Tế bào lai A6G11C9 đƣợc phục hồi từ ống giống bảo quản trong nitơ lỏng - 196oC, khi tế bào đã sinh trƣởng thành một lớp đơn liên tục trên bề mặt chai nuôi T25 cm2 thì tiến hành cấy truyền tế bào ra chai T75 cm2 (Quy trình phục hồi và cấy truyền tƣơng tự nhƣ đối với tế bào myeloma sp2/0). Khi tế bào phát triển thành một lớp đơn liên tục (sinh trƣởng đến pha log) thì tiến hành thu tế bào để làm đƣờng cong sinh trƣởng. Đếm tế bào để xác định lƣợng số lƣợng tế bào, tính toán để chuẩn bị 12 ml huyền phù tế bào lai với mật độ 105 tế bào/ml sau đó chuyển vào các giếng của đĩa 24, mỗi giếng 1 ml (chuyển vào 12 giếng). Đặt đĩa vào trong tủ ấm nuôi ở 37oC, 5% CO2. Cứ sau 24 giờ thì đếm tế bào ở một giếng để xác định mật độ tế bào sống theo ngày, dịch nuôi cấy ở giếng đó đƣợc ly tâm 5000 vòng/phút trong 5 phút để loại bỏ cặn tế bào và cất giữ dịch nuôi cấy ở -20oC cho các phân tích sau này.
Các thông số tính toán:
Số thế hệ là số lần mà tế bào phân chia (g)
Nt = No.2g g = log (Ne/No)/ln2= (log Nt – log No)/ln2
Tốc độ sinh trƣởng (k) là số thế hệ sinh ra trong một đơn vị thời gian thƣờng biểu thị bằng số thế hệ trong một giờ:
k = g/t = (log Nt – log No)/(t.ln2)
Thời gian thế hệ là thời gian cần thiết để số lƣợng quần thể tăng lên gấp đôi: T= 1/k
Trong đó:
t: thời gian nuôi cấy
Nt: Số lƣợng tế bào ở thời điểm t No: Số lƣợng tế bào ban đầu