3.4.1. Bệnh nhân 01
3.4.1.1. Xét nghiệm lâm sàng, hóa sinh
Lâm sàng: Khi nhập viện trẻ mệt, nặng 30 kg, nhịp tim 75 lần/phút, thở 20 lần/phút, huyết áp 100/80 mmHg, da xạm, liệt mềm tứ chi, không rối loạn cảm giác, không rối loạn cơ tròn, cơ lực bình thường, phản xạ gân xương bình thường, không liệt dây thần kinh sọ, không dấu hiệu thần kinh khu trú, không có cầu bàng quang. Biểu hiện bộ phận sinh dục ngoài bất thường, có kiểu hình của nam.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Bảng 3.2. Kết quả xét nghiệm hóa sinh bệnh nhân 01
Tên xét nghiệm Nồng độ ở bệnh nhân Nồng độ bình thƣờng
Ca2+ (mmol/L) 0,8 1,16 - 1,32
Na+ (mmol/L) 137 135 – 155
K+ (mmol/L) 2,0 3,5 - 5,5
Cortisol lúc 8h (mmol/L) 340,9 83 – 580
ACTH (pmol/L) 10,5 Dưới 18
Testosterone (nmol/L) 9 0,35 - 2,60
17-OHP (ng/L) 0,87 Dưới 0,2
Từ những kết quả bảng 3.2, nhận định ban đầu được đưa ra là bệnh nhân mắc CAH, suy giảm một phần 11β-hydroxylase khi lượng muối trong cơ thể giảm cùng với hai loại steroid hormone đại diện cho hormone nam giới là testostrone và 17-OHP tăng cao trong khi huyết áp và hàm lượng cortisol vẫn đạt mức bình thường.
3.4.1.2. Phân tích trình tự phát hiện đột biến
Sản phẩm DNA tinh sạch được đọc trình tự bằng các cặp mồi đã nêu ở bảng 2.2. Trong quá trình này, bên cạnh việc giải trình tự các vùng exon, để chắc chắn không có đột biến xảy ra tại những vùng không mã hóa thông tin, những vùng biên bao quanh các exon cũng đã được đọc trình tự. Kết quả giải trình tự gen được đưa lên phần mềm tin học BioEdit. Trên phần mềm này, trình tự gen CYP11B1 của người bệnh được so sánh với trình tự gen CYP11B1 chuẩn trên ngân hàng gen người.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Hình 3.5. Phân tích di truyền đột biến ở bệnh nhân 01. A, Vị trí các đột biến ở bệnh nhân trên gen CYP11B1. B, Sơ đồ phả hệ di truyền bệnh từ bố mẹ. Ia, Ib: bố và mẹ; hình vuông: nam giới, hình tròn: nữ giới. II: con. C, Kết quả trình tự trình tự gen.
Kết quả phân tích trình tự phát hiện 2 đột biến dị hợp tử trên exon 3 ở gen
CYP11B1 của người bệnh (Hình 3.5). Một đột biến xảy ra tại vị trí 441 trên cDNA
CYP11B1, A bị thay thế thành T, làm biến đổi bộ ba mã hóa GAA thành GAT. Sự thay thế nucleotide trên cDNA dẫn đến sự thay thế acid amin trên chuỗi protein ở vị trí codon 147, Lutamic bị thay thế thành Aspartic. Đột biến thứ 2 phát hiện trên exon này là đột biến tại vị trí c.456, C bị thay thế bởi G, làm biến đổi bộ ba mã hóa acid amin AAC thành AAC. Sự biến đổi của bộ ba mã hóa này cũng dẫn đến sự thay đổi của acid amin trên chuối protein, Asparagine bị thay thế bởi Lysine.
3.4.1.3. Biểu hiện của đột biến trong tế bào động vật
Các protein đột biến và protein hoang dại được biểu hiện cùng với plasmid pBAdx4 trong tế bào COS-1 để phân tích và so sánh đặc tính của các thể đột biến. Sự
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
biểu hiện đồng thời với pbAdx đã được chứng minh là có ích trong việc tăng hoạt tính của CYP11B1 cũng như CYP11B2 trong hệ biểu hiện tế bào động vật COS-1 [20].
Sự biểu hiện của CYP11B1 hoang dại và đột biến trong tế bào động vật COS-1 được xác định lại bằng lai Western (Hình 3.6). Sự biểu hiện của 11β-hydroxylase của đột biến (p.E147D và p.N152K) và hoang dại đã được phát hiện với một băng có kích thước khoảng 48,6 kDa. Điều này chứng tỏ rằng 2 đột biến và hoang dại đã được biểu hiện trong tế bào động vật và không ảnh hưởng tới sự dịch mã của 11β-hydroxylase.
