Vquét thế (mV/s) 5 10 12,5 25 50 - Ip (nA) 72,5 75,6 78,1 92,5 95,8 -1.10 -1.20 -1.30 -1.40 -150n -100n -50.0n 0 I (A) Hình 3.9: Đường DP của ofloxacin phụ thuộc vào tốc độ
quét thế 0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 tốc độ quét (m V/s) Ip (nA) Hình 3.10: Ảnh hưởng của tốc độ quét thế
đến cường độ dịng pic
(ĐKTN: sục khí 120s; biên độ xung: 50mV; thời gian 1 xung: 0,04s tốc độ quét thế: 5 ÷ 50 mV/s)
Chiều cao pic không bị ảnh hưởng nhiều bởi tốc độ quét, với tốc độ
quét thế từ 5mV/s đến 12,5mV/s, Ip không thay đổi nhiều, chân pic gần như trùng khít, khi tăng tốc độ quét thế (từ 25mV/s trở lên) Ip tăng nhưng có hiện tượng chân pic lệch đường nền cao làm giảm độ phân giải. Như vậy có thể chọn tốc độ quét thế từ 5mV/s đến 12,5mV/s để đo nhưng nếu tốc độ quét thế chậm sẽ làm tăng thời gian phân tích và cường độ dòng nhỏ làm giảm độ nhạy. Chúng tôi lựa chọn tốc độ quét thế là 12,5mV/s.
Ảnh hưởng của oxi hòa tan
Nồng độ oxi hoà tan trong nước khá lớn, khoảng 1,38.10–3M ở 20oC. Quá trình khử oxi xảy ra theo hai bước, bước thứ nhất tạo ra hiđro peoxit, bước tiếp theo khử hiđro peoxit thành nước, theo hai bán phản ứng sau:
O2 + 2H+ + 2 e → H2O2 H2O2 + 2H+ + 2e → 2 H2O
Thế bán sóng của hai q trình này tương ứng là –0,1V và –0,9V (so với điện cực calomen bão hồ) [50]. Trong phân tích các hợp chất hữu cơ oxi hịa tan trong nước có thể ảnh hưởng đến quá trình phân tích do ảnh hưởng đến chất lượng đường khuếch tán thậm chí có thể phản ứng với chất phân tích làm giảm nồng độ của chất phân tích. Vì vậy trước khi đo cần thiết phải đuổi oxi khỏi nền. Trong phương pháp von-ampe loại bỏ oxi hòa tan trong nước bằng cách sục khí nitơ vào dung dịch đến khi khơng cịn sự ảnh hưởng đến dịng pic. Tuy nhiên thời gian sục khí dài quá sẽ gây mất thời gian phân tích.
-1.10 -1.20 -1.30 -1.40 -1.50 U (V) -100n -80.0n -60.0n -40.0n -20.0n 0 I (A )
Hình 3.11: Đường DP của ofloxacin phụ thuộc vào thời gian sục khí nitơ
(ĐKTN: sục khí 0 ÷ 300s; biên độ xung: 50mV; thời gian 1 xung: 0,04s tốc độ quét thế: 12,5mV/s)
Tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian sục khí nitơ đến đường dòng von –ampe xung vi phân của dung dịch ofloxacin 3 µg/ml với thời gian sục khí nitơ từ 0 đến 300s. Kết quả được trình bày trên hình 3.11.
Với thời gian sục khí dưới 120s đường nền cao, chân pic lệch, pic không ổn định. Với thời gian sục khí từ 120s trở lên, pic đều, cân, chiều cao
đỉnh pic ổn định. Chúng tơi chọn thời gian sục khí là 120s.
3.1.2. Khảo sát khoảng tuyến tính và đánh giá phương pháp Khảo sát khoảng tuyến tính Khảo sát khoảng tuyến tính
Sau khi nghiên cứu các điều kiện thích hợp xác định ofloxacin chúng tôi tiến hành khảo sát khoảng tuyến tính và xây dựng đường chuẩn định lượng ofloxacin trong mẫu thuốc và mẫu nước tiểu theo phương pháp von ampe với các điều kiện đo trong bảng 3.5; nồng độ ofloxacin trong khoảng 2,0 µg/ml đến 11,0 µg/ml.