Colchicine đến khả năng tạo thể đa bội ở mầm hạt cam quýt
Kết quả nghiên cứu tạo đa bội thể của một số tác giả cho thấy xử lý đa bội thể bằng Colchicine trên cành gặp nhiều khó khăn khi xuất hiện thể khảm do sự không đồng đều về tuổi sinh lý và chu kỳ tế bào của mẫu khi xử lý. Vì vậy việc xử lý Colchicine trên hạt có thể hạn chế bớt tỷ lệ cây khảm, do hiện tượng nảy mầm của các hạt xảy ra gần như đồng nhất.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.20: Ảnh hƣởng của thời gian và nồng độ Colchicine đến khả năng đa bội của cây sau xử lý ở dòng bƣởi TN4.
Chỉ tiêu Công thức ∑ số mẫu kiểm tra
Số cây nhị bội Số cây tứ bội Số cây thể khảm
Thời gian
Nồng độ (%)
Số
cây (%) Số cây (%) Số cây (%)
6h 0,005 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,01 10 9 90,0 1 10,0 0 0,0 0,02 10 9 90,0 1 10,0 0 0,0 0,05 7 5 71,4 2 28,6 0 0,0 0,1 6 5 83,3 1 16,7 0 0,0 0,2 2 1 50,0 1 50,0 0 0,0 12h 0,005 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,01 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,02 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,05 7 6 85,7 1 14,3 0 0,0 0,1 7 2 28,6 5 71,4 0 0,0 0,2 4 2 50,0 2 50,0 0 0,0 24h 0,05 2 2 100,0 0 0,0 0 0,0 0,1 2 0 0,0 2 100,0 0 0,0 0,2 0 0 0,0 0 0,0 0 0,0 48h 0,05 2 1 50,0 1 50,0 0 0,0 0,1 2 1 50,0 1 50,0 0 0,0 0,2 0 0 0,0 0 0,0 0 0,0 Tổng số 101 83 82,2 18 17,8 0 0,0
Qua bảng 3.20 cho thấy:
Ở dòng bưởi TN4 trong tổng số 101 mẫu kiểm tra thì có 83 mẫu ở thể nhị bội chiếm 82,2%, còn lại 18 mẫu ở thể tứ bội chiếm 17,8%, không có mẫu nào ở thể khảm.
- Số cây tứ bội thu được ở các nồng độ xử lý Colchicine trong thời gian 6 giờ là:
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
+ Ở các nồng độ 0,01%; 0,02% thu được 2 cây tứ bội trên tổng số 10 mẫu đem kiểm tra mức bội thể ở mỗi công thức.
+ Nồng độ xử lý 0,05% thu được 2 cây tứ bội chiếm 28,6% trên tổng số 7 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
+ Ở nồng độ xử lý 0,1% thu được 1 cây tứ bội chiếm 16,7% trên tổng số 6 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
+ Với nồng độ xử lý 0,2% thu được 1 cây tứ bội chiếm 50% số mẫu đem kiểm tra ở công thức này.
- Số cây tứ bội thu được ở các nồng độ xử lý Colchicine trong thời gian 12 giờ là:
+ Không thu được cây tứ bội nào ở các nồng độ xử lý 0,005% - 0,02%, + Ở nồng độ Colchicine 0,05% thu được 1 cây tứ bội chiếm 14,3% trên tổng số 7 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
+ Ở nồng độ xử lý 0,1% thu được 5 cây tứ bội chiếm 71,4% trên tổng số 7 mẫu đem kiểm tra mức bội thể,
+ Nồng độ xử lý 0,2% thu được 2 cây tứ bội chiếm 50% trên tổng số 4 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
- Thời gian xử lý 24 giờ trong dung dịch Colchicine ở nồng độ 0,1% thu được 2 cây tứ bội chiếm 100% trên tổng số 2 mẫu đem kiểm tra mức bội thể, Ở nồng độ 0,05%; 0,2% không thu được cây tứ bội nào.
