5. Bố cục luận văn
1.3.3. Tính chất của chế phẩm enzyme cố định
Khi enzyme được cố định trên chất mang, hoạt động của nó bị giới hạn trong một vi môi trường nhất định, nên có những tính chất khác hơn so với khi ở dạng tự do trong dung dịch (dạng hòa tan). Tính chất của enzyme không tan còn phụ thuộc vào phương pháp cố định và bản chất của chất mang [8]. Cụ thể như sau:
a. Hoạt độ riêng (số đơn vị hoạt động tính trên mg hay g protein enzyme)
Thấp hơn ở dạng hòa tan, có thể do:
- Bị cản trở không gian so với khi ở dạng tự do, ảnh hưởng đến sự khuếch tán tự do của cơ chất đến enzyme.
- Sự tiếp xúc với cơ chất bị giới hạn, trong trường hợp enzyme bị giữ trong các mắt lưới của gel, hay bị bọc trong các capsule.
- Bị thay đổi cấu trúc không gian sau khi kết hợp với chất mang bằng liên kết cộng hóa trị, hoặc tạo liên kết chéo giữa các phân tử enzyme.
- Bị kìm hãm hoặc bị biến tính một phần dưới tác dụng của một số yếu tố khác nhau trong quá trình cố định enzyme.
b. Hằng số Km
Enzyme cố định hoàn toàn tuân theo định luật Michaelis – Menten nhưng hằng số Km biểu kiến có thể thay đổi do:
- Ảnh hưởng trường tĩnh điện của chất mang.
- Sự khuếch tán của cơ chất đến enzyme, có thể không đồng đều giữa lớp gần sát chất mang và các vùng khác.
- Sự khuếch tán của sản phẩm, đặc biệt đối với các enzyme nhạy với sự kìm hãm của sản phẩm.
Do nhiều nguyên nhân đã nêu, Km biểu kiến của enzyme không tan thường cao hơn của ở dạng hòa tan. Khi tăng nồng độ cơ chất, vận tốc khuếch tán của cơ chất đến enzyme cũng sẽ tăng đến một giới hạn nhất định. Nếu giới hạn này đạt được trước khi enzyme được bão hòa hoàn toàn với cơ chất thì V biểu kiến của enzyme cố định sẽ bé hơn khi ở dạng hòa tan [8].
c. Độ bền của enzyme cố định
Độ bền của enzyme cố định có thể không thay đổi, tăng lên hoặc bị giảm tùy thuộc vào khuynh hướng ảnh hưởng của vi môi trường của enzyme đối với sự biến tính. Trong nhiều trường hợp, độ bền của enzyme cố định thường lớn hơn khi ở dạng hòa tan [8].
d. Giá trị pH
pH thích hợp của enzyme có thể thay đổi, nhất là đối với các chất mang tích điện, có thể thay đổi đến 2 đơn vị pH [8].