- Thành phần phản ứng PCR
Thểmất muối Thểnam húa đơn thuần
3.2.3. Minh họa kiểu gen đột biến của thành viờn gia đỡnh bệnh nhõn
Trong nghiờn cứu của chỳng tụi cú 9 dạng đột biến trờn gen CYP21A2
hay gặp; đột biến điểm chiếm tỷ lệ: 69,6%, đột biến xúa đoạn cú tỷ lệ: 30,4%.
Minh họa phả hệvà kiểu gen đột biến điểm bằng kỹ thuật giải trỡnh tựgen của gia đỡnh bệnh nhõn TSTTBS thể thiếu enzym 21-OH
Hỡnh ảnh đột biến I2g/I2g (c.656A/C>G) của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.1. Phả hệgia đỡnh số 01
Nhận xột:
Phả hệ của gia đỡnh số 01 cú 3 thế hệ, thế hệ thứ 1 và thứ 2 khụng cú người bị bệnh. Ở thế hệ thứ 3, 1 con trai (III.5), 4 tuổi bị bệnh TSTTBS thể mất muối. Cú mang gen đột biến CYP21A2 kiểu I2g. Cỏc anh, chị (III.1, III.2, III.3, III.4) của bệnh nhõn khụng cú biểu hiện bệnh. Bố (II.6) 27 tuổi và mẹ (II.5) 26 tuổi theo quy luật di truyền là người lành mang gen bệnh.
Kiểu gen của gia đỡnh số 01 0
Hỡnh 3.2. Kết quả giải trỡnh tự gen (chiều ngược) gia đỡnh 01
Nhận xột:
Hỡnh ảnh giải trỡnh tự ở vị trớ intron 2, cho thấy xuất hiện 2 đỉnh chồng lờn nhau tại điểm đột biến c.656A/C>G cú hỡnh ảnh bố, mẹ người mang gen đột biến dị hợp tử c.656A/C>G (I2g). Bệnh nhõn mang đột biến đồng hợp tử I2g do nhận 1 alen đột biến từ bố và 1 alen đột biến từ mẹ.
Hỡnh ảnh đột biến p.R356W/R356W của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.3: Phả hệgia đỡnh số 27
Nhận xột:
Gia đỡnh cú con trai 2 tuổi bị bệnh TSTTBS thể mất muối, kiểu gen đột biến là p.R356 W. Trong gia đỡnh khụng ai mắc bệnh giống bệnh nhõn.
Kiểu gen của gia đỡnh số 27
Hỡnh 3.4. Kết quả giải trỡnh tự gen (theo chiều ngược) gia đỡnh số 27
Nhận xột:
Hỡnh ảnh giải trỡnh tự gen ở exon 8, bố II.1 và mẹ II.2 cú hỡnh ảnh 2 đỉnh chồng lờn nhau tại điểm đột biến ở vị trớ 2110 nucleotide C bị chuyển thành T trờn 1 alen, chứng tỏlà người mang gen dị hợp tử p.R356W.
Hỡnh ảnh đột biến p.I172N/I172N của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.5: Phả hệgia đỡnh số 08
Nhận xột:
Phả hệ cú 3 thế hệ, thế hệ thứ 1 và thứ 2 khụng cú ai bị bệnh. Ở thế hệ thứ 3 cú 1 gia đỡnh cú con trai 3 tuổi bị bệnh TSTTBS (III.4 ) thể nam húa đơn thuần và kiểu gen đột biến là I172N. Chị gỏi (III.3) cú kiểu hỡnh bỡnh thường cú khả năng là người bỡnh thường hoặc mang gen bệnh giống bố mẹ.
