- Độ chụm của thiết bị
3.4. Phân tích mẫu thực tế và đo đối chứng với phương pháp tiêu chuẩn HPLC
3.4.1.2. Mẫu thuốc Salbutamol dạng viên
Mẫu thử được chuẩn bị theo quy trình:
Lấy 10 viên thuốc cân, nghiền thành bột và trộn đều. Cân chính xác 5,0mg Salbutamol dạng bột vào bình định mức 10,0ml, thêm 5,0ml nước đề-ion, siêu âm khoảng 10 phút sau đó định mức tới vạch bằng nước. Hỗn hợp được ly tâm (8000 rpm) trong 10 phút. Dung dịch thu được được lọc qua màng 2 µm và được pha với tỉ lệ thích hợp trước khi tiến hành bơm mẫu vào thiết bị CE
Tiến hành xác định sự có mặt của Salbutamol có trong mẫu thuốc dạng viên bằng phương pháp thêm chuẩn Salbutamol ở các mức nồng độ khác nhau:
+ Mức 0: Không thêm chuẩn Salbutamol vào mẫu thử
+ Mức 1: Thêm 100µL dung dịch chuẩn Salbutamol 1000 ppm vào 5,0 ml mẫu thử
+ Mức 2: Thêm 200µL dung dịch chuẩn Salbutamol 1000 ppm vào 5,0 ml mẫu thử
+ Mức 3: Thêm 300µL dung dịch chuẩn Salbutamol 1000 ppm vào 5,0 ml mẫu thử
Giản đồ điện di thêm chuẩn xác định sự có mặt Salbutamol trong mẫu thuốc dạng viên như trong hình 3.14.
600 500
400 300
200
Thêi gian di chun (s) 20mV
Sal
Hình 3.14. Điện di đồ xác định Salbutamol trong mẫu thuốc dạng viên sau khi thêm chuẩn Salbutamol ở các nồng độ khác nhau
Căn cứ vào diện tích pic thu được trên điện di đồ, dựa vào phương trình đường thêm chuẩn (hình 4.1-a ở phần phụ lục) sẽ tính được nồng độ Salbutamol có trong mẫu thuốc dạng viên. Kết quả thu được như trong bảng 3.20.
Bảng 3.20. Kết quả xác định nồng độ Salbutamol trong mẫu thuốc Salbutamol dạng viên
Tương tự, để kiểm tra khả năng xác định đồng thời sự có mặt của 3 chất Sal, Met và Rac trong nền mẫu dạng viên bằng phương pháp CE-C4D, chúng tôi thêm chất chuẩn của hai chất còn lại là Met và Rac vào và tiến hành phân tích điện di, kết quả cũng cho thấy hồn tồn có khả năng xác định đồng thời các chất này trong nền mẫu dạng viên nén. Kết quả thể hiện trong hình 3.15.
800 600
400 200
0
Thêi gian di chuyÓn (s) 50mV Sal vien + 0ppm SMR Sal vien + 60ppm SMR Sal Rac Met Sal
Hình 3.15. Điện di đồ xác định sự có mặt đồng thời của Sal, Met, Rac trong nền mẫu thuốc Salbutamol dạng viên
CSal thêm chuẩn (ppm)
Mẫu thuốc Salbutamol dạng viên
Diện tích pic (Spic) trung bình (mV.s) Hàm lượng Salbutamol sunfat trong 1 viên (mg) Hàm lượng Salbutamol sunfat ghi trên nhãn trong 1
viên (mg)
20,0 27,2
3,51 ± 0,11 4,00
40,0 42,2