Hình 3.6. Phân tích lai Western về sự biểu hiện của CYP11B1 ở bệnh nhân 01trong tế bào COS-1. Các tế bào COS-1 sau biến nạp được nuôi trong môi trường có cơ chất 11-deoxycortisol (RSS). Protein của CYP11B1-WT, p.E147D, p.N152K và Mock (vector pSVL không mang cDNA của CYP11B1) được phân tách trên gel SDS- PAGE. Sau khi chuyển qua màng nitrocellulose, các protein được phát hiện bằng kháng thể thỏ kháng CYP11B người và được phát hiện trên phim bằng kit ECL.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Hình 3.7. Hoạt tính của 11β-hydroxylase ở tế bào động vật COS-1. Sau khi biến nạp 5 µM 11-deoxycortisol (RSS) và 0,6 µCi [3
H]-RSS được thêm vào môi trường nuôi tế bào. Các thành phần của steorid được chuyển hóa từ cơ chất RSS tới cortisol (F), thí nghiệm được tiến hành 3 lần lặp lại độc lập. Sự chuyển hóa RSS tới F của thể hoang dại được tính là 100%. Hoạt tính của đột biến được biểu hiện được so sánh với thể hoang dại.
Sau khi sự biểu hiện protein được xác định bằng lai Western và tế bào COS-1 được ủ với cơ chất 11β-deoxycortisol để kiểm tra hoạt tính enzyme của protein biểu hiện. Sau 72 h nuôi cấy, các steroid được tách chiết và phân tách trên sắc ký lớp mỏng. Hoạt tính của của 2 đột biến p.E147D, và p.N152K được so sánh với thể hoang dại (Hình 3.7). Đột biến p.E147D giảm hoạt tính tới 52% so với thể hoang dại. Đột biến p.N152K giảm khoảng 64% hoạt tính so với thể hoang dại.
3.4.2. Bệnh nhân 02
3.4.2.1. Xét nghiệm lâm sàng, hóa sinh
Xét nghiệm lâm sàng: Ngay sau đẻ đã thấy bộ phận sinh dục ngoài bất thường, khám lúc 3 tuổi (14/11/1998). Biểu hiện: ngoại hình nữ, cơ bắp phát triển, cao 98 cm, nặng 15 kg, âm vật như dương vật dài 2 cm, Prader III. Huyết áp 120/80 mmHg; Các
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
xét nghiệm: Nhiễm sắc thể 46,XX; SRY (-); siêu âm không có u thượng thận; Chụp X quang: tuổi xương tương đương trẻ 7 tuổi (tuổi thực 3 tuổi) và tuổi xương tương đương trẻ 13 tuổi khi tuổi thực là 8 tuổi.
Xét nghiệm hóa sinh (Bảng 3.3)
Bảng 3.3. Kết quả xét nghiệm hóa sinh bệnh nhân 02
Tên xét nghiệm Nồng độ ở bệnh nhân Nồng độ mức bình thƣờng
Ca2+ (mmol/L) 0,8 1,16 - 1,32
Na+ (mmol/L) 137 135 – 155
K+ (mmol/L) 3,8 3,5 - 5,5
Cortisol lúc 8h (mmol/L) 478 83 – 580
ACTH (pmol/L) 10,5 Dưới 18
Testosterone (nmol/L) 20,9 0,35 - 2,60
17-OHP (ng/L) 0,57 Dưới 0,2
17CS niệu µmol/24 giờ 20,6 Dưới 7
17-OHCS µmol/24 giờ 15,1 2,8 – 15,5
3.4.2.2. Phân tích trình tự phát hiện đột biến
Kết quả phân tích và so sánh trình tự gen CYP11B1 của bệnh nhân 02 với gen
CYP11B1 của người bình thường phát hiện một đột biến mới ở exon 1. Đột biến thay thế nucleotide G thành A tại vị trí 152 trên chuỗi cDNA. Đột biến dẫn đến sự thay đổi
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
bộ ba AGG mã hóa acid amin Arginine thành bộ ba AAG mã hóa acid amin Lysine. Vì thế đột biến p.R51K xảy ra tại vị trí codon 51 trên chuỗi protein CYP11B1 (Hình 3.8).
