Trong thí nghiệm này, chúng tôi sử dụng dòng TB Sarcoma 180. Quy trình tiến hành như sau:
Trích báng chuột đã được giữ giống 10 ngày bằng kim tiêm 18G.
Ly tâm tế bào 1200v/p trong 5 phút, rửa tế bào bằng PBS 3 lần.
Đếm tế bào, chia tế bào vào các ống ly tâm 1,5 ml với mật độ 1 triệu TB/ml.
Bổ sung hạt nano từ bọc Starch vào các ống tế bào
Gia nhiệt khảo sát ở hai điều kiện là khác nhau về nồng độ hạt nano từ và thời gian gia nhiệt các ống tế bào trên. Thí nghiệm gia nhiệt được thực hiện tại phòng Vật liệu Siêu dẫn, viện Khoa học Vật liệu.
Sau khi gia nhiệt, nhuộm TB bằng Blue trypan 0,4% theo tỷ lệ 1:1 trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Sau đó, tiến hành đếm và xác định tỷ lệ sống chết của tế bào.
2.3.3. Xác định tỷ số phát triển u (GR%) và tỷ số ức chế u (IR%), và thời gian
sống kéo dài thêm (ILS%)
Chúng tôi sử dụng 40 chuột Swiss đã được cấy truyền 106 tê bào Sarcoma 180 trong thí nghiệm này. Chuột được phân lô thí nghiệm như sau:
Bảng 2.1. Phân lô thí nghiệm nghiên cứu tác dụng của dung dịch HHĐH
Lô Mục đích ĐCUT (20 chuột) Anolyte +900mV (20 chuột)
Mổ sau 10 ngày cấy
truyền (chuột) 10 10
Theo dõi thời gian sống
của chuột (chuôt) 10 10
Ngày thứ 10 sau khi cấy truyền TBUT chúng tôi mổ một nửa số chuột ở mỗi lô để xác định số lượng tế bào ung thư có trong xoang bụng chuột nhằm xác định tỷ số phát triển u và tỷ số ức chế u của dung dịch HHĐH. Số chuột còn lại tiếp tục được chăm sóc theo dõi để xác định thời gian sống kéo dài thêm của chuột.
Phương pháp xác định GR% và IR% và ILS % của chuột thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp thường quy tại phòng thí nghiệm thuộc nhóm Nghiên cứu Ung thư thực nghiệm, Bộ môn Tế bào Mô Phôi và Lý sinh (8).