3.3.1.2. Từ lá cây
Lá cây Na rừng sau khi thu thập được rửa sạch, phơi khô và nghiền nhỏ thu được 3,5 kg bột khô. Lượng bột khô này được chiết với 95% methanol (4L × 4 lần) ở nhiệt đợ phịng trong 48 giờ. Dịch chiết MeOH sau đó được làm khơ dưới áp suất giảm thu được 125 g cặn chiết. Cặn chiết này được hòa vào nước (2 L) và được chiết phân bớ lần lượng với n-hexane (1 L × 3 lần, 78 g), CH2Cl2 (1 L × 4 lần, 11 g) và lớp H2O.
Phân đoạn CH2Cl2 (11 g) được tách trên sắc ký cột silica gel rửa giải với hệ dung môi MeOH/CH2Cl2 (từ 0-100%) để thu được 8 phân đoạn nhỏ (KCB1 ‒ KCB7).
Phân đoạn KCB5 (0,2 g) được tinh chế trên cột Sephadex LH-20 rửa giải bằng hệ dung môi MeOH/H2O (1/1) thu được KC5 (4,5 mg).
Phân đoạn KCB6 (1,2 g) được tiến hành sắc ký cột pha thường, rửa giải bằng hệ
n-hexane/CH2Cl2/MeOH/H2O (1/3/1), tinh chế thêm trên sắc ký cột pha đảo RP18
với hệ acetone/H2O (1/1,8) thu được KC6 (4,3 mg).
Lớp H2O được phân tách trên cột Diaion HP-20 bằng hệ dung môi MeOH trong nước (từ 0% đến 100%) thu được bảy phân đoạn (KCC1 ‒ KCC7).
Hợp chất KC7 (2,7 mg) và KC8 (6,3 mg) thu được từ sắc ký cột pha đảo RP18 phân đoạn KCC2 (0,35 g) hệ dung môi acetone/H2O (1/2,5).
Phân đoạn KCC3 (0,16 g) được tiến hành sắc ký cột pha thường, rửa giải bằng hệ dung môi EtOAc/MeOH/H2O (5/1/0,02) để thu được hợp chất KC11 (5,2 mg).
Phân đoạn KCC4 (0,86 g) được phân tách trên cột silica gel pha thường hệ dung môi CH2Cl2/MeOH (7/1), tinh chế thêm trên Sephadex LH-20 rửa giải bằng hệ dung môi MeOH/H2O (1/1) để thu được hợp chất KC10 (5,9 mg).
Hợp chất KC9 (4,5 mg) thu được từ phân đoạn KCC5 (0,72 g) trên sắc ký cột pha đảo RP18 rửa giải bằng hệ dung môi acetone/H2O (1/1,6).
Phân đoạn KCC6 (1,08 g) được tiến hành sắc ký cột pha đảo RP18 với hệ dung môi acetone/H2O (1/1,2) để thu được hợp chất KC12 (6,3 mg).
Như vậy, từ lá cây Na rừng đã phân lập được 8 hợp chất, từ KC5-KC12.