KỸ THUẬT MỔ MUỖI
3. CÁCH LẤY VÀ XỬ LÝ BỆNH PHẨM TÌM NẤM
Lấy, vận chuyển và xử lý bệnh phẩm rất quan trọng trong việc xỏc ủịnh nguyờn nhõn gõy bệnh. Chỉ những bệnh phẩm ủược lấy và xử lý ủỳng quy cỏch mới cú thể phỏt hiện ủược tỏc nhõn gõy bệnh rừ ràng nhất. Bởi vỡ một bệnh phẩm ủược lấy khụng ủỳng quy cỏch cú thể bị nhiễm những chủng nấm thường trỳ và gây khó khăn trong việc biện luận kết quả do dương giả hay âm giả.
3.1. Lấy bệnh phẩm
– Bệnh phẩm thường ủược lấy trong phũng mổ, tại giường hoặc ở nơi khỏc nờn trỏch nhiệm của phũng thớ nghiệm là cử nhõn viờn ủến với dụng cụ thớch hợp. Tất cả bệnh phẩm ủều ủược xem là nguy hiểm và phải xử lý hết sức thận trọng. Lọ chứa bệnh phẩm khụng ủược rũ rỉ và ủựng trong một hộp nhựa chuyển ủến phũng thớ nghiệm. Ống tiờm chứa dịch hỳt phải ủược rỳt kim ra và ủậy kớn trước khi vận chuyển.
– Với tất cả cỏc bệnh, bệnh phẩm tốt nhất ủể xỏc ủịnh tỏc nhõn gõy bệnh là nơi nhiễm. Tuy nhiờn, nếu tác nhân gây bệnh phát tán theo đường máu thì cĩ thể lấy máu để chẩn đốn. Việc lấy bệnh phẩm để cấy nấm cũng tương tự như ủể cấy vi khuẩn. Nờn hạn chế dựng tăm bụng ủể lấy bệnh phẩm và nờn lấy bệnh phẩm ở sâu hơn.
Những ủiều cần lưu ý khi lấy bệnh phẩm tỡm vi nấm:
– Bệnh nhõn phải ngưng ủiều trị trước khi lấy bệnh phẩm 7 – 10 ngày.
– Khi lấy các loại bệnh phẩm phải tuân theo các kỹ thuật vô trùng.
– Phải lấy bệnh phẩm ủỳng chỗ và ủủ nhiều ủể cú thể làm cỏc kỹ thuật xột nghiệm khỏc nhau (soi tươi và/hoặc cấy).
3.2. Bệnh phẩm
– Một số bệnh phẩm do y bác sĩ chuyên khoa lấy.
– Một số bệnh phẩm ủược lấy tại phũng xột nghiệm: da, túc, múng, mủ, mỏu.
– Một số bệnh phẩm bệnh nhân tự lấy: nước tiểu, phân,…
a) Tóc
– Chọn những sợi túc phỏt huỳnh quang dưới ỏnh sỏng ủốn cực tớm (ủốn Wood).
– Quan sỏt ủầu bệnh nhõn, chọn những sợi túc mất búng, xốp, mất màu, dễ góy hoặc những hạt màu ủen bám thật chặt vào sợi tóc.
– Nếu cú thể ủược, cho bệnh nhõn bụi thuốc ủỏ lờn vựng túc nghi nhiễm nấm, ủể qua ủờm, hụm sau gội sạch ủể khụ, chọn những sợi túc cũn giữ màu thuốc ủỏ.
b) Da
– Dùng cồn 70o sát trùng vùng da bị nhiễm nấm, dùng dao mổ vô trùng cạo da ở bờ vết thương cho các vẩy da rớt lên tiêu bản hoặc vào hộp Petri vô trùng.
– Da rộp lên nghi do lang ben: dùng băng keo dán lên da, gỡ miếng băng keo ra, dán vẩy da lên tiêu bản hoặc có thể cạo da, lấy vẩy quan sát.
c) Móng
– Dùng cồn 70o sát trùng móng nghi nhiễm nấm, dùng dao mổ vô trùng cạo móng hoặc những cục lùi xùi giống như bông cải dưới móng, hứng bột móng lên tiêu bản hay vào hộp Petri vô trùng.
