II. Tổng quan về vi tảo lục H.pluvialis
5. Nuụi trồng H.pluvialis những cơ hội và thỏch thức
3.3. Sự thay đổi hỡnh thỏi, kớch thước cũng như cỏc thành phần nội bào trong vũng
3.3.3. Nghiờn cứu vũng đời tự nhiờn của tế bào vi tảo H.pluvialis được nuụi ở thể
bỡnh nhựa 10 lớt
Nghiờn cứu vũng đời của tế bào vi tảo lục H. pluvialis được nuụi trồng ở thể tớch bỡnh nhựa 10 lớt được chỳng tụi thực hiện như sau: Cỏc bước thớ nghiệm được lặp lại tương tự như ở thớ nghiệm với bỡnh nuụi1,5 lớt, tuy nhiờn chỉ khỏc ở thể tớch bỡnh là 10 lớt. Đối với loài tảo này, sinh trưởng phụ thuộc rất nhiều vào thể tớch bỡnh thớ nghiệm và tỷ lệ khoảng khụng cũn lại trong bỡnh nuụi so với thể tớch dịch nuụi và điều này sẽ dẫn tới tại cỏc điểm khỏc nhau trong bỡnh nuụi, cỏc tế bào tảo sẽ nhận được ỏnh sỏng cú cường độ cũng rất khỏc nhau. Trong khi đú, chỳng ta đều biết ỏnh sỏng lại là một trong những yếu tố mụi trường
quan trọng, ảnh hưởng lớn tới sinh trưởng và phỏt triển của tảo H. pluvialis. Do đú, việc nghiờn cứu ảnh hưởng của cỏc thể tớch bỡnh nuụi khỏc nhau lờn sinh trưởng của tảo H. pluvialis cũng là cần thiết.
Sự thay đổi về mật độ tế bào, hàm lượng sắc tố và protein của tảo H. pluvialis được nuụi trồng trong cỏc bỡnh nhựa 10 lớt được chỉ ra trờn hỡnh 31 và 32.
Hỡnh 31. Sự thay đổi mật độ tế bào của tảo H. pluvialisnuụi ở bỡnh nhựa 10 lớt trong mụi trường RM
Viện CNSH & Thực phẩm 61 Luận văn thạc sỹ khoa học
Kết quả nghiờn cứu được chỉ ra trờn hỡnh 31 đó cho thấy MĐTB tăng dần theo thời gian và sau 34 ngày đạt giỏ trị cực đại là 27x10P
4
PTB/mL. Sau 34 ngày nuụi cấy tiến hành cho cỏc tế bào chớn nảy mầm trở lại bằng cỏch ly tõm thu cặn tế bào và bổ sung chỳng vào bỡnh 10 lớt với mụi trường mới hoàn toàn. Sự thay đổi về hàm lượng sắc tố và protein của tảo H. pluvialis được chỉ ra trờn hỡnh 32. Nhỡn chung sự thay đổi về hàm lượng sắc tố và protein cũng theo quy luật như ở bỡnh nuụi cú thể tớch là 1 và 1,5 lớt, tuy nhiờn hàm lượng của chỳng đạt giỏ trị lại thấp hơn. Hàm lượng chlorophyll a đạt cực đại sau 20 ngày nuụi cấy với giỏ trị là 650 àg/L và giảm dần vào cỏc ngày tiếp theo. Hàm lượng astaxanthin lại tăng dần và đạt cực đại sau 34 ngày nuụi cấy với giỏ trị là 670 àg/L. Protein giảm dần từ 550 pg/TB xuống cũn 200 pg/TB sau 34 ngày nuụi cấy.
Ở giai đoạn nảy mầm, tức là sau ngày thứ 34, sự thay đổi về hàm lượng sắc tố và protein này lại theo chiều hướng ngược lại. Hàm lượng của chlorophyll a và protein tăng dần, cũn hàm lượng astaxanthin lại giảm dần. Khi đú, màu sắc tế bào tảo chuyển từ trạng thỏi màu đỏ rực sang màu xanh, cũn hỡnh thỏi tế bào từ hỡnh trũn chuyển thành hỡnh elip và cú 2 roi chuyển động. Toàn bộ giai đoạn nảy mầm kộo dài trong khoảng 10 ngày. Thời điểm chuyển giai đoạn cũng như việc nhận ra được cỏc đặc điểm chớnh của từng giai đoạn khỏc nhau trong vũng đời của tế bào tảo cũng cú thể được chỉ ra dựa trờn sự thay đổi của thụng số là tỷ lệ astaxanthin/chlorophyll a. Khi tế bào chủ yếu ở giai đoạn chớn, tỷ số nờu trờn đạt giỏ trị vào khoảng 1,6. Khi chuyển tế bào tảo chớn sang mụi trường mới thỡ tế bào sẽ đi vào
Hỡnh 32. Sự thay đổi hàm lượng sắc tố (chlorophyll a, astaxanthin) và protein của
Viện CNSH & Thực phẩm 62 Luận văn thạc sỹ khoa học
giai đoạn nảy mầm đồng thời tỷ số astaxanthin/chlorophyll a sẽ giảm dần và đạt đến giỏ trị dưới 0,5, tức là tế bào tảo đó đi vào giai đoạn sinh dưỡng.