Hình 3.8. Phân tích di truyền đột biến ở bệnh nhân 02. A, Vị trí các đột biến ở bệnh nhân trên gen CYP11B1. B, Sơ đồ phả hệ di truyền bệnh từ bố mẹ. Ia, Ib: bố và mẹ; hình vuông: nam giới, hình tròn: nữ giới. II: con. C, Kết quả trình tự trình tự gen.
3.4.2.3. Biểu hiện của đột biến trong tế bào động vật
Vấn đề đặt ra là liệu đột biến này có ảnh hưởng thế nào đến biểu hiện lâm sàng hóa sinh của người bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh? Để trả lời câu hỏi này, đột biến p.R51K được biểu hiện trong tế bào động vật COS-1, so sánh với kiểu gen bình thường. Tế bào COS-1 có nguồn gốc từ tế bào vỏ thượng thận của khỉ được nuôi ở tủ ấm CO2 (370C và 6% CO2) trên môi trường DMEM.
Bằng phương pháp tạo đột biến điểm trực tiếp và biểu hiện thể đột biến trong tế bào động vật theo nghiên cứu của Nguyễn Huy Hoàng và cộng sự năm 2008 [20], sản phẩm steroid được so sánh và phân tích khá chính xác (Hình 3.9).
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Hình 3.9. Phân tích Western blot về sự biểu hiện của CYP11B1 ở bệnh nhân 02 trong tế bào COS-1. Protein của CYP11B1-WT, p.R51K, và Mock (vector pSVL không mang cDNA của CYP11B1) được phân tách trên gel SDS/PAGE. Sau khi chuyển qua màng nitrocellulose, các protein được phát hiện bằng kháng thể thỏ kháng CYP11B người và được phát hiện trên phim bằng kit ECL.
Kết quả cho thấy sự biểu hiện của 11β-hydroxylase của đột biến p.R51K và wild-type đã được phát hiện với một băng có kích thước khoảng 48,6 kDa. Tế bào COS-1 sau khi được biến nạp với vector mang đột biến p.R51K và wild type được ủ với cơ chất 11-deoxycortisol để kiểm tra hoạt tính enzyme. Sau 72 h nuôi cấy, các steroid được tách chiết và phân tách trên sắc ký lớp mỏng.
Hình 3.10. Hoạt tính enzyme của 11-hydroxylase ở tế bào động vật COS-1 ở bệnh nhân 02.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Sau khi biến nạp 5 µM 11-deoxycortisol (RSS) và 0,6 µCi [3H]-RSS được thêm vào môi trường nuôi tế bào. Các thành phần của steorid được chuyển hóa từ cơ chất RSS tới cortisol (F) thí nghiệm được lặp lại 3 lần độc lập. Sự chuyển hóa RSS tới F của chủng wild-type được tính là 100%. Hoạt tính của đột biến được biểu hiện được so sánh với wild-type. Hoạt tính của đột biến p.R51K được so sánh với wild-type (Hình 3.10). Đột biến p.R51K giảm hoạt tính của 11β-hydroxylase chỉ còn 29 ± 4,5% so với wild-type.
3.4.3. Bệnh nhân 03
3.4.3.1. Xét nghiệm lâm sàng, hóa sinh
Xét nghiệm lâm sàng: Bệnh nhân được gia đình đưa đến bệnh viện Nhi Trung ương tại Hà Nội lúc 4 tuổi với lí do sốt kép dài. Thăm khám lâm sàng và khai thác bệnh sử cho thấy: sạm da từ sau khi sinh, đặc biệt sạm nhiều ở bộ phận sinh dục ngoài; có các biểu hiện của dậy thì sớm như: chiều cao > 2SD so với trẻ bình thường (109 cm), trứng cá, giọng ồm, cơ bắp vạm vỡ, thể tích tinh hoàn 3 ml, chiều dài dương vật 5 cm, chu vi dương vật 7 cm; cao huyết áp (140/90 mmHg). Phim chụp tuổi xương tương đương 9 tuổi. Siêu âm tuyến thượng thận: không thấy khối u vùng tuyến thượng thận hai bên. Kết quả xét nghiệm hóa sinh trong bảng 3.4.
