1000 U/L Laccase
3.1.2. Phân lập và phân loại xạ khuẩn
3.1.2.1. Phân lập xạ khuẩn
Từ nguồn đất ở 2 khu vực đã mô tả trong phần vật liệu và phương pháp nghiên cứu, 8 chủng xạ khuẩn đã được phân lập trong đó có 2 chủng là XKBHN1, XKBHN2 từ đất khu vực Tây - Nam và 6 chủng là XKBiR1, XKBiR2, XKBiR3, XKBiR4,
XKBiR929 và XKBiR930 từ đất nguyên thủy (trước khi xử lý khu vực Z1) ô nhiễm chất diệt cỏ chứa dioxin tại sân bay Biên Hịa. Các chủng này có dạng khuẩn lạc trịn, bơng mịn, khác nhau chủ yếu ở màu sắc và sắc tố giọt tiết tạo ra. Đây là những nguyên liệu đầu vào để tiếp tục nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp laccase-like và từ đó lựa chọn các chủng có hoạt tính cao để tiếp tục nghiên cứu. Hai chủng XKBHN1 và XKBiR929 là đại diện 2 khu vực của sân bay Biên Hòa đã được chọn để phân loại bởi chúng có khả năng sinh tổng hợp laccase-like nằm trong khoảng khá rộng và hoạt tính cao nhất lần lượt là 200 và 720 U/L (Bảng 3.2).
Bảng 3.2. Hoạt tính laccase-like của các chủng xạ khuẩn
STT Chủng Nguồn phân lập Hoạt tính (U/L)
1 XKBHN1 Đất khu vực ơ nhiễm Tây-Nam 200
2 XKBHN2 sân bay Biên Hòa -
3 XKBiR1 7,15
4 XKBiR2 0,97
5 XKBiR3 Đất khu vực ô nhiễm Z1 sân bay -
6 XKBiR4 Biên Hòa 1,18
7 XKBiR929 720
8 XKBiR930 606
Chú thích: (-) khơng xác định được
3.1.2.2. Phân loại chủng xạ khuẩn XKBHN1 và XKBiR929
Hai chủng xạ khuẩn được nuôi cấy và sau 4 ngày trên mơi trường muối khống Gause M chứa DCĐ (mơi trường có màu vàng nhạt), các đặc điểm hình thái, khuẩn lạc và hình thái bào tử của chúng được trình bày ở Bảng 3.3 và Hình 3.3.
Bảng 3.3. Đặc điểm hình thái khuẩn lạc của hai chủng xạ khuẩn XKBHN1
và XKBiR929
Đặc điểm Chủng XKBHN1 Chủng XKBiR929
Bề mặt bông xốp, khuẩn lạc Bề mặt bơng xốp, khuẩn lạc Hình thái đều nhô cao, nhăn ở tâm, khuẩn đều nhô cao, nhăn ở tâm, khuẩn
ty khí sinh phát triển tốt, ty khí sinh phát triển tốt
Kích thước Đường kính khuẩn lạc 4-5 mm Đường kính khuẩn lạc 3-4 mm Khuẩn ty khí sinh có màu hồng Khuẩn ty khí sinh có màu nâu, Màu sắc nhạt, khuẩn ty cơ chất có màu khuẩn ty cơ chất khơng có màu.
cam nâu nhạt
Bào tử trần, hình trứng kết dính Bào tử hình trứng, có gai, kết Bào tử với nhau tạo thành các chuỗi dính với nhau tạo thành hình
dạng xoắn móc đường kính 0,6 xoắn móc, đường kính 1 đến
- 0,9 µm 1,16 µm