- Thành phần phản ứng PCR
2 p.R356W/R356W p.R356W p.R356W
4.2.2. Cỏc dạng đột biến trờn gen CYP21A2 ở bố, mẹ, anh,chị, em ruột b ệnh nhõn TSTTBS thể thiếu 21-OH
Đột biến tỡm thấy trờn gen CYP21A2 ở bệnh nhõn TSTTBS là đột biến chỉ điểm để phỏt hiện đột biến cho cỏc thành viờn gia đỡnh nhanh chúng và ớt tốn kộm. Nhờ hai kỹ thuật giải trỡnh tự gen và kỹ thuật MLPA để tỡm vị trớ đột biến điểm và cỏc đột biến xúa đoạn, lặp đoạn từ đú phỏt hiện ra người mang gen dị hợp tử. Đõy là hai kỹ thuật hiện đại và chớnh xỏc hiện nay. Sau khi phõn tớch 130 thành viờn gia đỡnh cú 9 dạng đột biến, gồm cú; I2g: 47/130 (36,5%), xúa đoạn 33/130 (25,4%), p.R356W (18,5%) và cỏc đột biến khỏc ớt gặp như: p.Q318X, p.I172N, p.R426C, p.S125X, p.W19X kết quả nghiờn cứu của chỳng tụi tương tự với cỏc nghiờn cứu khỏc trờn thế giới.
Theo nghiờn cứu của Krone. N tại Đức (2003) phõn tớch gen CYP21A2
cho 198 thành viờn của gia đỡnh cú con bị bệnh TSTTBS thể thiếu 21-OH, tỷ lệ mang đột biến I2g là 30,3%, đột biến xúa đoạn: 27,4%, đột biến p.R356W:
4,5%, đột biến p.I172N: 19,3%. Tỏc giả nhận thấy thể bệnh nam húa đơn thuần hay gặp ở hai dạng đột biến I2g và p.I172N, đột biến p.R356W và xúa đoạn gõy bệnh thể mất muối nặng [13].
Nghiờn cứu tại Nhật Bản (2002) cho 52 bệnh nhõn và cỏc thành viờn của 49 gia đỡnh nhận thấy tỷ lệ mang đột biến I2g: 39,8%, xúa đoạn: 5,1%, I172N: 14,3% và Q318X: 15,3%. Đột biến I2g và Q318X là hai dạng đột biến hay gặp trờn bệnh nhõn của Nhật, đột biến xúa đoạn ớt gặp hơn so với nghiờn cứu của chỳng tụi cũng như trờn thế giới. Nghiờn cứu cỏc thành viờn của gia đỡnh cú mang đột biến I2g dạng dị hợp tử, hoặc mang 2 đột biến dạng dị hợp tử , biểu hiện lõm sàng khụng cú triệu chứng [82].
Nghiờn cứu tại Mỹ [83] (2011) cho 213 bệnh nhõn và 232 bố mẹ của 182 gia đỡnh. Phõn tớch kiểu gen của 182 gia đỡnh với tổng số alen là 364, đứng đầu là đột biến xúa đoạn với tỷ lệ: 30,5%, thứ hai là đột biến điểm I2g dạng đồng hợp tử I2g: 23,4 và dạng dị hợp tử kộp I2g và một đột biến khỏc là 1,6%. Thứ ba là cỏc dạng đột biến khỏc: p.I172N:12,6%, p.V281L:12,6%, p.Q318X: 3,6% và p.R356W: 3,6%, trong đú đột biến p.R356W dạng dị hợp tử kộp với cỏc đột biến khỏc gặp nhiều hơn. Trong nghiờn cứu của chỳng tụi, khụng cú bệnh nhõn mang dạng đột biến V281L, cú lẽ do số lượng bệnh nhõn của chỳng tụi cũn nhỏ, cần phải cú nghiờn cứu trờn sốlượng lớn hơn.
Theo một bỏo cỏo mới gần đõy của New. I. M (3/2013) phõn tớch sự liờn quan kiểu gen và kiểu hỡnh của 1507 gia đỡnh bị bệnh TSTTBS thể thiếu 21- OH nhận thấy dạng đột biến đồng hợp tử I2g: 78,6% ở thể mất muối và 20% ở thểnam húa đơn thuần. Dạng đột biến xúa đoạn dạng đồng hợp tử là 19,1% ở thể mất muối và dạng đột biến p.V218L hay gặp. Kiểu đột biến dạng dị hợp tử kộp của cỏc dạng đột biến trờn cũng chiếm tỷ lệ cao trong nghiờn cứu. Đõy cũng là cỏc dạng đột biến hay gặp trờn thế giới như cỏc nước chõu Âu [33].
Theo nghiờn cứu của Lee và CS cú ước tớnh tỷ suất mang gen bệnh TSTTBS dị hợp tử là 11,2-12,6%/1.000 hay tỷ lệ1/83 đối với quần thểngười Trung Quốc [58]. Trong khi cỏc bỏo cỏo khỏc trờn thế giới thỡ tỷ lệ chung người mang gen dị hợp tử là 1/60 [1],[89]. Ở Việt Nam chưa cú nghiờn cứu đưa ra tỷ lệngười lành mang gen bệnh.