Bảng 3.4 Kết quả xét nghiệm hóa sinh bệnh nhân 03
Tên xét nghiệm Nồng độ ở bệnh nhân Nồng độ mức bình thƣờng
Na+ (mmol/L) 141 135 - 155
K+ (mmol/L) 2,2 3,5 - 5,5
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
17-OHP (ng/L) 0,57 Dưới 0,2
17CS nước tiểuµmol/24 giờ 21,3 Dưới 7
Trẻ được chẩn đoán tăng sản thượng thận bẩm sinh do thiếu hụt 11β- hydroxylase và được điều trị bằng hydrocortisone 12.5 mg/m2/ngày. Sau 2 tuần điều trị huyết áp đo được là 130/80 mmHg; điện giải đồ máu là Na+
: 142(mmol/L); K+ 3,4 (mmol/L) và Cl-: 111 (mmol/l).
Trong quá trình điều trị, gia đình đã không cho trẻ uống thuốc hydrocortisone đều đặn và không đưa trẻ đến bệnh viện để thăm khám định kì. Kết quả thăm khám sau 6 năm như sau: chiều cao 139 cm; cân nặng 41 kg; huyết áp 130/100 mmHg. Da còn thâm nhiều, nhiều trứng cá, lông mu phát triển, tinh hoàn hai bên 3 ml, dương vật như người trưởng thành. Phim tuổi xương tương đương 13 tuổi. Siêu âm tuyến thượng thận hai bên: thượng thận phải dài 4,6 cm, dầy 1,7 cm; thượng thận trái dài 4,7 cm, dày 1,8 cm. Điện giải đồ máu: Na+
142; K+ 2,7 và Cl- 103 mmol/l; đường máu 5,2 mmol/l. Khí máu pH 7,49; pCO2 45,3; HCO3- 33,9. 17OHP huyết thanh là 4230 ng/dl.
3.4.3.2. Phân tích trình tự phát hiện đột biến
Đây là một trường hợp có biểu hiện rất điển hình của bệnhTSTTBS do đột biến trên gen CYP11B1. Toàn bộ gen CYP11B1 được khuếch đại từ DNA tổng số của bệnh nhân và tiến hành giải trình tự. Một đột biến mới đã được phát hiện khi so sánh trình tự gen CYP11B1 của bệnh nhân với trình tự gen CYP11B1 của người bình thường. Đây là đột biến đồng hợp tử C được thay thế A tại vị trí 1185 trên cDNA tại exon 7 của genCYP11B1, dẫn đến sự thay đổi của Tyrosine 395 tạo thành Stop codon (p.Y395X) (Hình 3.11).
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Hình 3.11. Phân tích di truyền đột biến ở bệnh nhân 03.A, Vị trí các đột biến ở bệnh nhân trên genCYP11B1. B, Sơ đồ phả hệ di truyền bệnh từ bố mẹ. Ia, Ib: bố và mẹ; hình vuông: nam giới, hình tròn: nữ giới. II: con. C, Kết quả trình tự trình tự gen.
Em gái của bệnh nhân 03 có hiện tượng mơ hồ giới tính lúc sinh ra do biểu hiện bên ngoài của bộ phận sinh dục không rõ ràng và chết sớm khi được 18 tháng. Bệnh nhân có kiểu gen đột biến đồng hợp tử nên khả năng lớn xảy ra là bố và mẹ của bệnh nhân này đều có kiểu gen dị hợp, mang alen đột biến.
3.5. Phân tích cấu trúc
3.5.1. So sánh trình tự amino acid của CYP11B1
CYP11B1
CYP11B1
- -
cortisol c -
ra aldosterone. Trong tách dòng và phân tích CYP11B1, White và các đồng sự đã phân lập một gen trao đổi chéo, và xác định được trình tự của CYP11B2 có tỷ lệ 95% giống so với CYP11B1 trong vùng mã hóa exon và 90% trong vùng không mã hóa intron [63]. Để tìm hiểu về mối quan hệ giữa cấu trúc và chức năng của CYP11B1 đòi hỏi
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
phải nghiên cứu về cấu trúc không gian 3D của enzyme này. Trình tự amino acid của CYP11B1 ở người được so sánh với trình tự CYP11B1 và CYP11B2 của bò, chuột, lợn để tìm ra những vùng cấu trúc quan trọng. Năm 2001, Belkina và cộng sự cũng thành công khi lần đầu tiên đưa ra được mô hình cấu trúc của 3D của CYP11B1 và CYP11B2. Trong nghiên cứu đó, nhóm tác giả dựa trên trình tự của P450 của vi khuẩn là CYP102, CYP108 để mô phỏng cấu trúc của CYP11B ở người[10].
