VI. Phụ lục (liệt kê minh chứng các sản phẩm nêu ở Phần III)
2.8. Phƣơng pháp khảo sát khả năng phục hồi tổn thƣơng gan bằng nƣớc ép tỏi đen trên mơ hình chuột
trên mơ hình chuột
Chuột, giới tính đực, 10 tuần tuổi, có trọng lƣợng từ 30-32g đƣợc cung cấp bởi Viện Pasteur TP. HCM. Sau đó, chuột đƣợc ni từ 3-5 con trong chuồng có lót trấu trong điều kiện của phịng thí nghiệm đƣợc cho đồ ăn và nƣớc uống bình thƣờng trong 2 tuần để thích nghi. Chuột đƣợc chia ngẫu nhiên thành các lô sau, với 5 con/lô:
- Lơ 1 (Nƣớc): Lơ chuột bình thƣờng. Cho chuột uống nƣớc trong vịng 18 tuần.
- Lơ 2 (TĐ): Lô chuột uống tỏi đen. Cho chuột uống nƣớc trong 10 tuần đầu, sau đó cho chuột uống tỏi đen với liều lƣợng 200 mg/kg mỗi ngày trong vòng 8 tuần - Lô 3 (TAA): Lô chuột uống TAA. Cho chuột uống TAA với liều lƣợng 300 mg/l
mỗi ngày trong 10 tuần. Sau đó, chuột tiếp tục đƣợc cho uống nƣớc trong 8 tuần tiếp theo.
- Lô 4 (TAA+TĐ): Lô chuột uống TAA và dịch chiết tỏi đen. Cho chuột uống TAA với liều lƣợng là 300 mg/l mỗi ngày trong 10 tuần. Sau đó, cho chuột uống dịch chiết tỏi đen với liều lƣợng 200 mg/kg mỗi ngày trong 8 tuần.
- Lô 5 (TAA+Sily): Lô chuột uống TAA với Silymarin. Cho chuột uống TAA với liều lƣợng 300 mg/l mỗi ngày trong 10 tuần. Sau đó, cho chuột uống silymarin với liều lƣợng 50 mg/kg mỗi ngày trong 8 tuần.
Sau khi kết thúc thời gian gây bệnh và điều trị, chuột đƣợc cho nhịn đói qua đêm để hạn chế sự tác động của thức ăn lên các chỉ tiêu sinh hóa máu. Chuột đƣợc gây mê bằng diethyl ether trong hộp kín với thời gian 2 phút, sau đó chúng tôi tiến hành lấy máu từ tim chuột vào ống thu máu có chứa chất chống đơng (heparin). Các chỉ tiêu sinh hóa của mẫu máu: alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST), triglyceride (TG) và cholesterol tổng số (TC), đƣợc phân tích bằng máy xét nghiệm sinh hóa bán tự động tại Khoa sinh hóa, Bệnh viện qn y 175. Sau đó, chúng tơi tiến hành giải phẫu thu nhận gan chuột và giữ trong dung dịch formaline 4%. Mẫu gan đƣợc phân tích mơ học bằng phƣơng pháp nhuộm Hemotoxyline và Eosin tại bộ môn Giải phẩu bệnh, Trung tâm chẩn đoán và điều trị ung bƣớu, Bệnh viện quân y 175.
13