Một số hỡnh ảnh tế bào trong vũng đời của tảo H. pluvialis được nuụi ở bỡnh nhựa 10 lớt trong mụi trường RM được chỉ ra trờn hỡnh 33.
Một số hỡnh ảnh minh họa cho việc nuụi trồng thành cụng vi tảo lục H. pluvialis ở cỏc cấp độ bỡnh tam giỏc 1 lớt, bỡnh nhựa 1,5 và 10 lớt được chỉ ra trờn hỡnh 34.
Viện CNSH & Thực phẩm 63 Luận văn thạc sỹ khoa học
Hỡnh 33. Một số hỡnh ảnh tế bào trong vũng đời của tảo H. pluvialis nuụi ở bỡnh nhựa 10 lớt trong mụi trườ
0N 10N 14N 24N 16h 18h 2N 7N 13N
Viện CNSH & Thực phẩm 64 Luận văn thạc sỹ khoa học
Hỡnh 34. Hỡnh ảnh minh họa việc nuụi trồng thành cụng vi tảo lục H. pluvialis ở cỏc cấp độ bỡnh tam giỏc 1 lớt, bỡnh nhựa 1,5 lớt và 10 lớt
Qua cỏc kết quả nghiờn cứu được trỡnh bày ở phần nờu trờn đó cho phộp chỳng tụi rỳt ra một số nhận xột như sau:
- Ở cỏc cấp độ từ bỡnh tam giỏc 1 lớt đến cỏc bỡnh nhựa 1,5 và 10 lớt ở điều kiện nuụi cấy khỏc nhau thỡ sinh trưởng của vi tảo lục H. pluvialis cũng khỏc nhau.
- Ở cấp độ bỡnh 1 lớt, khụng cú sục khớ (nuụi tĩnh với việc lắc bằng tay 2 3 lần/ 1 ngày), -
MĐTB đạt được là thấp nhất, chỉ đạt đến giỏ trị 22x10P 4
PTB/mL. Khi chuyển sang cấp độ bỡnh nuụi lớn hơn và cú sục khớ, MĐTB đó tăng lờn đỏng kể, đạt đến giỏ trị 31 và 27x10P
4 P TB/mL ở cỏc bỡnh 1,5 lớt và 10 lớt, tương ứng.
- Vũng đời của tế bào tảo được nuụi ở cỏc bỡnh thớ nghiệm cú thể tớch lớn đi kốm theo cú sục khớ sẽ được rỳt ngắn hơn so với bỡnh tam giỏc khụng sục khớ (nuụi tĩnh). Cụ thể chỉ sau 34 ngày, tế bào đó đạt đến giai đoạn chớn khi được nuụi trồng ở cỏc bỡnh nhựa cú thể tớch 1,5 và 10 lớt trong khi đú ở bỡnh tam giỏc 1 lớt thỡ giai đoạn này kộo dài tới 62 ngày.
Viện CNSH & Thực phẩm 65 Luận văn thạc sỹ khoa học
- Giai đoạn nảy mầm của tế bào tảo được nuụi ở cỏc bỡnh thớ nghiệm cú thể tớch lớn đi kốm
theo cú sục khớ sẽ được rỳt ngắn hơn so với bỡnh tam giỏc khụng sục khớ (nuụi tĩnh). Khi tảo được nuụi ở bỡnh nhựa cú thể tớch 1,5 và 10 lớt thỡ cỏc tế bào bắt đầu nẩy mầm từ cỏc dạng bọc (panale) hoặc nảy mầm trực tiếp chỉ sau 16 giờ chỳng được chuyển sang mụi trường mới. Trong khi đú, nếu tế bào tảo được nuụi trồng ở ở bỡnh 1 lớt thỡ phải sau 24 giờ mới nảy mầm được.