Kiểu gen của gia đỡnh số 08
Hỡnh 3.6. Kết quả giải trỡnh tự gen của gia đỡnh số 08
Nhận xột:
Hỡnh ảnh phõn tớch gen trờn exon 4 thấy, bệnh nhõn ở vị trớ 999 nucleotid T bị đột biến thành A. Bố, mẹ và chị gỏi đều cú hỡnh ảnh xuất hiện 2 đỉnh chồng lờn nhau tại điểm đột biến c.999T>A, chứng tỏ là người mang gen đột biến dị hợp tử p.I172N.
Hỡnh ảnh đột biến p.R426C/R426C của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.7. Phả hệ gia đỡnh số 17
Nhận xột:
Gia đỡnh cú con gỏi 3 thỏng bị bệnh TSTTBS thể mất muối nặng với kiểu gen đột biến p.R426C. Phõn tớch phả hệ, gia đỡnh khụng cú ai bị bệnh giống bệnh nhõn, bố 23 tuổi, mẹ 21 tuổi là người bỡnh thường về lõm sàng.
Hỡnh 3.8. Kết quả giải trỡnh tự gen của gia đỡnh số 17
Nhận xột:
Kết quả sau khi giải trỡnh tự gen cho thấy hỡnh ảnh ở vị trớ 1276 nucleotid C bị đột biến thành T, bố mẹ cú kiểu gen đột biến dị hợp tử p.R456C. Đõy là dạng đột biến ớt gặp.
Minh họa kiểu gen đột biến xúa đoạn bằng kỹ thuật MLPA của gia đỡnh
bệnh nhõn TSTTBS thể thiếu enzym 21-OH
Hỡnh ảnh đột biến xúa đoạn tại exon 1 và 3 của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.9. Phả hệgia đỡnh số 34
Nhận xột:
Gia đỡnh cú con gỏi (III.1) 8 tuổi bị bệnh TSTTBS thể mất muối nặng, mang đột biến xúa đoạn tại exon 1 và exon 3 trờn gen CYP21A2. Bố (II.2) 27 tuổi, mẹ (II.4) 25 tuổi. Hai em họ (III.2, III.3) khụng cú biểu hiện bệnh và 1 em III.4 chưa sinh (thai 17 tuần). Trong phả hệ cả 3 thế hệ khụng ai bị bệnh như bệnh nhõn.
Kiểu gen của gia đỡnh số 34
Hỡnh 3.10. Kết quảđột biến gen của gia đỡnh mó số 34
Nhận xột:
Hỡnh ảnh phõn tớch gen bằng kỹ thuật MLPA trờn gen CYP21A2 cho thấy. Chiều cao đỉnh của cỏc gen ở người bỡnh thường, mẫu bố, mẹlà tương đương nhau, trong khi đú chiều cao cỏc đỉnh của exon 1, exon 3 của bố, mẹ bệnh nhõn chỉ bằng 1/2 so với người bỡnh thường, chứng tỏ bố, mẹ bệnh nhõn là người mang gen bệnh.
Hỡnh ảnh đột biến xúa đoạn lớn của gia đỡnh bệnh nhõn
Hỡnh 3.11. Phả hệgia đỡnh số 43
Nhận xột: Ở thế hệ thứ3 cú 1 con trai 18 thỏng, mang đột biến xúa đoạn lớn với kiểu hỡnh mất muối. Bố 30 tuổi và mẹ 28 tuổi. Anh trai 5 tuổi khụng cú biểu hiện bệnh. Trong phả hệ khụng ai bị bệnh giống bệnh nhõn.
Hỡnh 3.12. Kết quảđột biến gen của gia đỡnh mó số 43
Nhận xột:
Kết quả phõn tớch gen bằng kỹ thuật MLPA cho thấy bố, mẹ bệnh nhõn là người mang gen dị hợp tử gõy bệnh. Phõn tớch kết quả của người anh trai cho thấy chiều cao đỉnh của exon 1, exon 3, exon 4, exon 6, exon 8 và C4B tương tự mẫu người bỡnh thường chứng tỏ anh trai bệnh nhõn khụng phải là người mang gen bệnh.
