Mơ tả quy trình: Dạ dày sau khi thu nhận sẽ được rửa nhẹ dưới vịi nước để
loại thức ăn thừa, loại bỏ mỡ và các mơ liên kết. Tiếp đĩ dạ dày được cắt nhỏ và xay nhuyễn để phá vỡ tế bào, cân ghi lại trọng lượng dạ dày. Cho dung dịch HCl 0,5% vào dạ dày đã xay nhuyễn để tạo pH thích hợp cho enzym hoạt động theo tỷ lệ 1:2, sau đĩ để dung dịch vào tủ ấm 40-450C để enzym thủy phân. Sau một thời gian lấy dung dịch thử với acid nitric thấy khơng cĩ xuất hiện kết tủa trắng là quá trình thủy phân kết thúc. Lọc nhiều lần lấy nước trong, trung hịa dung dịch bằng NaHCO3 đến pH 7 rồi cơ đặc dung dịch trên bình cách thủy 600C thu sản phẩm dạng đặc sệt. Sản phẩm cĩ màu vàng giống mạch nha, mùi thơm đặc trưng.
Lấy dịch lọc đem xác định hàm lượng Nitơ-formol và Nitơ-tổng số theo mục 2.2.7 và 2.2.8. Tỷ lệ N-formol/ N-tổng của pepton-pepsic phải đạt nhỏ hơn 20% (khoảng từ 7-17%). 2.2.12.3 Thu nhận pepton-pancreatic [21]
Sơ đồ 2.6: Quy trình thu nhận pepton-pancreatic pepton-pancreatic
Mơ tả quy trình: tụy tạng sau khi thu nhận sẽ được rửa nhẹ, loại bỏ mỡ và
các mơ liên kết. Tiếp đĩ tụy được cắt nhỏ và xay nhuyễn để phá vỡ tế bào, đem cân ghi lại trọng lượng tụy. Cho dung dịch NaHCO31,25% vào tụy đã xay nhuyễn để tạo pH thích hợp cho enzym hoạt động theo tỷ lệ 1:2, tự phân vài giờ ở 20-300C. Sau một thời gian lấy dung dịch thử với acid nitric thấy khơng cĩ xuất hiện kết tủa trắng là quá trình thủy phân kết thúc. Lọc nhiều lần lấy nước trong, trung hịa dung dịch bằng NaHCO3 đến pH 7 rồi cơ đặc dung dịch trên bình cách thủy 600C thu sản phẩm dạng đặc sệt. Sản phẩm cĩ màu nâu, mùi thơm đặc trưng.
Lấy dịch lọc đem xác định hàm lượng Nitơ-formol và Nitơ-tổng số theo mục 2.2.7 và 2.2.8. Tỷ lệ N-formol/ N-tổng của pepton-pancreatic phải đạt lớn hơn 20% (khoảng từ 20-28%).
2.2.13 Phương pháp thu nhận protein từ phế liệu lị mổ
2.2.13.1 Phương pháp thu nhận Hemoglobine [1,2]
2.2.13.1.1 Nguyên liệu: Sử dụng huyết heo để thu nhận hemoglobin. Huyết được thu nhận ngay sau khi con vật bị giết mổ và sử dụng NaCl cho vào huyết để tránh bị đơng tụ.
2.2.13.1.2 Hĩa chất và dụng cụ
- Máy điều chỉnh pH - Cồn 960, Tannin
2.2.13.1.3 Phương pháp tiến hành
- Thu nhận hemoglobin theo phương pháp dùng pI: tại điểm pH nhất định
protein cĩ điện tích dương bằng điện tích âm, tổng số điện tích của phân tử bàng khơng gọi là điểm đẳng điện của protein (pI). Ơû giá trị pH = pI thì protein khơng tích điện sẽ khơng chuyển dịch trong điện trường, phân tử protein kém bền nhất cĩ
75
% Hiệu suất =
M x (100 – w) x 100%
thể gắn kết với nhau và kết tủa. Điểm đẳng điện của hemoglobin là 6,8. Sử dụng acid citric 0,1N để điều chỉnh pH của dung dịch huyết tới pI của hemoglobin, kết tủa xuất hiện, ly tâm thu kết tủa và sấy khơ ở nhiệt độ < 500C, sản phẩm thu được ở dạng bột khơ.
- Thu nhận hemoglobin sử dụng tác nhân kết tủa là cồn 960: thể tích cồn sử
dụng theo tỷ lệ 1:3 (1 thể tích huyết: 3 thể tích cồn). Sử dụng cồn lạnh cho từ từ vào dung dịch huyết, sau đĩ ly tâm thu tủa và sấy khơ ở nhiệt độ < 500C, sản phẩm hemoglobin thu được ở dạng bột khơ.
- Thu nhận hemoglobin sử dụng tác nhân kết tủa là Tannin: Tannin là
những hĩa chất cĩ gốc phenol cĩ khả năng kết tủa, khi gặp protein, tannin sẽ làm protein kết tủa. Cho tannin từ từ vào dung dịch huyết để kết tủa dần hình thành, cho đến khi nào thử dịch lọc khơng thấy kết tủa nữa thì dừng lại, ly tâm thu kết tủa, sấy nhiệt độ < 500C thu được sản phẩm protein bột khơ.
Sản phẩm bột khơ sau đĩ sẽ được tiến hành xác định hàm lượng Nitơ-tổng số theo Kjeldahl (mục 2.2.8).
2.2.13.1.4 Cơng thức tính hiệu suất thu nhận protein:
m
Trong đĩ: m: lượng Hb thu nhận được (g) M: trọng lượng mẫu huyết (g) w: độ ẩm của mẫu (%)
2.2.13.2 Phương pháp thu nhận fibrin [61]
2.2.13.2.2 Hĩa chất và dụng cụ
- Máy ly tâm (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Dung dịch NaCl 0,8% - Dung dịch CaCl2 2,5% - Kali oxalate (K2C2O4.H2O)
2.2.13.2.3 Tiến hành
Huyết heo hay bị (bổ sung Kali oxalate)
Ly tâm Plasma NaCl 0,8% CaCl2 2,5% Để yên 10-15 phút Lọc
Rửa tủa bằng NaCl 0,8%
Sấy khơ nhiệt độ < 500C Fibrin