- Với thời gian xử lý Colchicine kéo dài trong 48 giờ ở các nồng độ 0,05%; 0,1% thu được 2 cây tứ bội chiếm 50% trên tổng số 4 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.21. Ảnh hƣởng của thời gian và nồng độ Colchicine đến khả năng đa bội của cây sau xử lý ở dòng bƣởi TN9
Chỉ tiêu Công thức ∑ số mẫu kiểm tra Số cây nhị
bội Số cây tứ bội Số cây thể khảm
Thời gian Nồng độ (%) Số cây (%) Số cây (%) Số cây (%) 6h 0,005 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,01 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,02 10 9 90,0 1 10,0 0 0,0 0,05 5 5 100,0 0 0,0 0 0,0 0,1 10 7 70,0 3 30,0 0 0,0 0,2 8 6 75,0 1 12,5 1 12,5 12h 0,005 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,01 10 10 100,0 0 0,0 0 0,0 0,02 5 5 100,0 0 0,0 0 0,0 0,05 8 7 87,5 0 0,0 1 12,5 0,1 9 9 100,0 0 0,0 0 0,0 0,2 5 3 60,0 1 20,0 1 20,0 24h 0,005 7 6 85,7 1 14,3 0 0,0 0,01 6 5 83,3 1 17,7 0 0,0 0,02 5 3 60,0 2 40,0 0 0,0 0,05 0 0 0,0 0 0,0 0 0,0 0,1 3 0 0,0 3 100,0 0 0,0 0,2 0 0 0,0 0 0,0 0 0,0 48h 0,05 2 2 100,0 0 0,0 0 0,0 0,1 0 0 0,0 0 0,0 0 0,0 0,2 2 2 100,0 0 0,0 0 0,0 Tổng số cây 125 109 87,2 13 10,4 3 2,4
Ở dòng bưởi TN9 với tổng số 125 mẫu đem kiểm tra mức bội thể thì có 109 mẫu ở thể nhị bội chiếm 87,2%, 13 mẫu ở thể tứ bội chiếm 10,4%, 3 mẫu ở thể không xác định (thể khảm). Kết quả thu được thể hiện ở bảng 4.21:
- Trong thời gian xử lý Colchicine 6 giờ:
+ Ở nồng độ 0,02% thu được 1 cây tứ bội chiếm 10% trên tổng số 10 mẫu đem kiểm tra mức bội thể.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
+ Nồng độ 0,2% thu được 1 cây tứ bội chiếm 12,5% trên tổng số 8 mẫu đem kiểm tra mức bội thể, và 1 cây không xác định được mức bội thể chiếm tỷ lệ 12,5%. Với nồng độ 0,005%; 0,01%; 0,05% không thu được cây tứ bội nào.
- Trong thời gian xử lý Colchicine 12 giờ duy nhất ở nồng độ 0,2% thu được 1 cây tứ bội và 1 cây không xác định mức bội thể chiếm 20% trên tổng số 5 mẫu đem kiểm tra. Ở nồng độ 0,05% thu được 1 cây thể khảm chiếm 12,5% trên tổng số 8 mẫu kiểm tra. Các công thức còn lại thu được 100% cây nhị bội.
- Trong thời gian xử lý Colchicine 24 giờ:
+ Ở nồng độ 0,005% thu được 1 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 14,3% trên tổng số 7 mẫu đem kiểm tra.
+ Ở nồng độ 0,01% thu được 1 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 17,7% trên tổng số 6 mẫu đem kiểm tra.
+ Ở nồng độ 0,02% thu được 2 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 40% trên tổng số 5 mẫu đem kiểm tra.
+ Ở nồng độ 0,1% thu được 3 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 100% trên tổng số 3 mẫu đem kiểm tra,
- Với thời gian xử lý Colchicines trong 48 giờ không thu được cây tứ bội nào ở các nồng độ xử lý.
* Nhận xét rút ra từ phần 3.5.
- Sức bật mầm của hạt chịu ảnh hưởng của nồng độ và thời gian xử lý Colchicines. Nồng độ càng cao, thời gian xử lý càng cao thì tỷ lệ bật mầm của hạt càng giảm.
- Liều lượng gây chết 100% có khác nhau đối với hai dòng tham gia thí nghiệm: đối với TN4 100% mẫu xử lý chết ở nồng độ 0,2%, thời gian xử lý từ 24 đến 48giờ. Trong khi đó, ở nồng độ 0,2% thời gian xử lý 48 giờ thì tỷ lệ nảy mầm của dòng TN9 là 10%.
- Công thức thí nghiệm đạt hiệu quả cao nhất với tạo cây tứ bội từ hạt là xử lý Colchicines ở nồng độ 0,1%, thời gian xử lý 24 giờ. Ở công thức này thu được 100% số cây đem kiểm tra mức bội thể đều là cây tứ bội.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
CHƢƠNG IV