CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.4. Multiplex PCR và ứng dụng
1.4.7. Tình hình ứng dụng kỹ thuật PCR trong việc xác định các tác nhân nhiễm
nhiễm khuẩn huyết
Hiện nay, khá nhiều các nhà khoa học đã tập trung phát triển kỹ thuật PCR, multiplex PCR, multiplex realtime PCR trong kiểm soát các tác nhân gây nhiễm khuẩn.
Anbazhagan D và tập thể (2011) phát triển các xét nghiệm PCR thông thường và multiplex realtime PCR để phát hiện mầm bệnh bệnh viện [7]. Gadsby NJ và tập thể (2016) dùng các kỹ thuật PCR xác định tác nhân gây bệnh đường hô hấp trong cộng đồng viêm phổi mắc phải [32]. Aydemir O và tập thể (2014) xác định vai trò của multiplex PCR xác định các vi khuẩn gây bệnh nhiễm khuẩn đường hô hấp dưới [13]. Ở Thổ Nhĩ Kỳ, Kurutepe S và tập thể (2012) điều tra nguyên nhân do vi khuẩn bằng phương pháp PCR thông thường và multiplex ở bệnh nhân người lớn bị viêm phổi cộng đồng [46]. Eser O.K. và tập thể (2012) so sánh phương pháp nuôi cấy và phương pháp realtime PCR trong việc phát hiện vi khuẩn Streptococcus pneumoniae và Haemophilus influenzae trong viêm tai giữa cấp mẫu vật tràn dịch [29]. Jbara
I và tập thể (2007). So sánh phương pháp nuôi cấy và các phương pháp PCR cho các phát hiện của Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae và Moraxella catarrhalis trong dịch não tủy và tràn dịch tai giữa [41]. Thong
K.L và tập thể (2011) đã xây dựng phản ứng multiplex PCR phát hiện đồng thời Staphylococcus aureus kháng methicillin, Acinetobacter baumannii,
Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae và Pseudomonas aeruginosa. Kết
quả khảo sát trên 50 mẫu kết quả dương tính và âm tính tương đồng 100% so với kết quả xác định bằng phương pháp nuôi cấy.
Ở Việt Nam, có một số nghiên cứu cũng như các nhà khoa học sử dụng kỹ thuật PCR trong chẩn đoán các tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết cũng như
nhiễm khuẩn bệnh viện: Nhóm nghiên cứu của PGS.TS. Lê Hữu Song, nhóm các bác sỹ ở Viện truyền nhiễm Trung ương, nhóm nghiên cứu thuộc bệnh viện Nhi Trung Ương, nhóm nghiên cứu thuộc bệnh viện Việt Đức, Bạch Mai, Thanh Nhàn,… Đa số các nghiên cứu sử dụng các Kit ngoại nhập hoặc các cặp mồi tham khảo trên tạp chí quốc tế ví dụ một nghiên cứu đăng trên tạp chí Y học thực hành của tác giả Phùng Thị Bích Thủy và tập thể đã sử dụng bộ Kit Real Time PCR đa mồi SeptiFast (Roche) trong chẩn đoán căn nguyên gây nhiễm trùng huyết ở trẻ em tại Bệnh viện Nhi Trung ương [5]. Nhóm nghiên cứu phát hiện được 43,3% dương tính trong khi phương pháp cấy máu truyền thống chỉ phát hiện được 3,3% tác nhân gây bệnh nhiễm trùng huyết. Các tác nhân nhiễm trùng huyết thường gặp nhất là Klebsiella pneumonia/oxytoca có tần số xuất hiện cao nhất ở 7 bệnh nhân (23,3%), tiếp
sau là Enterobacter cloacae/aerogenes với 2 trường hợp (6,6%), thêm vào đó là các vi khuẩn và nấm khác như: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida parapsilosis, Aspergillus fumigatu, Candida albicans, Escherichia coli, Stenotrophomonas maltophilia.