Sau khi tiến hành so sánh trình tự của các P450 trên phần mềm ClustalW2, kết quả thu được như sau:
A-Helix A1-Helix hC11B1 ---MALRAKAEVCMAVPWLSLQRAQALGTRAARVPRTVLPFEAMPQRPGNRWL 50 hC11B2 ---MALRAKAEVCVAAPWLSLQRARALGTRAARAPRTVLPFEAMPQHPGNRWL 50 pC11B1 ---MAIWAKAEAWLAGPWLALNRARTLGTRAVLAPKGVLPFEAIPQFPGKKWM 50 bC11B1 ---MALWAKARVRMAGPWLSLHEARLLGTRGAAAPKAVLPFEAMPRCPGNKWM 50 rC11B1 ---MALRVTADVWLARPWQCLHRTRALGTTAKVAPKTLKPFEAIPQYSRNKWL 50 hmC11B1 ---MTMALRVTTDVWLARPWQCLHRTRALGTTATLAPKTLQPFEAIPQYSRNKWL 52 rC11B2 MGACDNDFIELHSRVTADVWLARPWQCLHRTRALGTTATLAPKTLKPFEAIPQYSRNKWL 60 mC11B2 ---MALRVTADVWLARPWQCLHRTRALGTTATLAPKTLQPFEAIPQYSRNKWL 50 : .: . . : .: . : B-Helix B’-Helix
hC11B1 RLLQIWREQGYEDLHLEVHQTFQELGPIFRYDLGGAGMVCVMLPEDVEKLQQVDSLHPHR 110 hC11B2 RLLQIWREQGYEHLHLEMHQTFQELGPIFRYNLGGPRMVCVMLPEDVEKLQQVDSLHPCR 110 pC11B1 RVLQLWREQGFENNHLEMHQTFQELGPIFRFDVGGRNMVLVMLPEDVERCQKVEGLHPQR 110 bC11B1 RMLQIWKEQSSENMHLDMHQTFQELGPIFRYDVGGRHMVFVMLPEDVERLQQADSHHPQR 110 rC11B1 KMIQILREQGQENLHLEMHQAFQELGPIFRHSAGGAQIVSVMLPEDAEKLHQVESILPHR 110 hmC11B1 KMIQILREQGQENLHLEMHQVFRELGPIFRHSVGKTQIVFVTLPEDVEKLYQVESTHPCR 112 rC11B2 KMIQILREQGQENLHLEMHQAFQELGPIFRHSAGGAQIVSVMLPEDAEKLHQVESILPRR 120 mC11B2 KMIQILREQGQENLHLEMHQVFRELGPIFRHSVGKTQIVSVMLPEDAEKLHQVESMLPRR 110 . ... . . . . : .: .
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
C-Helix C’-Helix D-Helix
hC11B1 --MSLEPWVAYRQHRGHKCGVFLLNGPEWRFNRLRLNPEVLSPNAVQRFLPMVDAVARDF 168 hC11B2 --MILEPWVAYRQHRGHKCGVFLLNGPEWRFNRLRLNPDVLSPKAVQRFLPMVDAVARDF 168 pC11B1 --DVPGPWLAYRHLRGHKCGVFLLNGPTWRLDRLQLNPGVLSLQAMQKFTPLVDGVARDF 168 bC11B1 --MILEPWLAYRQARGHKCGVFLLNGPQWRLDRLRLNPDVLSLPALQKYTPLVDGVARDF 168 rC11B1 --MPLEPWVAHRELRGLRRGVFLLNGADWRFNRLQLNPNMLSPKAIQSFVPFVDVVARDF 168 hmC11B1 --MPLESWIVHRELRGLGRGVFLLNGPEWYFNRLQLNPNVLSPKAVQKFVPLVDGIARDF 170 rC11B2 --MHLEPWVAHRELRGLRRGVFLLNGAEWRFNRLKLNPNVLSPKAVQNFVPMVDEVARDF 178 mC11B2 --MHLEPWVAHRELRGLRRGVFLLNGPEWRLNRLRLNRNVLSPKAVQKFVPMVDMVARDF 168 . : .:: . .:
E’-Helix E-Helxi SRS-1 F-Helix
