CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.3. CÁC PHƢƠNG PHÁP CHẨN ĐỐN EV TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM
1.3.3. Phƣơng pháp huyết thanh học
Phƣơng pháp huyết thanh học hiện nay đƣợc sử dụng rộng rãi là ELISA và test nhanh. ELISA là phƣơng pháp giúp xác định đƣợc kháng nguyên hay nồng độ kháng thể của ngƣời bệnh đang bị nhiễm EVs cấp tính hay mãn tính. Phƣơng thức xác định kháng thể chỉ có thể xác định virus coxsackie B1-6 và Echo 6, 7, 9, 11, và 30. Các EVs khác không thể đƣợc xác định bằng phƣơng pháp này. Kết quả xét nghiệm kháng thể cho kết quả âm tính khơng có nghĩa là ngƣời bệnh không nhiễm EV và phải mất ít nhất 3 ngày mới có kết quả. Nồng độ kháng thể đƣợc so sánh trong hai mẫu huyết thanh, mẫu huyết thanh đầu tiên đƣợc lấy trong vòng 5 ngày kể từ khi khởi phát triệu chứng và mẫu thứ hai đƣợc lấy vài ngày sau đó. Sự tăng đáng kể về nồng độ là bằng chứng cho q trình nhiễm cấp tính. Các bệnh về tim mạch do EVs gây ra rất hiếm khi có sự gia tăng đáng kể về nồng độ kháng thể, khi có sự gia tăng này, nó đƣợc xem là kết quả cuối của nhiễm virus coxsackie B.Gần đây, các phân tích bắt cặp kháng thể M trở nên phổ biến với các serotype Coxsakie virus A, B và echovirus. Tuy nhiên, phản ứng chéo giữa các đáp ứng IgM với EVs khác cũng diễn ra trong đó bao gồm cả viêm gan siêu vi A. Bệnh nhân càng lớn tuổi càng có nhiều khả năng xảy ra đáp ứng đó. IgM của EVs thƣờng kéo dài 8-12 tuần nhƣng có thể vẫn tồn tại lâu hơn trong một số bệnh nhân, cho đến một vài năm. Điều này cho thấy các đáp ứng kéo dài nhƣ vậy tồn tại trong q trình nhiễm mãn tính ở một số trƣờng hợp viêm màng ngoài tim tái phát. Khoảng 30-40% bệnh nhân viêm cơ tim, 60-70% bệnh nhân bị viêm màng não vô khuẩn, và 30% bệnh nhân bị hội chứng mệt mỏi sau nhiễm virus cho kết quả dƣơng tính với IgM virus coxsackie B. Tuy nhiên, 10% ngƣời trƣởng thành bình thƣờng cũng sẽ cho một kết quả dƣơng tính, có lẽ là do đã trải qua quá trình nhiễm EVs. Do vậy, kết quả xét nghiệm IgM dƣơng tính khơng có nghĩa bệnh nhân đang nhiễm cấp tính với EVs [14].
Phƣơng pháp test nhanh thƣờng đƣợc các công ty thƣơng mại sản xuất cho các subtype gây ra các vụ dịch lớn và thƣờng xuyên lƣu hành. Các bộ kit đƣợc tạo ra để xác định nhanh kháng thể IgM trong máu của bệnh nhân. Ƣu điểm của chúng là thƣờng rất dễ sử dụng, cho kết quả nhanh, không yêu cầu về trang thiết bị. Tuy
nhiên nhƣợc điểm của phƣơng pháp này là yêu cầu nghiêm ngặt về thời gian lấy mẫu phải phù hợp với đáp ứng miễn dịch của vật chủ.