Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.5. Phương pháp theo dõi các chỉ tiêu
- Phương pháp theo dõi các ch ỉ tiêu đối với các giống rau cải xanh (Hoàng Th ị Thái Hòa, 2009 [28])
Các ch ỉ tiêu về sinh trưởng của cây:
+ Mỗi ô thí nghiệm theo dõi 10 cây để đánh giá các chỉ tiêu sinh trưởng. + Thời gian sinh trưởng và phát tri ển của rau cải (ngày): Theo dõi th ời gian sinh trưởng của cây rau từ khi gieo đến các giai đoạn: mọc mầm, hồi xanh, trải lá, giao tán, thu hoạch. Thời gian sinh trưởng của rau cải được tính từ gieo trồng đến thu hoạch (khi 5% số cây bắt đầu có ngồng).
+ Chiều cao cây (cm): Được tiến hành đo sau khi cải bén rễ hồi xanh và định kỳ 4 ngày/lần. Chiều cao cây được tính từ mặt đất tự nhiên đến mút lá cao nhất, dụng cụ đo là thước chia cm.
+ Số lá/cây (lá): Được tiến hành đo sau khi cải bén rễ hồi xanh và định kỳ 4 ngày/lần. Số lá được xác định từ lúc cây có 2 lá thật, dùng sơn đỏ đánh dấu sau mỗi lần theo dõi.
+ Đường kính tán cây: Được tiến hành đo sau khi cải bén rễ hồi xanh và định kỳ 4 ngày/lần. Đường kính tán được đo khi cây bắt đầu có 2 lá thật, dụng cụ đo là thước chia cm.
+ Chiều dài lá khi thu ho ạch (cm): chọn một lá trên cây phát tri ển tốt, cân đối không bị rách, không bị sâu bệnh, dùng thước chia vạch cm đặt mốc 0 cm sát gốc lá, dựng thước dọc theo chiều phát triển của lá. Lấy tay vuốt nhẹ cho lá thẳng nằm sát trên thước, quan sát đỉnh lá trên vạch thước ta được chiều dài của lá.
không b ị rách, không sâu bệnh. Đặt thước đo áp sát trên m ặt lá ở chổ rộng nhất của lá lớn nhất, quan sát mép lá bên này t ới mép lá bên kia trên v ạch thước.
Các ch ỉ tiêu về năng suất :
* Năng suất lý thuyết:
NSLT (tấn/ha ) = số cây/m2 x Khối lượng trung bình 1 cây (g) x 10.000 1000000
* Năng suất sinh học:
NSSH (tấn/ha) = Khối lượng trung bình 1m
2 (kg) x 10000 x 0,8 1000
* Năng suất kinh tế:
NSKT (tấn/ha) = Khối lượng trung bình phần ăn được 1m2 (kg) x 10000 x 0,8 1000
Khối lượng tươi và khối lượng khô:
+ Khối lượng tươi toàn cây (g/cây): Được xác định bằng cách cân khối lượng cây tươi.
+ Khối lượng khô (g/cây): đem các mẫu đã xác định khối lượng ở trên sấy ở nhiệt độ 1050C cho đến khi khối lượng không đổi, cân và tính khối lượng bình quân.
Khối lượng khô (tấn/ha) =
Đánh giá phẩm chất rau:
Khối lượng sau sấy
Khối lượng tươi
× 100
+ Độ dòn (dai) c ủa rau: Đánh giá bằng cảm quan theo phương pháp cho điểm như sau: 1 điểm: dai, 2 điểm: dòn
+ Độ ngọt (độ đắng) của rau: Đánh giá b ằng cảm quan theo phương pháp cho điểm như sau: 1 điểm: đắng; 2 điểm: ít đắng; 3 điểm: ít ngọt; 4 điểm: ngọt; 5 điểm: rất ngọt
Tính hiệu quả kinh tế:
+ Lãi ròng = T ổng thu - tổng chi
+ Tổng chi = Giống + Phân bón + Thuốc BVTV + Công lao động.
+ VCR: tỷ số giữa tổng thu tăng do bón phân và chi phí phân bón tăng thêm
Các ch ỉ tiêu về sâu bệnh (Tiêu chuẩn ngành 10TCN 923:2006 [4]) :
- Đối với sâu hại:
+ Điều tra 5 điểm, mỗi điểm là 1 khung (40 cm x 50 cm), 4 ngày điều tra một lần. Quy đổi mật độ sâu hại từ khung điều tra ra m2 (con/m2) = Số sâu điều tra được/khung x 5 (5 khung = 1m2).
