúng để nôn mửa và / hoặc sự phát hiện là thời gian tồn tại trong huyết tương của DA trong chuột ít hơn 6 lần trong khỉ. So sánh giá trị hướng dẫn 20 mg DA/ kg mô vẹm (~ 0,1 mg/kg thể trọng của con người với giả định một sự tiêu thụ nhuyễn thể là 300 g vẹm trong một bữa ăn) với môt liều lượng không tác động (0,75 mg/kg thể trọng) trong các nghiên cứu đưa vào qua đường miệng cấp tính ở khỉ, một hệ số nhỏ hơn 10 ở giữa các con số này. Không có các hiểu biết về các tác động của phơi nhiễm thời gan dài với các lượng DA thấp. Tuy nhiên, các nghiên cứu trên động vật trong thời gian ngắn với các phơi nhiễm lặp lại đã không chỉ rõ sự loại bỏ DA đã bị biến đổi ra khỏi huyết thanh hoặc những phản ứng độc thần kinh lớn hơn sau những phơi nhiễm đơn.
Số liệu phản ứng-liều lượng hợp lý đã được xác định cho mười người có liên quan trong sự cố ở Canada (người già, trong khoảng từ 60 đến 84 tuổi). Theo các số liệu này thì NOAEL đáng ra là 0,2-0,3 mg DA/kg thể trọng, trong khi LOAEL đã lên tới 0,9-2,0 mg DA/kg thể trọng và sự ngộ độc nghiêm trọng đã được ghi nhận ở 1,9 đến 4,2 mg DA/kg thể trọng. Thật thú vị là việc xác định lượng đưa vào cơ thể đã cho thấy một lượng lớn vẹm xanh đã được tiêu thụ là 120 đến 400 g thịt vẹm cho mỗi người trong bữa ăn (Aune, 2001). Điều này có nghĩa là xuất hiện hệ số hai gữa NOAEL và giới hạn qui định 20 mg DA/ kg thịt vẹm tương đương với 0,1 mg/kg thể trọng cho một người nặng 60 kg với lượng thịt vẹm tiêu thụ là 300g trong một bữa ăn. Giữa LOAEL và giới hạn qui định có môt số dư từ 9 đến 20 và giữa mức tác động nghiêm trọng và giới hạn qui định có một số dư từ 19 đến 42.
8.4. Đánh giá nguy cơ nhiễm độc nhuyễn thể gây ngộ độc thần kinh (NSP) Việc đánh giá nguy cơ không thể thực hiện được do thiếu các số liệu đầy đủ về độc tính và sự khó khăn trong phân tích khi xác định phơi nhiễm brevetoxin.
Quản lý nguy cơ hiện nay (ở các bang nằm trên bờ biển của vịnh Mexico) được dựa trên việc đóng cửa các mức nhuyễn thể ở 5000 tế bào G. breve / lít với sự mở cửa trở lại dựa trờn việc xỏc định PbTx trong nhuyễn thể <80 àg/100 g.
8.5. Đánh giá nguy cơ nhiễm độc Azaspiracid trong nhuyễn thể (AZP)
EU/SANCO (2001) đã tuyên bố rằng dựa trên những sự cố ngộ độc ở Ai- len, lượng AZAs gây ngộ độc ở người được tính toán nằm trong khoảng 6,7 và 24,9 àg. Những số liệu này bao gồm một sự giảm hàm lượng AZAs do nhiệt khi nấu vẹm. Số liệu mới về sự ổn nhiệt thể hiện rằng sự giảm hàm lượng độc tố do nhiệt đã không được chứng minh. Vì vậy, liều lượng tác động có hại quan sát được
312
thấp nhất (LOAEL) được tính toán lại nằm trong khoảng 23 và 86 mg cho mỗi người với giả định lượng tiêu thụ tối đa là 100g nhuyễn thể trong mỗi bữa ăn.
EU/SANCO (2001) đã công bố là lượng cho phép 8 mg AZAs/100g nhuyễn thể không dẫn đến những nguy cơ đáng kể cho sức khỏe con người. Một lượng 16 àg/100 g đó được đề nghị để cú thể phỏt hiện bằng phộp thử sinh học trờn chuột.
Tuy nhiên, với lượng tiêu thụ 300 g nhuyễn thể trong một bữa ăn thì một người đã tiêu thụ một số lượng AZA tương đương với LOAEL ở người.
Ofuji và các cộng sự (1999b) đã báo cáo cho thấy một lượng AZAs tổng số trong thịt vẹm sống trong cỏc vụ ngộ độc là 1,4 àg/g thịt. Ở mức tiờu thụ trong khoảng từ 100 đến 300 g thịt trong một bữa ăn có nghĩa là đưa vào cơ thể 140 đến 420 àg AZAs/người. Khi cỏc con số này thể hiện mức tỏc động (LOAEL) thỡ giỏ trị hệ số 10 luôn được sử dụng để tính toán NOAEL. Điều này có nghĩa NOAEL là 14 đến 42 àg cho một người với giả định lượng thịt nhuyễn thể tiờu thụ từ 100 đến 300 g. Vỡ vậy lượng cho phộp trong thịt nhuyễn thể phải là 14 àg/100 g. Cần chỳ ý rằng không có hệ số 10 được ứng dụng cho NOAEL cho sự khác nhau giữa các loài (sự biến đổi trong cộng đồng con người).
8.6. Đánh giá nguy cơ nhiễm độc Ciguatera trong cá (CFP)
Các số liệu có sẵn về ciguatoxin trên động vật thì không thích hợp cho đánh giá nguy cơ. Vì vậy, các số liệu trên người có nguồn gốc từ các sự cố ngộ độc nên được sử dụng.
Các triệu chứng CFP nhẹ đã xảy ra ở một vài người sau khi ăn cá bị nhiễm độc tố ciguatoxin Thỏi Bỡnh Dương chớnh (P-CTX-1) ở mức 0,1 àg/kg. Độc tố ciguatoxin Caribbean chính (C-CTX-1) ít phân cực và ít độc hơn 10 lần so với P- CTX-1. Giả định rằng một người nặng 50 kg ăn 500g cá trong một bữa ăn thì tương ứng với 0,001 àg/kg thể trọng (=LOAEL). Những số liệu này thu thập được từ một lượng thức ăn lớn chứa các loại cá ít độc nhất đã gây nên các tác động ở một số người. 0,01 àg/kg thể trọng là giỏ trị cao gấp mười lần mức gõy ra cỏc triệu chứng nhẹ ở vài người được cho là đủ để gây độc đối với đa số người. Bằng cách ứng dụng một hệ số không chắc chắn là 10 (cho sự khác biệt giữa các loài) cho mức thấp nhất gây nên triệu chứng nhẹ ở người (=LOAEL), một mức an toàn là 0,01 àg/kg thịt cỏ cú thể được tớnh toỏn (Lehane, 2000; Lehane và Lewis, 2000).
Cần chú ý rằng sử dụng thường xuyên một hệ số không chắc chắn là 10 cho LOAEL để tính NOAEL đã được thực hiện.
8.7. Kết luận
Hiện nay đánh giá nguy cơ phycotoxins vẫn chưa được thực hiện theo theo hướng đơn giản hóa. Quản lý nguy cơ và đánh giá nguy cơ đã bị trộn lẫn trong một quá trình làm phức tạp các bước thực hiện. Nhìn chung, thiếu các số liệu độc tố học đặc trưng trong phơi nhiễm lặp lại. Các số liệu dịch tễ học tồn tại chủ yếu trong các sự cố nhiễm độc với những hạn chế vốn có. Điều này đã tích tụ tất cả