– Nếu móng có mủ: lấy mủ bằng que quấn gòn (bông) vô trùng.
d) đàm (ựờm)
Lấy ủàm sỏng sớm lỳc bệnh nhõn ngủ dậy, sỳc miệng thật sạch, khạc ủàm vào lọ miệng rộng cú nắp vặn vô trùng.
e) Phết họng
Làm phết họng bằng que quấn gòn vô trùng và cho bệnh phẩm vào ống nghiệm vô trùng.
f) Mủ
Lấy mủ bằng que quấn gòn vô trùng ở ống tai, viêm da, viêm kẽ, viêm móng,… cho vào ống nghiệm vô trùng.
g) Mụn bọc
Dùng kim chích vô trùng lấy mủ.
h) Mảnh giác mạc
Do bỏc sĩ chuyờn khoa lấy: cạo một mảnh vết loột hoặc ghốn cho vào lọ ủựng NaCl 0,85% vụ trựng.
i) Máu
Cấy tìm nấm: lấy 5ml máu tĩnh mạch, cho vào chai có 50ml BHI (môi trường tim, óc hầm) hay Trypticase Soy, ủ ở 37oC.
k) Các dịch: dịch não tủy, dịch màng phổi, nước rửa phế quản,…
Cỏc dịch ủược lấy và cho vào lọ chứa vụ trựng.
l) Mẫu sinh thiết
Cỏc mẫu sinh thiết ủược chia làm 2 phần:
– Một phần cho vào dung dịch NaCl 0,85% ủể làm xột nghiệm tỡm vi nấm.
– Một phần cho vào dung dịch cố ủịnh (Formol 10%, Bouin), ủể làm tiờu bản giải phẫu bệnh lý.
m) Phân
Lấy mẫu phân vào lọ miệng rộng vô trùng.
n) Nước tiểu
Tốt nhất là lấy nước tiểu giữa dòng, cho vào ống nghiệm vô trùng.
o) Huyết trắng (dịch õm ủạo)
Lấy bằng que quấn gòn vô trùng: phết ở túi cùng Douglad hay các mảng trắng, cho vào ống nghiệm có dung dịch NaCl 0,85% vô trùng.
3.3. Cách xử lý bệnh phẩm
Bờn cạnh việc lấy bệnh phẩm chớnh xỏc, việc vận chuyển và bảo quản bệnh phẩm ủỳng quy cỏch cũng là yếu tố cần thiết ủể vi nấm sống sút. Trong cỏch xử lý bệnh phẩm, ta cần chỳ ý ủến cỏc yếu tố sau ủõy:
a) Thời gian. Bệnh phẩm sau khi ủược lấy ủỳng cỏch, dỏn nhón và vận chuyển ủến phũng thớ nghiệm nờn ủược xử lý càng sớm càng tốt.
b) Nhiệt ủộ
Vi nấm cú thể bị ảnh hưởng bởi nhiệt ủộ núng và lạnh, vỡ vậy, chỉ nờn ủể ở nhiệt ủộ phũng trong vũng 2 giờ sau khi lấy bệnh phẩm. Hầu hết bệnh phẩm và bệnh phẩm cú khả năng nhiễm khuẩn cú thể giữ ủược ở 4oC; bệnh phẩm là hệ thần kinh trung ương bảo quản ở 30oC. ðối với da, tóc, móng, có thể vận chuyển qua ủường bưu ủiện và ở những nơi xa.
c) Khụng nờn xử lý những bệnh phẩm nghi ngờ lấy khụng ủỳng quy cỏch, như là bệnh phẩm lấy ở vị trớ khụng phự hợp, lọ chứa bị rũ rỉ vỡ kết quả xột nghiệm cú thể bị sai lệch, khụng phản ảnh ủỳng tỡnh trạng bệnh lý. Phải thụng bỏo cho bỏc sĩ lõm sàng ngay lập tức nếu bệnh phẩm bị bỏ, khụng ủược xử lý; hoặc thụng bỏo tỡnh trạng nghi ngờ nếu bệnh phẩm tiếp tục ủược xử lý. Cỏc bệnh phẩm bỏ ủi ủều phải ủược tiệt khuẩn trước khi bỏ.
d) Cần xử lý trước một số bệnh phẩm chọn lọc ủể làm tăng khả năng phỏt hiện vi nấm, quy trỡnh bao gồm ly tõm (ủể tập trung vi nấm), ly giải tế bào mỏu (ủể phúng thớch vi nấm khỏi tế bào) và cắt lỏt hoặc ngõm (ủể
tăng bề mặt tiếp xúc của bệnh phẩm).
Ngoài việc soi trực tiếp dưới kính hiển vi, phát hiện kháng nguyên và/ hoặc làm phương pháp sinh học phõn tử, tất cả cỏc bệnh phẩm ủều ủược cấy ủể phỏt hiện và ủịnh danh vi nấm.
CÂU HỎI LƯỢNG GIÁ
1. Tại sao phải lấy bệnh phẩm ủỳng quy cỏch?
2. ðể cú kết quả xột nghiệm ủược chớnh xỏc, anh (chị) cần chỳ ý những ủiều gỡ khi lấy bệnh phẩm 3. Liệt kê những bệnh phẩm có thể làm xét nghiệm tìm nấm?
4. Mô tả cách lấy bệnh phẩm da, tóc, móng.
5. Cú nờn xử lý mẫu bệnh phẩm lấy khụng ủỳng quy cỏch? Tại sao?
Bài 22