3. Nội dung nghiên cứu
3.9. Ảnh hưởng của dịch chiết Lá khôi lên sự biểu hiện của protein P21
Sự tăng cường phiên mã của gen P21 có ý nghĩa rất quan trọng trong sự hoạt hóa con đường tín hiệu lão hóa tế bào. Để đánh giá tác động của chiết Lá khôi lên sự biểu hiện của P21 ở mức độ protein, chúng tôi đã sử dụng phương pháp miễn dịch huỳnh quang với kháng thể đơn dòng kháng P21. Kết quả thu được, được trình bày trong hình 3.9.
Hình 3.9. Dịch chiết Lá khôi tác động lên sự biểu hiện của protein kiểm soát
chu kỳ tế bào P21. Mầu đỏ biểu thị sự biểu hiện của P21, mầu xanh lam biểu thị sự biểu hiện của DAPI (thuốc nhuộm nhân tế bào)
Kết quả ở hình 3.9 đã chỉ ra rằng, P21 được biểu hiện mạnh trong nhân tế bào MKN45 được xử lý với dịch chiết Lá khôi so với tế bào đối chứng điều này được thể hiện qua sự bắt mầu đỏ (hoặc đen trắng ở pha contrast) với cường độ cao ở mẫu xử lý so với mẫu đối chứng. Kết quả này khẳng định dịch chiết Lá khôi đã điều hòa tăng mạnh các gen P21, đây là gen chủ chốt liên quan đến quá trình lão hóa tế bào.
Năm 2014, Yim và cộng sự cũng chỉ ra rằng, việc điều trị bằng Guibi- tang (một bài thuốc thảo dược truyền thống) đã thay đổi biểu hiện của protein liên quan đến tiến trình pha G1. Cụ thể, biểu hiện của P21 và P27 đã tăng lên, trong khi mức cyclin D1 bị giảm. Ngược lại, mức độ cyclin B1, điều chỉnh pha G2/M, không bị ảnh hưởng bởi Guibi-tang [65]. CIL-102 là một hoạt chất chính dẫn xuất alkaloid của Camptotheca acuminata cũng đã được chứng minh rằng, CIL-102 gây ra dừng chu kỳ tế bào và apoptosis của các tế bào ung thư ruột kết bằng cách điều chỉnh tăng biểu hiện P21 và GADD45 và bằng cách kích hoạt JNK1/2, NFκB p50 và p300 để cung cấp một cơ chế mới cho điều trị CIL-102 và trong việc tạo ra P21 và GADD45 cũng như sự liên kết giảm của cdc2/cyclin B [82].
P21 giữ vai trò then chốt trong việc kiểm soát chu kỳ tế bào. Trong nghiên cứu này chúng tôi đã chỉ ra rằng, dịch chiết Lá khôi đã làm hoạt hóa sự biểu hiện của P21 biểu hiện tăng lên ở cả mức độ mRNA và protein của tế bào, dẫn tới làm dừng chu kỳ của tế bào.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