Ngoài ra, dấu ấn sinh học mRNA trong BKVN cũng đang được quan tâm. Trong công bố của Ding và cộng sự, giá trị là 6,5 × 105
VP1 mRNA/ng RNA được thiết lập như một ngưỡng dự báo của BKVN [85]. Ngưỡng này đã được xác nhận trong một nghiên cứu khác, 12 trong số đó đã được kiểm tra sinh thiết BKVN [72]. mRNA granzyme B nước tiểu và mức mRNA protease inhibitor -9 cũng được chứng minh là dự báo về sự suy giảm chức năng ghép, cho thấy các nghiên cứu mới trong tương lai. Cơ sở dữ liệu mRNA nước tiểu có thể cung cấp thêm thông tin chẩn đoán và tiên lượng ngoài sinh thiết thận trong tương lai khi có những căn cứ rõ ràng hơn [71].
1.4.3.2. Realtime PCR
Phát hiện BKV trong huyết tương bằng kỹ thuật real-time PCR rất nhạy và đặc hiệu cho BKVN. Tùy thuộc vào nghiên cứu, độ nhạy có thểđạt 100% và độđặc hiệu là khoảng 90%, với PPV là 50% và NPV là 100%, vượt trội hơn so với việc phát hiện BKV-DNA trong nước tiểu bằng xétnghiệm tìm tế bào decoy hoặc PCR. Đây là phương pháp sàng lọc lý tưởng ở hầu hết các trung tâm ghép tạng [71]. Đồng thời, BKV máu rò rỉ trong nước tiểu là phổ biến và có thể xảy ra ở 30% số người ghép thận [49]. Với ưu điểm của real-time PCR huyết tương và giá trịtiên đoán của nó lớn hơn cho BKVN, không cần thực hiện xét nghiệm nước tiểu BKV trước khi xét nghiệm huyết tương [71]. Tuy nhiên, tương tự như các xét nghiệm real-time PCR trong theo dõi tải lượng EBV và CMV khác, hiện có sự khác biệt đáng kể trong cách thức phát triển kỹ thuật giữa các phòng thí nghiệm dẫn đến khó so sánh kết quả giữa các phòng thí nghiệm khác nhau cũng như xác định một giá trị ngưỡng trong chẩn đoán và điều trị BKVN [24]. Vấn đề này đã được Bechert và cộng sự nghiên cứu chi tiết khi so sánh kết quả giữa các kỹ thuật real-time PCR cũng như các bộ mồi đã công bố [63]. Tuy nhiên, Hirsch và cộng sựxác định rằng mức BKV huyết tương > 104
copy/ml trong hơn 4 tuần có liên quan đến sự xuất hiện của BKVN với độ đặc hiệu 93% [34] và giá trị này cũng được nêu trong các hướng dẫn và khuyến cáogần đây [32], [68]. Khuyến nghị này cũng đang được các trung tâm
ghép tạng sử dụng và cùng khảo nghiệm, sự thay đổi được xác nhận là ít nhất 1 log nồng độ [24].
Tuy nhiên, hiện nay xét nghiệm sinh thiết mô bệnh học (xác định bằng hóa mô miễn dịch, lai tại chỗ hay PCR) kèm theo bằng chứng của viêm thận kẽ hoặc creatinine huyết thanh tăng cao vẫn được coi là tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán BKVN. Xét nghiệm được khuyến cáo thực hiện ít nhất 2 lần lặp lại, hạn chế tối đa sai số trong lấy mẫu và ưu tiên mẫu có chứa các mô tế bào tủy thận. Do đó, khi có kết quả BKV trong máu kèm creatinine huyết thanh tăng cao hoặc khi tình trạng virus trong máu cao dai dẳng mặc dù đã giảm ức chế miễn dịch, bệnh nhân nên được chỉ định xét nghiệm sinh thiết mô bệnh học [21]. Chiến lược này dựa trên hiện tượng BKV trong máu được ghi nhận giảm có giá trị trong vòng 6 tháng sau khi giảm ức chế miễn dịch. Như vậy, việc theo dõi thường xuyên sự hiện diện của BKV trong máu có vai trò rất quan trọng trong quản lý và theo dõi điều trị bệnh nhân sau ghép thận [24], [68].