Minh họa kiểu gen đột biến dị hợp tử kộp
Phả hệgia đỡnh cú đột biến điểm biến điểm S125X /xúa đoạn
Hỡnh 3.13. Phả hệgia đỡnh mó số 25
Nhận xột:
Gia đỡnh cú 2 con, con gỏi III3 bị bị bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh, thể mất muối với kiểu gen p.S125X và xúa đoạn. Anh trai cũng bị bệnh và kiểu gen dị hợp tử kộp giống em gỏi: xoỏ đoạn và p.S125X. Bố mẹ là người lành mang gen bệnh. Trong gia đỡnh khụng cú ai bị bệnh giống bệnh nhõn.
Hỡnh 3.14. Kiểu gen đột biến của gia đỡnh số 25
Nhận xột:
Sau khi phõn tớch gen mẹ (II.7) bệnh nhõn mang gen xúa đoạn, bố (II.4) cho hỡnh ảnh trờn exon 1, xuất hiện 2 đỉnh chồng lờn nhau tại điểm đột biến c.752 C>G, chỳng tỏ bố là người dị hợp tử. Bố mẹ đều mang gen dị hợp tử khỏc nhau, di truyền cỏc alen lặn gõy bệnh, kiểu gen của hai anh em cựng
giống nhau, đều mang đột biến dị hợp tử kộp trong một gia đỡnh. Phả hệ gia đỡnh cú đột biến điểm biến điểm p.I172N và Q318X
Hỡnh 3.15. Phả hệ gia đỡnh mó số 24
Nhận xột:
Gia đỡnh cú con gỏi 5 tuổi bị bệnh TSTTBS thể mất muối với kiểu gen đột biến p.I172N&Q318X. Trong gia đỡnh khụng ai bị bệnh như bệnh nhõn. Bố 25 tuổi, mẹ 25 tuổi là người mang lành mang gen dị hợp tử.
Kiểu gen của gia đỡnh số 24
Hỡnh 3.16. Kiểu gen của gia đỡnh số 24
Nhận xột:
Kết quả phõn tớch gen: bố mang đột biến dị hợp tử dạng p.I172N, mẹ mang gen đột biến dạng p.Q318X. Con gỏi nhận 1 alen từ bố và 1 alen từ mẹ
Hỡnh 3.17. Ảnh gia đỡnh bệnh nhõn mó số 24
Bố mẹlà người lành mang gen bệnh. Bốmang đột biến dị hợp tử Q318X mẹ mang đột biến dị hợp tử I172N
Phả hệ gia đỡnh mang đột biến dị hợp tử kộp p.I2g / Q318 và .R356W
Hỡnh 3.18. Phả hệ gia đỡnh mó số 49
Nhận xột:
Phõn tớch phả hệ cú 3 thế hệ, thế hệ 1 và 2, khụng ai mắc bệnh giống bệnh nhõn. Ở thế hệ thứ3 gia đỡnh cú hai con gỏi đầu bị mất trong thời kỳ sơ sinh, 1 con trai 2 tuổi bị bệnh TSSTTBS thể mất muối với kiểu gen I2g và 2 đột biến trờn cựng 1 alen p.Q138X & R356W. Bố mẹ và chị gỏi (III.3) cú kiểu hỡnh bỡnh thường
Hỡnh 3.19. Kiểu gen của gia đỡnh mó số 49
Nhận xột:
Hỡnh ảnh phõn tớch gen cho gia đỡnh: đột biến I2g, p.Q318X7& R356W. Trờn exon 8 của bố, xuất hiện 2 đỉnh chồng lờn nhau tại điểm đột biến c.1996 C>T và c. 2110 C>T chứng tỏ bố mang đột biến dị hợp tử kộp p.Q318X&R356W, tại intron 2 của mẹ mang gen dị hợp tử I2g. Bệnh nhõn nhận 1 alen p.Q318X và p.R356W từ bố và 1 alen I2g từ mẹ.