hC11B1 SQALKKKVLQNARGSLTLDVQPSIFHYTIEASNLALFGERLGLVGHSPSSASLNFLHALE 228 hC11B2 SQALKKKVLQNARGSLTLDVQPSIFHYTIEASNLALFGERLGLVGHSPSSASLNFLHALE228 pC11B1 SQALRARVMQNARGSLTLDIKPSIFRYTIEASNLVLFGERLGLLAHQPNPESLDFIHALE 228 bC11B1 SQTLKARVLQNARGSLTLDIAPSVFRYTIEASTLVLYGERLGLLTQQPNPDSLNFIHALE 228 rC11B1 VENLKKRMLENVHGSMSINIQSNMFNYTMEASHFVISGERLGLTGHDLKPESVTFTHALH 228 hmC11B1 VDNLKKKMLESVHGSFSMDFQSSVFNYTIEASHFVLFGERLGLIGRDLSPDSLKFLHTLH 230 rC11B2 LEALKKKVRQNARGSLTMDVQQSLFNYTIEASNFALFGERLGLLGHDLNPGSLKFIHALH 238 mC11B2 LETLKEKVLQNARGSLTMDVQQSLFNYTIEASNFALFGERLGLLGHDLSPGSLKFIHALH 228 : :: . : : .. : : *: . .. : G-Helix SRS-2 hC11B1 VMFKSTVQLMFMPRSLSRWTSPKVWKEHFEAWDCIFQYGDNCIQKIYQELAFSRPQQYTS 288 hC11B2 VMFKSTVQLMFMPRSLSRWISPKVWKEHFEAWDCIFQYGDNCIQKIYQELAFNRPQHYTG 288 pC11B1 VMFKSTVQLMFMPRSLSRWTSTGTWKEHFEAWDCIFQYANKAIQRLYQELTLGHPWHYSG 288 bC11B1 AMLKSTVQLMFVPRRLSRWMSTNMWREHFEAWDYIFQYANRAIQRIYQELALGHPWHYSG 288 rC11B1 SMFKSTTQLMFLPKSLTRWTSTRVWKEHFDSWDIISEYVTKCIKNVYRELAEGRQQSWS- 287 hmC11B1 SMFKTTTQLLYLPRSLTRWTSTRVWKENLESWDFISEYVTKCIKNVYRELAEGRPQSWS- 289 rC11B2 SMFKSTTQLLFLPRSLTRWTSTQVWKEHFDAWDVISEYANRCIWKVHQELRLGSSQTYSG 298 mC11B2 SMFKSTSQLLFLPKSLTRWTSTRVWKEHFDAWDVISEYANRCIWKVHQELRLGSSQTYSG 288
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
SRS-3
H-Helix I-Helix J-Helix
hC11B1 IVAELLLNAELSPDAIKANSMELTAGSVDTTVFPLLMTLFELARNPNVQQALRQESLAAA 348 hC11B2 IVAELLLKAELSLEAIKANSMELTAGSVDTTAFPLLMTLFELARNPDVQQILRQESLAAA 348 pC11B1 VVAELLTHANMTVDAIKANSIDLTAGSVDTTAYPLLMTLFELARNPEVQQALRQESLAAA 348 bC11B1 IVAELLMRADMTLDTIKANTIDLTAGSVDTTAFPLLMTLFELARNPEVQQAVRQESLVAE 348 rC11B1 VISEMVAQSTLSMDAIHANSMELIAGSVDTTAISLVMTLFELARNPDVQQALRQESLAAE 347 hmC11B1 VTAELVAERTLSMDAIQANSMELIAGSTDTTSTPLVMTFFELARNPDVQQALRQESLAAE 349 rC11B2 IVAALITQGALPLDAIKANSMELTAGSVDTTAIPLVMTLFELARNPDVQQALRQETLAAE 358 mC11B2 IVAELISQGSLPLDAIKANSMELTAGSVDTTAIPLVMTLFELARNPDVQKALRQESLAAE 348 : : : .: : ... **.:: *::.*. ....: : K-helix SRS-4
hC11B1 ASISEHPQKATTELPLLRAALKETLRLYPVGLFLERVVSSDLVLQNYHIPAGTLVRVFLY 408 hC11B2 ASISEHPQKATTELPLLRAALKETLRLYPVGLFLERVVSSDLVLQNYHIPAGTLVQVFLY 408 pC11B1 ARISENPQKAITELPLLRAALKETLRLYPVGIFLDRCVTSDLVLQNYHIPAGTLVKVLLY 408 bC11B1 ARISENPQRAITELPLLRAALKETLRLYPVGITLEREVSSDLVLQNYHIPAGTLVKVLLY 408 rC11B1 ASIVANPQKAMSDLPLLRAALKETLRLYPVGSFVERIVHSDLVLQNYHVPAGTFVIIYLY 407