2.2.4.2. Phương pháp đánh giá khả năng ức chế gốc tự do DPPH trong cao trích vỏ chuối chuối
Nguyên tắc: Dung dịch DPPH có màu đỏ tía hấp thụ cực đại tại bước sóng 517 nm.
Các chất chống oxy hóa sẽ trung hịa gốc tự do DPPH bằng cách cho hydrogen, làm giảm độ hấp thụ tại bước sóng cực đại và màu của dung dịch phản ứng nhạt dần. Dung dịch này sẽ chuyển từ màu đỏ tía sang màu vàng nhạt. Giá trị mật độ quang càng thấp chứng tỏ khả năng bắt gốc tự do DPPH càng cao (TCVN 11939, 2017).
Phương pháp đánh giá khả năng ức chế gốc tự do DPPH của cao trích được xác định theo phương pháp của Yin Yin Tun và cộng sự (2019) với một số thay đổi để phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm. Cân 0,0100g cao trích vỏ chuối cho vào ống nghiệm thủy tinh có nắp. Thêm 9,99 mL nước cất vào ống và trộn đều bằng máy trộn vortex trong 30 giây. Sau đó chuyển ống nghiệm chứa mẫu qua máy đánh siêu âm trong vịng 3 phút. Pha lỗng hỗn hợp dung dịch cao trích theo các nồng độ khác nhau (10, 25, 50, 100 µg/mL). Lấy 1,5 mL mẫu dung dịch cao trích đã được pha lỗng trộn với 1,5 ml DPPH 0,15 mM (DPPH được pha trong ethanol 96%). Lắc mạnh hỗn hợp và đặt trong bóng tối 30 phút ở nhiệt độ phịng. Sau đó dung dịch được đo độ hấp thụ ở bước sóng 517 nm. Mẫu đối chứng ở mỗi nồng độ được chuẩn bị theo cách tương tự nhưng thay dung dịch cao trích bằng ethanol 96%. Acid gallic được sử dụng làm chất chuẩn (Yin Yin Tun và cộng sự, 2019).
Cao trích vỏ chuối Phối trộn Đặt trong bóng tối DPPH Kết quả Pha lỗng Đo độ hấp thụ ở 517 nm