+ Đối với rệp, điều tra 5 điểm, mỗi điểm 5 cây. Mật độ rệp được tính như sau: Tổng số rệp điều tra
Mật độ rệp gây hại (con/cây) =
Tổng số cây điều tra + Đánh giá tính kháng rệp (Trần Đăng Hòa và cs, 2014 [27]) :
Nuôi qu ần thể rệp (Brevicoryne brasicae) để làm thí nghiệm bằng giống
cải xanh mỡ (Trang Nông). Nuôi r ệp (Brevicoryne brasicae) để xác định đặc điểm
sinh học bằng lá của 8 giống cải xanh: Xanh mỡ Trang Nông (XMTN) - (đối chứng); Xanh Lùn Thanh Giang (XLTG) ; Xanh lá vàng (XLV) ; Xanh mỡ số 6 (XMS6); Mơ Hoàng Mai (MHM); Xanh cao cây Trang Nông (XCCTN) ; Xanh mỡ cao sản (XMCS); Xanh tàu lá chu ối (XTLC). Nuôi r ệp trong hộp nhựa nhỏ (5 cm x 1,5 cm) có m ẫu lá cải xanh (3 cm2) và lót gi ấy thấm nước ở dưới đáy. Tất cả các hộp nuôi rệp được đặt ở trong tủ lưới ở điều kiện nhiệt độ ngoài trời.
*Theo dõi th ời gian phát dục, tỷ lệ sống của rệp trên các gi ống rau cải
Cho vào mỗi hộp nuôi sâu 1 r ệp non mới đẻ (nuôi cá thể). Thay thức ăn, theo dõi r ệp lột xác, rệp chết hằng ngày cho đến khi rệp hóa trưởng thành. Thí nghiệm được lặp lại 60 rệp con trên mỗi giống rau cải.
Theo dõi th ời gian sống, số con đẻ ra của rệp: cho vào mỗi hộp nuôi sâu 1 rệp trưởng thành mới vũ hóa. Thay thức ăn, theo dõi và đếm số rệp đẻ hằng ngày cho đến khi rệp trưởng thành chết. Thí nghiệm được lặp lại 30 rệp trưởng thành trên mỗi giống rau cải.
* Tỷ lệ sống sót c ủa rệp được xác định bằng số lượng rệp con sống đến tuổi x / tổng số rệp theo dõi.
* Xác định tỷ lệ phát tri ển quần thể của rệp trên các gi ống rau cải
Hằng ngày xác định số lượng rệp con của mỗi rệp trưởng thành. Tính hệ số nhân sau một thế hệ (R0), thời gian trung bình của 1 thế hệ (T) và tỷ lệ tăng tự nhiên (rm) theo công t hức của Brich (1948) [74].
R0 = ∑(lxmx ) ; T = ∑( x lxmx )/ ∑(lxmx) ∑(exp(rmx)lxmx ) = 1
Trong đó, x là tuổi thọ của rệp trưởng thành cái, l x là tỷ lệ con cái sống đến tuổi x, mx là số lượng rệp con được sinh ra của một rệp trưởng thành
* Tính lựa chọn thức ăn của rệp trên các gi ống rau cải
Dùng hộp nhựa (20 cm x 22 cm x 7 cm) để làm thí nghiệm. Cho 8 loại thức ăn vào trong hộp, xếp các thức ăn xung quanh hộp và đánh dấu vị trí các loại thức ăn. Cho 100 con rệp tuổi 2 vào giữa hộp sao cho khoảng cách từ rệp đến thức ăn cân xứng. Sau 3 ngày, đếm số rệp (trưởng thành và r ệp con) có trên m ỗi loại thức ăn. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần. Tính tỷ lệ phần trăm rệp trên lá c ủa mỗi giống rau.
- Đối với bệnh hại: Tiến hành điều tra theo 5 điểm chéo góc, điều tra 10 lá ngẫu nhiên/điểm . Sự phát sinh phát triển, mức độ bệnh được tính bằng chỉ tiêu tỷ lệ bệnh như sau:
Số lượng lá bị bệnh
Tỷ lệ bệnh (%) = × 100
Tổng số lá điều tra
- Phương pháp theo dõi và tính hiệu lực thuốc bảo vệ thực vật
Phương pháp điều tra theo dõi :
+ Điều tra sâu hại sống trên ruộng trước khi xử lý thu ốc 1 ngày và sau khi xử lý thuốc 1, 3, 5, 7, 14, ngày.
+ Số điểm điều tra: mỗi ô thí nghiệm điều tra 5 điểm chéo góc, m ỗi điểm điều tra 5 cây.
Phương pháp tính hiệu lực thuốc:
+ Hiệu lực (%) của các loại thuốc trừ sâu, tỷ lệ giảm mật độ quần thể các loại thiên địch bắt mồi, được hiệu chỉnh theo công th ức Henderson_Tilton [49]:
H(%) =(1– )× 100
Trong đó:
H: Hiệu lực (%)
Ca: số cá thể sống ở công thức đối chứng sau phun thuốc Tb: số cá thể sống ở công thức xử lý trước phun thuốc Cb: số cá thể sống ở công thức đối chứng trước phun thuốc Ta: số cá thể sống ở công thức xử lý sau phun thu ốc -Phương pháp lấy mẫu và phân tích mẫu trong phòng thí nghiệm
Phương pháp lấy mẫu
*Phương pháp lấy mẫu rau:
Lấy mẫu rau theo tiêu chuẩn ngành 10TCN 449-2001:
+ Tại các điểm điều tra: mỗi mẫu rau được lấy ngẫu nhiên 5 điểm trên đồng ruộng vào thời điểm gần thu hoạch. Sử dụng một nữa số lượng mẫu thu được đem đi phân tích hàm lượng NO3- tại phòng thí nghiệm. Số lượng mẫu thu được còn l ại dùng để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật bằng bộ kít kiểm tra nhanh thuốc trừ sâu VPR10 (do viện Kỹ thuật hóa sinh - Tổng cục kỹ thuật - Bộ công an nghiên cứu).
+ Tại ruộng thí nghiệm: mỗi mẫu rau được lấy ngẫu nhiên từ 5 điểm/ô vào thời điểm gần thu hoạch theo đường chéo gốc, lấy tất cả các lần nhắc lại. Sau đó đem đi phân tích lượng NO3- tại phòng thí nghiệm.
* Phương pháp l ấy mẫu đất:
+ Lấy mẫu theo TCVN 367:1999. Mẫu đất được lấy cùng v ới địa điểm lấy mẫu rau bằng phương pháp đường chéo ở tầng canh tác (0 - 20 cm) lấy 5 điểm/ô, sau đó trộn đều rồi lấy mẫu trung bình theo nguyên tắc chia 4, mỗi mẫu khoảng 500 gam.
* Phương pháp lấy mẫu nước:
+ Mẫu nước: Lấy mẫu nước tưới cho rau tại các mương, giếng theo tiêu chuẩn TCVN 5996 - 1995, lấy ở độ sâu 20 - 30 cm
Phương pháp phân tích các ch ỉ tiêu trong phòng thí nghiệm
* Xác định NO3-: Bằng phương pháp điện cực chọn lọc ion, đo trên máy SenSion 2 của hãng HACH, với viên xúc tác ISA.
Hàm lượng NO3- trong rau được xác định theo công th ức:
Hàm lượng NO3- (mg/kg tươi) =
100. X
Tổng diện tích điều tra
Trong đó: X: Nồng độ NO3- đo được (mg/l hoặc ppm) a: Khối lượng mẫu phân tích (g)
*Xác định kim loại nặng: Kim loại Cd, Pb xác định bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) trên máy AAS - Perkin - Elmer 3110 (hỗn hợp khí đốt: khí Axetylen -N O - không khí, nguồn kích hoạt đèn catod rỗng).
2
Kim loại Hg, As xác định bằng phương pháp cực phổ (chế độ vol-amper hoà tan, điện cực quay)
*Xác định các chỉ tiêu: pH, Mùn (%), đạm tổng số, lân tổng số và d ễ tiêu, kali tổng số và d ễ tiêu.
+ pH: Phương pháp pHmetter, điện cực thủy tinh + Mùn (%) : Theo phương pháp Thiurin
+ N tổng số: Theo phương pháp Kjeldahl.
+ P2O5 tổng số, P2O5 dễ tiêu: Xác định trên máy Quang ph ổ kế (Spectrophotometer)
+ K2O ts, dt: Xác định trên máy quang ph ổ hấp thụ nguyên tử AAS
*Kiểm tra nhanh thuốc trừ sâu nhóm lân hữu cơ và carbamate bằng bộ kít VPR10: Phương pháp phân tích được thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất (Phụ lục 4)